本文關(guān)鍵詞：人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞系的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞與腫瘤干細(xì)胞的發(fā)生過程極其相似,而且具有的干細(xì)胞特性極其接近人胚胎干細(xì)胞。因此,研究誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞有利于人們進(jìn)一步認(rèn)識并了解人類發(fā)育以及腫瘤的發(fā)生過程。目的:掌握建立人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞系的技術(shù),以便為特異性疾病細(xì)胞的重編程建立技術(shù)平臺,從而利用重編程技術(shù)研究疾病的發(fā)病機(jī)制。方法:將含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4個轉(zhuǎn)錄因子的反轉(zhuǎn)錄病毒感染人皮膚成纖維細(xì)胞(HS27細(xì)胞),在人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)產(chǎn)生人胚胎干細(xì)胞樣的克隆。挑取并進(jìn)一步擴(kuò)增,通過克隆形態(tài)、堿性磷酸酶活性、免疫熒光檢測是否有人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表達(dá),懸滴法檢測HS27細(xì)胞來源的克隆形成畸胎瘤的能力和驗證向3個胚層的分化能力。結(jié)果與結(jié)論:經(jīng)病毒感染誘導(dǎo)產(chǎn)生的胚胎干細(xì)胞樣克隆呈綠色熒光蛋白陰性,克隆在細(xì)胞形態(tài)方面與人胚胎干細(xì)胞克隆相似,進(jìn)一步擴(kuò)增經(jīng)堿性磷酸酶檢測克隆呈陽性,免疫熒光檢測克隆表達(dá)Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4,并且HS27細(xì)胞來源的克隆注入免疫缺陷小鼠體內(nèi)可以形成畸胎瘤并經(jīng)蘇木精-伊紅染色顯示具有向三胚層分化能力。實驗成功構(gòu)建了人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞系,為下一步開展疾病細(xì)胞特異性重編程研究奠定了良好的實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科;內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理解剖教研室;
【關(guān)鍵詞】： 誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞 畸胎瘤 干細(xì)胞 培養(yǎng) 人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞 人胚胎干細(xì)胞 三胚層分化 Oct Sox c-Myc Klf-
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 文章亮點:1誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞是將不可逆的終末分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂杏郎o限分化能力的類胚胎干細(xì)胞。這一特點,與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生過程極其相似,因此通過研究誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞,可以為腫瘤基礎(chǔ)研究和臨床診斷與治療提供一種新的解決途徑。2實驗將攜帶4種基因的反轉(zhuǎn)錄病毒

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本文編號：458034