羥基磷灰石分離純化抗TNF-α單克隆抗體
發(fā)布時間:2017-06-08 20:10
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【摘要】:目的用填料為羥基磷灰石的層析柱純化抗TNF-α單克隆抗體。方法經(jīng)protein A為填料的層析柱純化抗TNF-α單克隆抗體后,通過Do E實驗設計,對填料為羥基磷灰石的層析柱的洗脫流速、p H值及鹽濃度進行優(yōu)化,確定最佳洗脫條件后,進行抗TNF-α單克隆抗體的純化,純化產(chǎn)物經(jīng)HPLC及毛細管電泳法檢測其濃度、多聚體含量及純度。結果抗TNF-α單克隆抗體經(jīng)protein A層析純化后,回收率達96.1%,純度為96.0%,多聚體含量下降至1.9%。通過Do E優(yōu)化,篩選出最佳條件范圍為:流速1~3 ml/min,0.25~0.30 mol/L Na Cl,p H 7.0~7.3,選定1 ml/min流速、0.25 mol/L Na Cl、p H 7.0、作為洗脫條件進行純化,回收率為93.1%,純度為97.3%,多聚體含量為0,優(yōu)于參比制劑。結論將羥基磷灰石用于抗TNF-α單克隆抗體的中度純化,獲得符合參比制劑質量的產(chǎn)品。
【作者單位】: 廣東東陽光藥業(yè)有限公司;
【關鍵詞】: 羥基磷灰石 腫瘤壞死因子-α 單克隆抗體 純化
【基金】:廣東省引進創(chuàng)新科研團隊計劃資助(201101Y0104990178)
【分類號】:R392
【正文快照】: 腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是由單核巨噬細胞激活后分泌的一種細胞因子,能夠與特異受體結合,發(fā)揮多種生物學效應,包括炎癥反應、免疫激活、細胞生長相關基因激活表達、抑制或殺傷腫瘤細胞等[1-4]。研究證明,TNF-α與機體炎癥反應密切相關,類風濕關節(jié)炎
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 杜春紅;唐雪;石麗媛;王鵬;楊光璨;董珊珊;宋志忠;;應用羥基磷灰石層析分離純化鼠疫菌Pla蛋白的研究[J];疾病預防控制通報;2011年05期
2 馬泓冰;孫中文;徐穎;李文香;陶然;陳潔;張學光;;兩步串聯(lián)層析法純化鼠抗人CD28單克隆抗體2F5[J];細胞與分子免疫學雜志;2007年02期
3 繆小牛;陳衛(wèi);張娟;解偉;王e,
本文編號:433619
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