本文關(guān)鍵詞：CUL4B E3泛素連接酶調(diào)控HBV復(fù)制的分子機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)屬于嗜肝DNA病毒科,感染肝細(xì)胞后可以引起急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎。雖然乙肝疫苗的應(yīng)用使HBV感染率有所下降,但目前全世界仍有20億人感染HBV,其中約3.5億人是HBV慢性感染者,仍然是肝細(xì)胞肝癌(HCC)發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素之一,嚴(yán)重危害人類的健康。因此,研究HBV復(fù)制的調(diào)控機(jī)制,發(fā)現(xiàn)能夠清除HBV感染、阻斷HBV相關(guān)疾病發(fā)展的潛在靶點(diǎn),將為臨床診治提供新的契機(jī)。 泛素蛋白酶體途徑可通過介導(dǎo)蛋白質(zhì)的泛素化修飾,促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)的降解,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的眾多生物學(xué)功能,在維持細(xì)胞和機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定過程中發(fā)揮重要作用。在真核細(xì)胞中,泛素活化酶E1、泛素結(jié)合酶E2和泛素連接酶E3共同催化泛素分子的轉(zhuǎn)移反應(yīng),促進(jìn)蛋白質(zhì)的泛素化降解。其中,E3泛素連接酶通過特異性地識(shí)別底物蛋白,介導(dǎo)泛素高特異性的連接到不同的蛋白質(zhì)上,在此途徑中扮演著重要的角色。近年來,有研究證明泛素蛋白酶體途徑參與調(diào)控HBV的復(fù)制周期。使用蛋白酶體抑制劑硼替佐米(bortezomib)注射HBV轉(zhuǎn)基因小鼠能夠顯著降低HBV DNA的含量,同時(shí),干擾素抑制HBV的復(fù)制依賴于蛋白酶體的活性。但也有研究發(fā)現(xiàn),在HBV轉(zhuǎn)基因小鼠以及注射了HBV全基因表達(dá)質(zhì)粒的C57BL/6小鼠中發(fā)現(xiàn)使用蛋白酶體抑制劑MLN-273卻能促進(jìn)HBV的復(fù)制。因此蛋白酶體途徑與HBV復(fù)制之間的關(guān)系還不是很清楚。 CUL4B是近年在X連鎖精神發(fā)育遲滯疾病中克隆、發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新致病基因,其突變可以引起患者智力低下、失語、巨大舌、身材矮小等。CUL4B屬于Cullin-RING基因家族的一員。人體內(nèi)已經(jīng)鑒定存在8個(gè)Cullin家族基因,分別為CUL1、CUL2、CUL3. CUL4A. CUL4B、CUL5、CUL7和PARC,每一個(gè)cullin蛋白都能組裝成獨(dú)特的E3泛素連接酶復(fù)合物,參與調(diào)控細(xì)胞周期、細(xì)胞的增生與分化、DNA復(fù)制與修復(fù)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒感染等各種細(xì)胞生命過程,對(duì)維持細(xì)胞的正常生理功能具體非常重要的作用。 關(guān)于CUL4B E3泛素連接酶是否參與調(diào)節(jié)HBV復(fù)制,目前尚無報(bào)道。因此,本課題對(duì)于CUL4B E3泛素連接酶在HBV感染中的作用及其分子機(jī)制進(jìn)行了初步的探討。 研究目的： 1.研究CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的影響。 2.探討CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制的分子機(jī)制,為抗病毒治療方案提供科學(xué)依據(jù)。 研究方法 1. CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的調(diào)控作用 1.1臨床標(biāo)本和HBV轉(zhuǎn)基因鼠分析CUL4B與HBV復(fù)制的相關(guān)性1.1.1臨床肝組織標(biāo)本中分析CUL4B與HV復(fù)制的相關(guān)性 收集43例HBV陽性的肝組織標(biāo)本,提取肝組織RNA, real-time PCR檢測(cè)CUL4B mRNA、HBVpgRNA的水平；提取肝組織基因組DNA, real-time PCR檢測(cè)HBVcccDNA;統(tǒng)計(jì)學(xué)分析CUL4B表達(dá)水平與HBV復(fù)制指標(biāo)之間的相關(guān)性。 1.1.2HBV轉(zhuǎn)基因小鼠中分析CUL4B與HBV的復(fù)制的相關(guān)性 6-8周齡雄性、BalB/C系HBV Tg鼠,提取肝臟組織的RNA,利用real-timePCR檢測(cè)CUL4B mRNA、HBV pgRNA的水平,提取肝組織基因組DNA,real-time PCR檢測(cè)HBVcccDNA;分離小鼠血清,real-time PCR檢測(cè)血清中HBVDNA水平；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析CUL4B表達(dá)水平與HBV復(fù)制相應(yīng)指標(biāo)之間的相關(guān)性。 1.2CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制的體內(nèi)研究 1.2.1利用CUL4B轉(zhuǎn)基因鼠研究CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的影響 6-8周齡雄性CUL4B轉(zhuǎn)基因鼠(CD1系,EGFP-CUL4B Tg)及相應(yīng)野生型小鼠,尾靜脈高壓注射HBV全基因組表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-HBV1.1, ELISA方法檢測(cè)外周血HBsAg、HBeAg水平,real-timePCR方法檢測(cè)兩組小鼠肝組織CUL4B mRNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析CUL4B與HBV復(fù)制指標(biāo)之間的相關(guān)性。 1.2.2利用Mxl-Cre CUL4BFlox/Y條件敲除鼠研究CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的影響 6-8周齡雄性條件性CUL4B基因敲除鼠(C57BL/6系,Mxl-Cre CUL4BFlox/Y)及其相應(yīng)野生型小鼠,PIPC處理5天后,尾靜脈高壓注射HBV全基因組表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-HBV1.1, ELISA方法檢測(cè)外周血HBsAg, HBeAg水平,real-time PCR方法檢測(cè)兩組小鼠肝組織CUL4B mRNA. HBV cccDNA. HBV pgRNA水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析CUL4B與HBV復(fù)制相應(yīng)指標(biāo)之間的相關(guān)性。 1.3CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制的體外研究 HepG2.2.15細(xì)胞轉(zhuǎn)染CUL4B-mi表達(dá)質(zhì)�；蜿幮詫�(duì)照Neg-mi表達(dá)質(zhì)粒,BEL7402細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、Hela細(xì)胞中分別共轉(zhuǎn)HBV全基因組表達(dá)質(zhì)粒和CUL4B-miRNA或陰性對(duì)照Neg-miRNA質(zhì)粒,或在HepG2細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染CUL4B過表達(dá)質(zhì)粒和HBV全基因組表達(dá)質(zhì)粒。利用Western blot、Real-time PCR方法檢測(cè)CUL4B的干擾或過表達(dá)效果以及HBVcccDNA, HBV pgRNA水平,ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞上清HBsAg、HBeAg水平,分析CUL4B過表達(dá)或沉默對(duì)HBV復(fù)制水平的影響。 2.HBx在CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制中的作用 將CUL4B過表達(dá)質(zhì)�；�?qū)φ召|(zhì)粒分別與pcDNA3-HBV1.1(HBx蛋白野生型組)或pcDNA3-HBV1.1(△HBx)(HBx蛋白表達(dá)缺失組)或pcDNA3-HBV1.1(△HBx)+pcDNA3-HBx-HA (HBx拯救組)共轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞中。ELISA檢測(cè)HBsAg、HBeAg的分泌,real-time PCR檢測(cè)CUL4B mRNA、HBV pgRNA、 HBVcccDNA水平,分析HBx在CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制中的作用。 3.HBx蛋白參與CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制的的機(jī)制研究 3.1HBx蛋白與CUL4B復(fù)合體的結(jié)合作用 將HBx過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染24h后用免疫共沉淀裂解液處理細(xì)胞,收獲蛋白收獲蛋白利用HA抗體或CUL4B抗體進(jìn)行免疫共沉淀,Westernblot檢測(cè)CUL4B、DDB1、Rocl和HBx-HA的表達(dá)情況,驗(yàn)證HBx與CUL4B復(fù)合體的相互結(jié)合作用。 3.2CUL4B復(fù)合體對(duì)HBx蛋白表達(dá)的影響 將HBx表達(dá)質(zhì)粒與CUL4B過表達(dá)質(zhì)�；駽UL4B-miRNA或相關(guān)對(duì)照質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞,通過RT-PCR和western blot驗(yàn)證CUL4B對(duì)HBx表達(dá)的影響；將CUL4B拯救質(zhì)粒與HBx表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染CUL4B低表達(dá)的HEK293細(xì)胞、Hela細(xì)胞,Western blot檢測(cè)HBx蛋白的表達(dá)變化,進(jìn)一步驗(yàn)證CUL4B對(duì)HBx表達(dá)的影響。此外,將HBx表達(dá)質(zhì)粒與DDB1siRNA或ROC1siRNA共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,Western blot檢測(cè)HBx蛋白的表達(dá)情況,驗(yàn)證DDB1、ROC1對(duì)HBx表達(dá)的影響。 3.3CUL4B對(duì)HBx蛋白半衰期的影響 將HBx表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CUL4B低表達(dá)或?qū)φ誋EK293細(xì)胞,經(jīng)蛋白合成抑制劑放線菌酮(CHX)處理后,收集不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞蛋白,western blot檢測(cè)HBx蛋白的表達(dá)變化,觀察CUL4B對(duì)HBx蛋白半衰期的影響。 3.4CUL4B對(duì)HBx蛋白降解的調(diào)控作用 將CUL4B siRNA或陰性對(duì)照NC siRNA與HBx表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞,并用蛋白酶體抑制劑MG132處理細(xì)胞,Western blot檢測(cè)HBx蛋白的表達(dá)變化,明確CUL4B對(duì)HBx蛋白降解的調(diào)控作用。 3.5CUL4B對(duì)HBx蛋白泛素化修飾的影響 將HBx過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CUL4B低表達(dá)或?qū)φ誋EK293細(xì)胞,蛋白酶體抑制劑MG132處理細(xì)胞后,利用HA抗體進(jìn)行免疫共沉淀,western blot檢測(cè)泛素分子的表達(dá),觀察CUL4B對(duì)HBx蛋白泛素化修飾的影響。 研究結(jié)果 1.CUL4B正向調(diào)控HBV的復(fù)制 1.1臨床標(biāo)本和HBV轉(zhuǎn)基因鼠中CUL4B表達(dá)與HBV復(fù)制呈現(xiàn)正相關(guān)性 1.1.1臨床肝組織標(biāo)本中CUL4B表達(dá)與HBV復(fù)制水平呈正相關(guān) Real-time PCR檢測(cè)HBV陽性肝組織中CUL4B、HBV pgRNA和HBVcccDNA表達(dá),統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,CUL4B mRNA水平與HBV陽性患者肝組織中HBV pgRNA和HBV cccDNA水平均呈現(xiàn)正相關(guān)性。 1.1.2HBV轉(zhuǎn)基因鼠中CUL4B表達(dá)與HBV復(fù)制水平呈現(xiàn)正相關(guān)性 Real-time PCR檢測(cè)HBV轉(zhuǎn)基因鼠肝組織中CUL4B、HBV pgRNA和HBVcccDNA表達(dá)及血清中HBV DNA水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,CUL4B mRNA水平與HBV轉(zhuǎn)基因鼠肝組織中HBV pgRNA、HBV cccDNA水平及血清中HBVDNA水平均呈現(xiàn)正相關(guān)性。 1.2體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)CUL4B可促進(jìn)HBV復(fù)制 1.2.1CUL4B轉(zhuǎn)基因鼠可上調(diào)HBV復(fù)制水平 CUL4B轉(zhuǎn)基因鼠和野生型對(duì)照小鼠經(jīng)尾靜脈高壓注射HBV表達(dá)質(zhì)粒后,Real-time PCR結(jié)果顯示：CUL4B轉(zhuǎn)基因鼠肝臟組織中CUL4B mRNA顯著高于野生型對(duì)照組小鼠,同時(shí)肝組織中pgRNA、cccDNA表達(dá)水平亦顯著升高；ELISA結(jié)果顯示：CUL4B轉(zhuǎn)基因小鼠血清中HBsAg、HBeAg水平明顯高于野生型小鼠,提示CUL4B高表達(dá)可正向調(diào)節(jié)HBV復(fù)制。 1.2.2Mxl-Cre CUL4BFlox/Y基因敲除鼠可抑制HBV復(fù)制 Mxl-Cre CUL4BFlox/Y小鼠與野生型對(duì)照小鼠經(jīng)PIPC處理后,尾靜脈高壓注射HBV表達(dá)質(zhì)粒,Real-time PCR結(jié)果顯示：Mxl-Cre CUL4BFlox/Y小鼠肝臟組織中CUL4B mRNA明顯低于對(duì)照組,同時(shí)pgRNA、cccDNA水平顯著降低；ELISA結(jié)果顯示：Mxl-Cre CUL4BFlox/Y小鼠血清中HBsAg、HBeAg水平顯著低于野生型小鼠,進(jìn)一步提示CUL4B可在體內(nèi)促進(jìn)HBV復(fù)制。 1.3體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的正向調(diào)節(jié)作用 肝癌細(xì)胞系過表達(dá)CUL4B表達(dá)、轉(zhuǎn)染HBV基因表達(dá)質(zhì)粒后,CUL4B過表達(dá)可上調(diào)細(xì)胞中pgRNA、cccDNA水平及上清中HBsAg、HBeAg水平；與之相反,干擾肝癌細(xì)胞中CUL4B表達(dá),可下調(diào)細(xì)胞中pgRNA、cccDNA水平及上清中HBeAg水平,進(jìn)一步驗(yàn)證了CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的促進(jìn)作用。 2.HBx蛋白參與CUL4B對(duì)HBV復(fù)制的調(diào)節(jié)作用 HepG2細(xì)胞分別共轉(zhuǎn)染CUL4B表達(dá)質(zhì)粒與HBV全基因表達(dá)質(zhì)粒、HBx缺失型HBV質(zhì)粒HBV(△HBx)或經(jīng)HBx質(zhì)粒拯救的HBx缺失型HBV質(zhì)粒后,與HBV全基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組相比,HBx缺失型HBV質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞中pgRNA、 cccDNA水平和HBsAg、HBeAg分泌水平顯著降低,而HBx表達(dá)質(zhì)粒可恢復(fù)HBx缺失型HBV質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞的復(fù)制水平,進(jìn)一步證實(shí)HBx在HBV復(fù)制中的重要作用。CUL4B過表達(dá)可顯著上調(diào)HBV全基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞中pgRNA、cccDNA水平和HBsAg、HBeAg分泌水平,而對(duì)HBV(△HBx)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中病毒復(fù)制的影響有所減弱,HBx過表達(dá)可恢復(fù)CUL4B對(duì)HBV(△HBx)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中病毒復(fù)制的促進(jìn)作用。 3.CUL4B調(diào)控HBx蛋白泛素化降解過程 3.1HBx可與CUL4B復(fù)合體相結(jié)合 HEK293細(xì)胞過表達(dá)HBx,轉(zhuǎn)染24h后用免疫共沉淀裂解液裂解細(xì)胞,收獲蛋白進(jìn)行免疫共沉淀試驗(yàn),Western blot結(jié)果顯示,HBx可以與CUL4B、DDB1、ROC1相互結(jié)合。 3.2CUL4B復(fù)合體上調(diào)HBx蛋白的表達(dá) 肝癌細(xì)胞、HEK293細(xì)胞和Hela細(xì)胞中,過表達(dá)或干擾CUL4B觀察HBxmRNA和蛋白的表達(dá)變化。RT-PCR結(jié)果顯示：過表達(dá)或干擾CUL4B對(duì)HBxmRNA水平無明顯影響；western blot結(jié)果顯示：過表達(dá)CUL4B能夠上調(diào)HBx蛋白的表達(dá),相反地,干擾CUL4B能夠抑制HBx蛋白的表達(dá),且CUL4B拯救質(zhì)粒能夠劑量依賴性地恢復(fù)CUL4B低表達(dá)細(xì)胞中HBx蛋白的表達(dá)。以上結(jié)果提示,CUL4B能夠上調(diào)HBx蛋白的表達(dá)。HEK293細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染DDB1siRNA、 ROC1siRNA, Western blot結(jié)果顯示：干擾DDB1或ROC1的表達(dá)均可以抑制HBx蛋白的表達(dá),以上結(jié)果提示：CUL4B復(fù)合體可上調(diào)HBx蛋白的表達(dá)。 3.3CUL4B可延長(zhǎng)HBx蛋白的半衰期 為進(jìn)一步研究CUL4B影響HBx蛋白表達(dá)的分子機(jī)制,課題檢測(cè)了CUL4B對(duì)HBx蛋白半衰期的影響。經(jīng)蛋白合成抑制劑放線菌酮(CHX)處理后不同時(shí)間點(diǎn), CUL4B低表達(dá)的穩(wěn)篩細(xì)胞系HEK293中HBx蛋白的表達(dá)顯著低于對(duì)照組細(xì)胞。且CUL4B低表達(dá)細(xì)胞中HBx蛋白的降解速率顯著高于對(duì)照組細(xì)胞。提示：CUL4B通過延長(zhǎng)HBx半衰期進(jìn)而上調(diào)HBx蛋白的表達(dá)。 3.4CUL4B抑制HBx蛋白的蛋白酶體降解途徑 已有研究證實(shí),HBx蛋白主要通過泛素-蛋白酶體途徑降解。為研究蛋白酶體降解途徑在CUL4B調(diào)控HBx蛋白表達(dá)中的作用,課題利用蛋白酶體抑制劑MG132處理細(xì)胞,western blot結(jié)果顯示：干擾CUL4B表達(dá)可顯著降低HBx的表達(dá),而MG132可逆轉(zhuǎn)CUL4B低表達(dá)對(duì)HBx蛋白表達(dá)的抑制作用。提示CUL4B可能通過影響泛素-蛋白酶體途徑調(diào)控HBx蛋白的表達(dá)。 3.5CUL4B抑制HBx蛋白泛素化修飾 為進(jìn)一步研究泛素-蛋白酶體降解途徑在CUL4B調(diào)控HBx蛋白表達(dá)中的作用,課題檢測(cè)了CUL4B對(duì)HBx泛素化修飾的影響。利用HA抗體進(jìn)行免疫共沉淀,western blot檢測(cè)泛素水平,結(jié)果顯示CUL4B低表達(dá)細(xì)胞中HBx-HA的泛素化水平顯著高于對(duì)照組細(xì)胞,提示CUL4B可通過抑制HBx蛋白的泛素化修飾,進(jìn)而阻斷HBx蛋白的蛋白酶體降解途徑。 研究結(jié)論與研究意義 1.首次發(fā)現(xiàn)CUL4B E3泛素連接酶可促進(jìn)HBV復(fù)制,為闡明CUL4B在人類疾病,尤其是病毒感染相關(guān)疾病中的作用提供了重要依據(jù)。 2.證實(shí)HBx蛋白在CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制中發(fā)揮重要作用,揭示了HBx蛋白參與HBV復(fù)制的新分子機(jī)制。 3.首次證實(shí)CUL4B復(fù)合體可與HBx蛋白結(jié)合,進(jìn)而抑制HBx蛋白的泛素-蛋白酶體降解過程,上調(diào)HBx蛋白的表達(dá),為闡釋泛素-蛋白酶體途徑調(diào)控HBV復(fù)制的分子機(jī)制提供了新的證據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：CUL4B HBV HBx 泛素化
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• CATALOGUE5-6
• 中文摘要6-13
• ABSTRACT13-22
• 符號(hào)說明22-24
• 第一部分 CUL4B E3泛素連接酶對(duì)HBV復(fù)制的調(diào)控作用24-50
• 第一章 前言(含文獻(xiàn)綜述)24-29
• 第二章 材料29-34
• 第三章 方法34-43
• 第四章 結(jié)果43-48
• 第六章 討論48-50
• 第二部分 HBx在CUL4B調(diào)控HBV復(fù)制中的作用50-69
• 第一章 前言(含文獻(xiàn)綜述)50-52
• 第二章 材料52-54
• 第三章 方法54-59
• 第四章 結(jié)果59-67
• 第五章 討論67-69
• References69-76
• 致謝76-77
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄和成果77-78
• 附表78

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙祥吉;秦艷杰;李霞;劉洋;丁鑒峰;;刺參26S蛋白酶體S7亞基基因的克隆與組織表達(dá)分析[J];大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào);2013年06期

2 羅陽;韓子午;田男;;miRNA與常見肝病發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展[J];浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

3 羅偉;蔣清虎;劉濟(jì)銘;胡慧雯;溫路;魏續(xù)福;劉銳;吳忠均;;HBV人工轉(zhuǎn)錄因子的制備及其靶向抑制HBV增強(qiáng)子活性研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年05期

4 倪東京;張夢(mèng)潔;楊爽;;HBV X蛋白引起肝細(xì)胞癌異常表觀遺傳學(xué)修飾[J];免疫學(xué)雜志;2014年04期

5 王利群;唐冬英;李新梅;段桂芳;吳丹;趙小英;劉選明;;擬南芥F-box基因At5g22700的功能初步分析[J];激光生物學(xué)報(bào);2014年02期

6 楊星星;邢雅玲;陳曉娟;陳忠斌;;SARS冠狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)NSP3突變體構(gòu)建及其對(duì)類泛素分子DUB活性[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年11期

7 畢曉姣;劉蘭芬;;泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)與神經(jīng)精神疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];精神醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

8 張世侖;張媛媛;尹雋;鐘江;;毛殼素顯著抑制柯薩奇病毒B3的體外復(fù)制[J];微生物與感染;2013年03期

9 王明強(qiáng);武金霞;張玉紅;韓凝;邊紅武;朱睦元;;蛋白質(zhì)相互作用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的最新進(jìn)展[J];遺傳;2013年11期

10 Jorge Quarleri;;Core promoter: A critical region where the hepatitis B virus makes decisions[J];World Journal of Gastroenterology;2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳安靜;泛素化與類泛素（SUMO）化在甲殼動(dòng)物免疫反應(yīng)中的功能[D];山東大學(xué);2013年

2 蓋志博;Trps1表達(dá)單倍不足通過上調(diào)Arkadia水平促進(jìn)腎臟纖維化[D];山東大學(xué);2013年

3 耿丹丹;EphB2對(duì)Aβ寡聚體誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性損傷和NMDAR信號(hào)通路的保護(hù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 王俊帥;核苷（酸）類似物治療乙肝病毒相關(guān)慢加急性肝功能衰竭的臨床研究[D];華中科技大學(xué);2013年

5 黃屹;乙型肝炎病毒在原代肝細(xì)胞共培養(yǎng)模型上的增強(qiáng)感染研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

6 王梓華;攜帶外源基因的復(fù)制型HBV載體的構(gòu)建[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 王曉君;miRNA-214通過靶向β-catenin通路抑制肝癌生長(zhǎng)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

8 唐芳;旋毛蟲mif基因與mcd-1基因的DNA免疫保護(hù)作用以及泛素共表達(dá)對(duì)DNA免疫的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 孔凡銘;應(yīng)用蛋白敲除技術(shù)降解ErbB家族的抗乳腺癌作用及其機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

10 趙曉威;蛋白質(zhì)翻譯后修飾及其相互作用預(yù)測(cè)方法研究[D];東北師范大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 汪勇;mTOR信號(hào)通路在雌激素調(diào)節(jié)仔豬睪丸支持細(xì)胞增殖中的作用[D];西南大學(xué);2013年

2 鄭江松;基于分子動(dòng)力學(xué)模擬的蛋白質(zhì)能量時(shí)間序列的分形特性[D];湘潭大學(xué);2012年

3 張孝廉;大豆E3泛素連接酶基因GmARI的克隆與功能驗(yàn)證[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 段朋;泛素連接酶Fbw7增強(qiáng)膽管癌細(xì)胞株QBC939對(duì)化療藥物敏感性的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

5 張冬青;肝內(nèi)乙型肝炎病毒DNA甲基化在核苷（酸）類似物停藥復(fù)發(fā)中的作用研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

6 賀麗;自噬在TOCP誘發(fā)成年母雞遲發(fā)性神經(jīng)毒性中的作用探討[D];南華大學(xué);2013年

7 楊洋;NEDD4基因單核苷酸多態(tài)性與瘢痕疙瘩的關(guān)聯(lián)性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 王偉;靶向細(xì)胞dsRNA的重組蛋白dsCARE介導(dǎo)的抗病毒作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 陳瓊;仔豬早期斷奶應(yīng)激誘導(dǎo)自噬發(fā)生規(guī)律的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

10 唐波;蛋白質(zhì)SUMO化修飾的原核表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：CUL4B E3泛素連接酶調(diào)控HBV復(fù)制的分子機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：439769