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人細支氣管上皮細胞的ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴增及氣液相模型的建立

發(fā)布時間:2017-06-06 21:04

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【摘要】:背景:人類原代肺臟上皮細胞在體外難以分離培養(yǎng),表現(xiàn)為組織來源有限、細胞存活率低、增殖速度慢,缺乏上皮細胞表型分化能力等。目的:體外擴增人細支氣管上皮細胞,建立其氣液相分化模型,用于肺臟上皮細胞功能研究。方法:采用Pronase和DnaseⅠ聯(lián)合消化法分離人細支氣管上皮細胞。利用ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系對其進行擴增,免疫熒光染色鑒定細胞類型。建立氣液相培養(yǎng)模型,掃描電鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細胞分化類型。結(jié)果與結(jié)論:通過ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系,體外成功培養(yǎng)擴增了人細支氣管上皮細胞。擴增細胞經(jīng)免疫熒光染色鑒定絕大部分都表達基底細胞標記角質(zhì)蛋白14,提示人細支氣管的基底細胞可能是肺臟上皮干細胞的主要亞群。同時,擴增細胞在氣液相培養(yǎng)條件下分化成纖毛細胞和無纖毛柱狀細胞,表明ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴增的上皮細胞仍然保持干細胞的增殖分化能力,體外氣液相培養(yǎng)模型可以促進人細支氣管上皮細胞分化。
【作者單位】: 西部生物資源保護與利用教育部重點實驗室;寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】 細支氣管 上皮細胞 干細胞 培養(yǎng) 人細支氣管上皮細胞 肺臟 ROCK激酶抑制劑 氣液相培養(yǎng) 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31172278)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細胞分化類型,從而為肺臟上皮細胞不但是抵抗外來物入侵的第一道防線,人類肺臟干細胞的分離培養(yǎng)和功能特性研究奠定基礎(chǔ)。而且具備先天免疫調(diào)控功能,在肺臟免疫中擔(dān)負著由先天免疫到獲得性免疫的橋梁作用[1-2]。整個肺臟組

【共引文獻】

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4 T3芝Z,

本文編號:427477


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