本文關(guān)鍵詞：無血清懸浮分離培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)、鑒定脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:目前臨床上尚未發(fā)現(xiàn)完全治愈脊髓損傷,使其達(dá)到結(jié)構(gòu)及功能恢復(fù)的治療方法。已有的神經(jīng)營養(yǎng)因子治療方法促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生的效果有限,而干細(xì)胞移植治療可能是現(xiàn)階段修復(fù)脊髓損傷的有效方法之一。目的:無血清懸浮分離培養(yǎng)法培養(yǎng)胎鼠脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞,采用形態(tài)學(xué)、免疫熒光技術(shù)和多向分化能力進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞鑒定。方法:應(yīng)用懸浮分離培養(yǎng)法,培養(yǎng)純化孕13.5 d C57BL/6胎鼠的脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;CCK-8法檢測細(xì)胞的增殖能力。免疫熒光技術(shù)檢測Nestin和Sox2表達(dá);使用自然分化法驗(yàn)證第4代脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞多向分化特性,明確其分化能力。結(jié)果與結(jié)論:采用無血清懸浮分離培養(yǎng)法可以順利獲取脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞。培養(yǎng)的脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖活性良好,高表達(dá)Nestin和Sox2,且兩種標(biāo)記物與DAPI核染高度均勻吻合,說明細(xì)胞純度高。進(jìn)一步誘導(dǎo)分化顯示,細(xì)胞可以向GFAP和Tuj1陽性細(xì)胞分化,證明脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞分化潛能較好。該實(shí)驗(yàn)可建立一套體外培養(yǎng)脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)、純化及鑒定體系,為后續(xù)神經(jīng)干細(xì)胞的應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院脊柱外科;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)干細(xì)胞 培養(yǎng)基 無血清 組織工程 干細(xì)胞 培養(yǎng) 脊髓源性 無血清懸浮分離培養(yǎng)法 鑒定 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31371011),項(xiàng)目名稱:組織特異性仿生微電流場構(gòu)建及其對(duì)脊髓損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的調(diào)控作用~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction脊髓損傷是一種以脊髓結(jié)構(gòu)破壞,功能細(xì)胞凋亡為主要表現(xiàn)的損傷,其病理機(jī)制主要為神經(jīng)元的損失、軸突聯(lián)系的中斷,以及漸進(jìn)性的脫髓鞘病變。目前臨床上尚未發(fā)現(xiàn)完全治愈脊髓損傷,使其達(dá)到結(jié)構(gòu)及功能恢復(fù)的治療方法。已有的神經(jīng)營養(yǎng)因子治療方法,促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再

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