本文關鍵詞：應用RNA干擾技術對旋毛蟲蛋白酶體β7亞基基因功能的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究旋毛蟲蛋白酶體β7亞基(T.spiralis proteasome subunit beta type-7,Tspst)的基因功能。方法通過浸泡法將Tspst特異性的dsRNA(dsRNA-Tspst)導入旋毛蟲肌幼蟲體內,應用Real-time PCR和Western blot檢測經(jīng)dsRNA-Tspst浸泡處理后幼蟲Tspst基因的轉錄和表達水平。體外培養(yǎng)觀察Tspst基因沉默對幼蟲存活的影響。將dsRNA浸泡后的幼蟲經(jīng)口接種小鼠,觀察Tspst基因沉默對幼蟲發(fā)育、存活及雌成蟲生殖力的影響。結果Realtime PCR和Western blot檢測顯示,旋毛蟲幼蟲經(jīng)40ng/μl dsRNA浸泡處理后Tspst基因的轉錄和表達分別下降71.87%和61.9%(P0.05)。dsRNA浸泡處理組、Lip2000和PBS對照組幼蟲的死亡率分別是33.4%、35%和35.4%(χ2=0.118,P0.05)。將dsRNA浸泡的幼蟲接種小鼠后6d,腸道成蟲與35d肌幼蟲的減蟲率分別為26.51%和38.34%。dsRNA浸泡處理組、Lip2000和PBS對照組幼蟲感染小鼠收集的雌蟲體外培養(yǎng)72h新生幼蟲產量分別是53.26±3.99、50.80±3.08和53.70±2.57條(P0.05)。結論 dsRNA可明顯抑制Tspst基因的表達及幼蟲在小鼠體內的發(fā)育和存活。
【作者單位】： 鄭州大學醫(yī)學院寄生蟲學教研室;
【關鍵詞】： 旋毛蟲 蛋白酶體β亞基 RNA干擾 dsRNA
【基金】：國家自然科學基金項目(No.81271860,81471981) 高校博士點專項科研基金項目(No.20124101110005)
【分類號】：R383.15
【正文快照】： ***significantly inhibited the expression of Tspst in T.spiralis and it inhibited larval development and survival in mice.RNA干擾(RNA interference,RNAi)最早在秀麗隱桿線蟲中被發(fā)現(xiàn)和證實[1]。RNAi是真核生物體內一種由雙鏈RNA(Double-stranded RNA,dsRNA)介導的

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本文編號：453535