本文關(guān)鍵詞：羥基磷灰石分離純化抗TNF-α單克隆抗體，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的用填料為羥基磷灰石的層析柱純化抗TNF-α單克隆抗體。方法經(jīng)protein A為填料的層析柱純化抗TNF-α單克隆抗體后,通過(guò)Do E實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)填料為羥基磷灰石的層析柱的洗脫流速、p H值及鹽濃度進(jìn)行優(yōu)化,確定最佳洗脫條件后,進(jìn)行抗TNF-α單克隆抗體的純化,純化產(chǎn)物經(jīng)HPLC及毛細(xì)管電泳法檢測(cè)其濃度、多聚體含量及純度。結(jié)果抗TNF-α單克隆抗體經(jīng)protein A層析純化后,回收率達(dá)96.1%,純度為96.0%,多聚體含量下降至1.9%。通過(guò)Do E優(yōu)化,篩選出最佳條件范圍為:流速1~3 ml/min,0.25~0.30 mol/L Na Cl,p H 7.0~7.3,選定1 ml/min流速、0.25 mol/L Na Cl、p H 7.0、作為洗脫條件進(jìn)行純化,回收率為93.1%,純度為97.3%,多聚體含量為0,優(yōu)于參比制劑。結(jié)論將羥基磷灰石用于抗TNF-α單克隆抗體的中度純化,獲得符合參比制劑質(zhì)量的產(chǎn)品。
【作者單位】： 廣東東陽(yáng)光藥業(yè)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 羥基磷灰石 腫瘤壞死因子-α 單克隆抗體 純化
【基金】：廣東省引進(jìn)創(chuàng)新科研團(tuán)隊(duì)計(jì)劃資助(201101Y0104990178)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是由單核巨噬細(xì)胞激活后分泌的一種細(xì)胞因子,能夠與特異受體結(jié)合,發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng),包括炎癥反應(yīng)、免疫激活、細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因激活表達(dá)、抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞等[1-4]。研究證明,TNF-α與機(jī)體炎癥反應(yīng)密切相關(guān),類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 杜春紅;唐雪;石麗媛;王鵬;楊光璨;董珊珊;宋志忠;;應(yīng)用羥基磷灰石層析分離純化鼠疫菌Pla蛋白的研究[J];疾病預(yù)防控制通報(bào);2011年05期

2 馬泓冰;孫中文;徐穎;李文香;陶然;陳潔;張學(xué)光;;兩步串聯(lián)層析法純化鼠抗人CD28單克隆抗體2F5[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年02期

3 繆小牛;陳衛(wèi);張娟;解偉;王e，

本文編號(hào)：433619