本文關鍵詞：結核分枝桿菌Rv0757基因的原核表達及其編碼蛋白對巨噬細胞功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構建結核桿菌Rv0757基因原核表達重組質粒pET28a-Rv0757,并研究表達的目標蛋白對小鼠骨髓巨噬細胞株ANA-1細胞的作用。方法將擴增出的Rv0757基因重組到原核表達質粒pET28a(+),并通過SDS-PAGE和Western blot鑒定誘導表達的目的蛋白。純化目標蛋白后將目標蛋白PhoP作用于小鼠ANA-1細胞,檢測活細胞數(shù)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)、一氧化氮(NO)和細胞凋亡指標。結果成功構建出pET28a-Rv0757原核表達質粒,誘導表達的目標蛋白經(jīng)SDS-PAGE和Western blot鑒定分析,其相對分子質量約為32×103。目的蛋白作用于小鼠ANA-1細胞后對活細胞數(shù)和細胞上清LDH活力無明顯影響,但可以明顯抑制細胞釋放NO和細胞凋亡。結論本研究成功構建了原核表達載體pET28a-Rv0757,并成功表達出目標蛋白,該蛋白對小鼠ANA-1細胞沒有毒性損傷,但可以抑制細胞釋放NO和細胞的凋亡。
【作者單位】： 四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院感染免疫研究室;
【關鍵詞】： 結核分枝桿菌 Rv基因 PhoP蛋白 巨噬細胞功能
【基金】：國家重大傳染病科技專項(No.2012X10003008-004) 博士點基金(No.20110981110046)資助
【分類號】：R378.911
【正文快照】： 結核桿菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)是結核病的病原菌,由結核桿菌引起的結核病是一種以呼吸道為主要傳播途徑,嚴重危害人類健康的傳染病。WHO估計,2011年有870萬新發(fā)結核病病例,因結核病而死亡的有140萬人[1]。結核病的發(fā)病率、病死率因為近年耐藥、多重耐藥結核菌株的

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本文編號：442616