本文關(guān)鍵詞：HIF-1α對BMP2誘導(dǎo)干細胞成軟骨、成骨分化的影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討了低氧通路中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子低氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia inducible factor-1α，，HIF-1α）對骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（bonemorphogenetic protein2，BMP2）誘導(dǎo)干細胞成軟骨分化以及成骨分化的影響，闡明HIF-1α在干細胞軟骨、成骨分化中的作用。 方法：構(gòu)建及擴增相應(yīng)腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP，感染目的干細胞珠C3H10T1/2；RT-PCR驗證目的基因的表達；Westernblot檢測了成軟骨分化、成骨分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子Sox9、Runx2的表達；Real-time PCR法檢測成軟骨、成骨分化標志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP的mRNA表達；Alcian blue、ALP（alkalinephosphatase，ALP）及Alizarin red S染色分別檢測軟骨細胞外基質(zhì)、堿性磷酶活性及骨基質(zhì)鈣鹽沉積情況；并且在體外實驗了解HIF-1α對BMP2誘導(dǎo)胎鼠肢芽骨骼發(fā)育過程中的影響；且進行干細胞裸鼠皮下移植，觀察不同處理組所形成骨塊的組織結(jié)構(gòu)情況。 結(jié)果：HIF-1α明顯增加了BMP2誘導(dǎo)的Sox9以及下游COL2A1、aggrecan等成軟骨分化相關(guān)基因的表達，抑制了BMP2誘導(dǎo)的Runx2及其下游基因COL1A1、ALP等成骨分化相關(guān)基因的表達；Alcian blue染色結(jié)果顯示HIF-1α促進了軟骨細胞外基質(zhì)的分泌，ALP染色及茜素紅染色提示HIF-1α抑制了ALP的活性及骨基質(zhì)鈣鹽沉積；同時抑制了BMP2誘導(dǎo)的胎鼠肢芽內(nèi)軟骨增生區(qū)向肥大區(qū)的轉(zhuǎn)化，進而抑制了肢芽骨骼中軟骨內(nèi)骨化過程；體內(nèi)試驗中，HIF-1α明顯增強了BMP2誘導(dǎo)干細胞軟骨分化及軟骨結(jié)構(gòu)的形成，抑制了干細胞成骨分化及軟骨內(nèi)骨化。 結(jié)論：HIF-1α明顯增強了BMP2誘導(dǎo)的干細胞成軟骨分化，抑制了成骨分化及軟骨內(nèi)骨化過程，維持了軟骨表型。
【關(guān)鍵詞】：低氧誘導(dǎo)因子-1α 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2 干細胞 軟骨分化 成骨分化
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 1.材料與方法15-30
• 1.1 材料15-18
• 1.2 方法18-30
• 2.結(jié)果30-48
• 2.1 HEK-293 細胞中成功擴增相關(guān)腺病毒30-32
• 2.2 腺病毒成功感染 C3H10T1/2 且目的基因獲得高表達32-33
• 2.3 HIF-1α明顯增強 BMP2 誘導(dǎo)的干細胞成軟骨分化33-37
• 2.4 HIF-1α明顯抑制 BMP2 誘導(dǎo)的干細胞成骨分化37-43
• 2.5 HIF-1α明顯抑制 BMP2 誘導(dǎo)肢芽內(nèi)骨骼的軟骨內(nèi)骨化43-45
• 2.6 HIF-1α抑制體內(nèi) BMP2 誘導(dǎo)的軟骨內(nèi)骨化并維持了軟骨表型45-48
• 3.討論48-51
• 全文總結(jié)51-53
• 參考文獻53-56
• 文獻綜述56-68
• 參考文獻62-68
• 致謝68-69
• 攻讀碩士學(xué)位期間學(xué)術(shù)成果69-70

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本文編號：452548