本文關(guān)鍵詞：iNOS在梗阻性黃疸大鼠模型肝組織中的表達(dá)及中藥的干預(yù)作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 探索梗阻性黃疸時(shí)iNOS基因在大鼠肝組織中的表達(dá)變化及其意義；探討梗阻性黃疸再通術(shù)后中藥茵陳蒿湯對(duì)肝臟的保護(hù)作用及與iNOS基因表達(dá)的關(guān)系,為臨床圍手術(shù)期合理應(yīng)用中藥提供理論依據(jù)。 方法： 選擇成年SD大鼠96只體重(250-300)g,雄性,動(dòng)物級(jí)別為清潔級(jí),隨機(jī)將大鼠分組：(1)假手術(shù)對(duì)照組(S組)30只；(2)梗阻性黃疸組(O組)30只；(3)梗阻性黃疸再通模型組(OR組)18只；(4)梗阻性黃疸再通模型+中藥灌胃組(ORC組)18只。S組與O組于術(shù)后1、3、7、10、14D,每時(shí)相點(diǎn)處死大鼠6只,OR組與ORC組均于梗阻7天后解除梗阻,并于解除梗阻后1、3、7D每個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死大鼠6只,留取血清及肝組織標(biāo)本。檢測(cè)血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)含量；另取肝組織固定于5%中性福爾馬林溶液,石蠟包埋,5μm切片行HE染色觀(guān)察肝組織的病理改變,并用石蠟切片進(jìn)行iNOS免疫組織化學(xué)染色,觀(guān)察肝組織iNOS蛋白的表達(dá)情況；剩余肝組織經(jīng)液氮速凍后置于-80℃冰箱,用RT-PCR觀(guān)察大鼠肝組織iNOS mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1.血清生化指標(biāo)的變化：S組術(shù)后第1天ALT、AST輕度升高,后逐漸降低到正常值范圍,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與S組比較,O組術(shù)后ALT、AST迅速增高,ALT于術(shù)后第1天達(dá)到峰值(P0.05),AST于術(shù)后第3天達(dá)到峰值(P0.05),后逐漸下降,梗阻后第10天,ALT、AST又重新升高；OR組與ORC組解除梗阻后ALT、AST均呈下降趨勢(shì),ORC組比OR組下降更明顯(P0.05)。S組術(shù)后TBIL無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與S組比較,O組梗阻后TBIL迅速增高,并于第3天達(dá)到峰值(P0.05),后緩慢下降；OR組與ORC組解除梗阻后TBIL均顯著下降,ORC組比OR組下降更明顯(P0.05)。 2.肝組織病理學(xué)改變：S組肝細(xì)胞無(wú)腫脹、壞死,肝細(xì)胞索排列整齊。O組大鼠肝組織可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),細(xì)小膽管和無(wú)管腔的小膽管增生,纖維組織細(xì)胞增生,肝細(xì)胞出現(xiàn)變性壞死。OR組在解除梗阻后,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),肝組織內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)逐漸減少,纖維組織細(xì)胞增生明顯減輕,肝細(xì)胞變性壞死灶減少。ORC組肝細(xì)胞在解除梗阻后病理學(xué)改變優(yōu)于OR組。 3. RT-PCR法檢測(cè)iNOS mRNA的表達(dá)量：S組術(shù)后iNOS mRNA表達(dá)量保持低位水平,且差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；O組術(shù)后iNOS mRNA表達(dá)量緩慢升高,14天達(dá)到峰值,與S組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；OR組與ORC組解除梗阻后iNOS mRNA的表達(dá)量均有下降,7天時(shí)達(dá)到最低點(diǎn),ORC組與OR組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.免疫組化法檢測(cè)大鼠肝組織iNOS的合成：S組術(shù)后iNOS蛋白表達(dá)不明顯,且差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；O組術(shù)后iNOS蛋白表達(dá)量緩慢升高,14天時(shí)達(dá)到峰值,與S組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；OR組與ORC組解除梗阻后iNOS蛋白的表達(dá)量均有下降,7天時(shí)達(dá)到最低點(diǎn),ORC組與OR組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),此趨勢(shì)與iNOS mRNA表達(dá)基本一致。 結(jié)論： 1.NO在梗阻性黃疸大鼠肝損害中具有雙重作用。梗阻發(fā)生早期NO合成較少時(shí),NO可擴(kuò)張血管,改善肝臟功能。隨著梗阻的進(jìn)展,各種刺激因子引起iNOS表達(dá)增加,過(guò)量生成的NO具有細(xì)胞毒性,對(duì)梗阻性黃疸大鼠肝臟起損害作用。 2.梗阻性黃疸大鼠模型解除梗阻后給予中藥茵陳蒿湯可以抑制iNOS mRNA的表達(dá),減輕因NO過(guò)量合成導(dǎo)致的肝損傷,改善肝臟因梗阻引起的肝功能異常。臨床治療梗阻性黃疸患者術(shù)后因梗阻引起的肝功能異常時(shí)可以辯證使用該方劑,促進(jìn)術(shù)后肝臟功能恢復(fù),降低并發(fā)癥發(fā)生率。 3.選擇合理的手術(shù)方式,結(jié)合圍手術(shù)期清熱利濕中藥的輔助治療,可能為臨床帶來(lái)較好的治療效果。中西醫(yī)結(jié)合治療方案有望成為目前治療的一種新的補(bǔ)充。
【關(guān)鍵詞】：梗阻性黃疸 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶 總膽紅素 茵陳蒿湯
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R575.7;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明11-12
• 前言12-14
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-14
• 一、膽道梗阻后大鼠肝臟的iNOS表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究14-30
• 1.1 對(duì)象和方法14-21
• 1.2 結(jié)果21-25
• 1.3 討論25-28
• 1.4 小結(jié)28
• 1.5 第一部分參考文獻(xiàn)28-30
• 二、茵陳蒿湯對(duì)膽道梗阻再通術(shù)后大鼠肝臟iNOS表達(dá)及肝功能影響的研究30-42
• 2.1 對(duì)象和方法30-31
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組30
• 2.1.2 動(dòng)物造模30
• 2.1.3 中藥方劑30
• 2.1.4 標(biāo)本采集30-31
• 2.1.5 觀(guān)察指標(biāo)及方法31
• 2.2 結(jié)果31-34
• 2.2.1 大鼠一般狀態(tài)的觀(guān)察31
• 2.2.2 大鼠血清ALT、AST的含量31-32
• 2.2.3 大鼠血清TBIL的含量32-33
• 2.2.4 光鏡觀(guān)察肝組織的病理改變33
• 2.2.5 肝組織iNOS mRNA的表達(dá)結(jié)果33
• 2.2.6 免疫組化檢測(cè)肝組織iNOS蛋白的表達(dá)定量結(jié)果33-34
• 2.3 討論34-39
• 2.4 小結(jié)39-40
• 2.5 第二部分參考文獻(xiàn)40-42
• 結(jié)論42-43
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明43-44
• 附錄44-51
• 綜述51-62
• 綜述參考文獻(xiàn)57-62
• 致謝62

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：iNOS在梗阻性黃疸大鼠模型肝組織中的表達(dá)及中藥的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：432118