本文關(guān)鍵詞：let-7f對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:micro RNA let-7f和炎性因子白細(xì)胞介素6對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的具體作用及兩者之間是否存在聯(lián)系尚不可知。目的:分析let-7f及白細(xì)胞介素6表達(dá)水平對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響及兩者的關(guān)系。方法:1構(gòu)建let-7f過表達(dá)及抑制慢病毒載體,分別轉(zhuǎn)染SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分為4個組:轉(zhuǎn)染上調(diào)組(轉(zhuǎn)染LV-rno-let-7f-up)、轉(zhuǎn)染下調(diào)組(轉(zhuǎn)染LV-rno-let-7f-down)、陰性轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染空病毒)、未轉(zhuǎn)染組(不進(jìn)行病毒轉(zhuǎn)染)。q RT-PCR檢測各組細(xì)胞let-7f表達(dá)水平。MTT法、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA等方法檢測不同let-7f表達(dá)水平下細(xì)胞增殖情況及白細(xì)胞介素6表達(dá)水平,q RT-PCR及Western blot檢測各組Cyclin D1 m RNA和蛋白表達(dá)水平。2預(yù)測let-7f潛在的靶基因,構(gòu)建野生型/突變型白細(xì)胞介素6 3’UTR報告基因載體,分別與let-7f/let-7f inhibitor共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞系,測定熒光素酶活性。結(jié)果與結(jié)論:let-7f轉(zhuǎn)染上調(diào)組較未轉(zhuǎn)染組及陰性轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖能力及克隆能力明顯增強(qiáng),G1期細(xì)胞數(shù)明顯減少,S期明顯增多,凋亡減少(P0.05);轉(zhuǎn)染下調(diào)組結(jié)果與其相反。let-7f轉(zhuǎn)染上調(diào)組細(xì)胞培養(yǎng)液中的白細(xì)胞介素6表達(dá)水平低于未轉(zhuǎn)染組及陰性轉(zhuǎn)染組(P0.05);轉(zhuǎn)染下調(diào)組細(xì)胞培養(yǎng)液中的白細(xì)胞介素6則明顯升高(P0.05);Western blot、定量PCR顯示let-7f轉(zhuǎn)染上調(diào)組Cyclin D1蛋白及m RNA表達(dá)上調(diào)(P0.05);轉(zhuǎn)染下調(diào)組表達(dá)均下調(diào)(P0.05);未轉(zhuǎn)染組與陰性轉(zhuǎn)染組所有結(jié)果無明顯差異(P0.05)。野生型白細(xì)胞介素6 3’UTR報告基因載體與let-7f共轉(zhuǎn)染細(xì)胞的熒光素酶活性顯著減低(P0.05)。結(jié)果表明上調(diào)let-7f表達(dá)水平可顯著促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖活性及克隆形成能力,減少凋亡,而下調(diào)let-7f表達(dá)水平則出現(xiàn)抑制作用。白細(xì)胞介素6過表達(dá)可抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,考慮白細(xì)胞介素6是let-7f的靶基因,let-7f可能通過抑制白細(xì)胞介素6表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞增殖。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 白細(xì)胞介素 細(xì)胞增殖 組織工程 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 let-f 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 慢病毒 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目:骨髓間質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)命運(yùn)決定中的自噬現(xiàn)象及其mTOR信號通路的作用(81071114);Lin28/Let-7調(diào)控的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療阿爾茨海默病的實(shí)驗(yàn)研究(81371385)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)是干細(xì)胞家族的重要成員,具有多向分化潛能,在特定的誘導(dǎo)條件下可在體內(nèi)或體外分化為骨、軟骨、韌帶、肌腱、肌肉、脂肪、肝、心肌、內(nèi)皮、神經(jīng)等多種組織細(xì)胞[1-6]。由于具有取材廣泛、易于分離

  本文關(guān)鍵詞：let-7f對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：431837