本文關(guān)鍵詞：豬Lp-PLA2多克隆抗體制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：制備豬脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)多克隆抗體,有利于研究豬Lp-PLA2與炎癥發(fā)生的相關(guān)性。本試驗(yàn)利用基因克隆技術(shù)構(gòu)建豬Lp-PLA2原核表達(dá)載體,表達(dá)重組蛋白,并對(duì)表達(dá)條件進(jìn)行優(yōu)化;使用Ni-NTA樹(shù)脂親和層析純化該蛋白質(zhì),免疫家兔,制備豬Lp-PLA2多克隆抗體;并用western blot對(duì)獲得的抗體進(jìn)行免疫檢測(cè)。電泳結(jié)果顯示豬Lp-PLA2原核表達(dá)載體構(gòu)建成功;SDS-PAGE結(jié)果表明,豬Lp-PLA2在1 mol/L IPTG、37℃條件下,表達(dá)于菌體中;western blotting顯示,該抗體與豬源Lp-PLA2有良好的交叉反應(yīng)。因此,該多克隆抗體的制備為進(jìn)一步利用豬作為動(dòng)物模型研究炎癥性疾病奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 北京軍區(qū)總醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 豬 脂蛋白相關(guān)磷酯酶A 原核表達(dá) 多克隆抗體
【分類號(hào)】：R392;Q78
【正文快照】： 脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)又稱血小板活化因子乙酰水解酶,是鈣離子非依賴性的磷脂酶(Larsson等,1999)。Lp-PLA2主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生和分泌(Hakkinen等,1999)。研究表明Lp-PLA2通過(guò)短的sn-2酯鍵作用于磷脂的水溶部分,產(chǎn)生兩種炎癥介質(zhì):溶血卵

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本文編號(hào)：434225