本文關(guān)鍵詞：人心包外脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景成體干細(xì)胞具有自我更新和分化為多種組織的能力，是組織工程學(xué)的重要組成部分。近來研究表明來源于吸脂術(shù)的人脂肪源性干細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的特點，能體外誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞，但尚無對人心包外脂肪干細(xì)胞特點及誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞的報道。 目的探討人心包外脂肪干細(xì)胞體外培養(yǎng)及向心肌誘導(dǎo)分化的時期。材料與方法通過膠原酶消化法，由人心包外脂肪組織獲得脂肪干細(xì)胞，通過細(xì)胞免疫學(xué)方法檢測人心包外脂肪干細(xì)胞細(xì)胞表面抗原的表達(dá)，，并定量分析；利用RT-PCR、real-time PCR法定量檢測人心包外脂肪干細(xì)胞細(xì)胞多能性基因（Pluripotent mRNA）的表達(dá)；經(jīng)心肌誘導(dǎo)培養(yǎng)基5 azacytidine誘導(dǎo)后，采用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)并比較誘導(dǎo)獲得的心肌細(xì)胞數(shù)量；免疫組化法檢測誘導(dǎo)獲得的心肌細(xì)胞表達(dá)心肌特異性抗α-actin、cTnT，進(jìn)行表型鑒定。 結(jié)果人心包外脂肪干細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中貼壁生長，通過形態(tài)學(xué)特征以及脂肪干細(xì)胞特異性相關(guān)抗原檢測證實，得到高純度人心包外脂肪干細(xì)胞。其表面標(biāo)記物CD44，CD90表達(dá)陽性，并在3、4代傳代細(xì)胞中熒光強(qiáng)度達(dá)峰值。多能性基因（Oct-4、Rex1、Nanog）的表達(dá)隨細(xì)胞傳代而下降。經(jīng)心肌誘導(dǎo)培養(yǎng)基體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后，分化的細(xì)胞大多呈肌細(xì)胞樣，且在3、4代細(xì)胞數(shù)量達(dá)峰值。細(xì)胞免疫化學(xué)檢測證實心肌特異性抗α-actin、cTnT表達(dá)陽性。 結(jié)論細(xì)胞表面熒光強(qiáng)度及多能性基因（Pluripotent mRNA）表達(dá)量的變化可影響脂肪干細(xì)胞向心肌細(xì)胞的誘導(dǎo)，脂肪干細(xì)胞處于傳代早期時向心肌誘導(dǎo)的可能性大，因此可選擇早期向心肌的誘導(dǎo)，這可能為脂肪干細(xì)胞移植治療心肌梗死奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：脂肪干細(xì)胞 人心包外脂肪干細(xì)胞 誘導(dǎo) 分化 人體
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 英文縮略語5-6
• 中文摘要6-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-18
• 1 實驗材料11-13
• 2 實驗方法13-17
• 3 統(tǒng)計學(xué)方法17-18
• 結(jié)果18-20
• 1. 人心包外脂肪干細(xì)胞的形態(tài)觀察18
• 2. 細(xì)胞免疫學(xué)檢測18
• 3. 人心包外脂肪干細(xì)胞多向誘導(dǎo)基因檢測18
• 4. 誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量變化18-19
• 5. 免疫化學(xué)檢測19-20
• 討論20-22
• 結(jié)論22-23
• 本實驗的局限性和不足23-24
• 參考文獻(xiàn)24-27
• 綜述27-42
• 參考文獻(xiàn)36-42
• 附錄42-47
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況47-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

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7 付勤;于冬冬;王勇;宮樹一;;負(fù)載轉(zhuǎn)化生長因子β1的大鼠脂肪干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞分化[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2008年12期

8 張月東;張開剛;;脂肪干細(xì)胞在骨組織工程中的應(yīng)用研究[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2011年10期

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6 萬光勇;人脂肪干細(xì)胞與部分脫鈣骨支架構(gòu)建組織工程骨的試驗研究[D];山東大學(xué);2009年

7 唐少鋒;脂肪干細(xì)胞分離培養(yǎng)及修復(fù)軟骨缺損的實驗研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

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