人細支氣管上皮細胞的ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴增及氣液相模型的建立
本文關(guān)鍵詞:人細支氣管上皮細胞的ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴增及氣液相模型的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:背景:人類原代肺臟上皮細胞在體外難以分離培養(yǎng),表現(xiàn)為組織來源有限、細胞存活率低、增殖速度慢,缺乏上皮細胞表型分化能力等。目的:體外擴增人細支氣管上皮細胞,建立其氣液相分化模型,用于肺臟上皮細胞功能研究。方法:采用Pronase和DnaseⅠ聯(lián)合消化法分離人細支氣管上皮細胞。利用ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系對其進行擴增,免疫熒光染色鑒定細胞類型。建立氣液相培養(yǎng)模型,掃描電鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細胞分化類型。結(jié)果與結(jié)論:通過ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系,體外成功培養(yǎng)擴增了人細支氣管上皮細胞。擴增細胞經(jīng)免疫熒光染色鑒定絕大部分都表達基底細胞標記角質(zhì)蛋白14,提示人細支氣管的基底細胞可能是肺臟上皮干細胞的主要亞群。同時,擴增細胞在氣液相培養(yǎng)條件下分化成纖毛細胞和無纖毛柱狀細胞,表明ROCK激酶抑制劑培養(yǎng)體系擴增的上皮細胞仍然保持干細胞的增殖分化能力,體外氣液相培養(yǎng)模型可以促進人細支氣管上皮細胞分化。
【作者單位】: 西部生物資源保護與利用教育部重點實驗室;寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 肺 細支氣管 上皮細胞 干細胞 培養(yǎng) 人細支氣管上皮細胞 肺臟 ROCK激酶抑制劑 氣液相培養(yǎng) 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31172278)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction鏡、相差顯微鏡和免疫熒光染色鑒定細胞分化類型,從而為肺臟上皮細胞不但是抵抗外來物入侵的第一道防線,人類肺臟干細胞的分離培養(yǎng)和功能特性研究奠定基礎(chǔ)。而且具備先天免疫調(diào)控功能,在肺臟免疫中擔(dān)負著由先天免疫到獲得性免疫的橋梁作用[1-2]。整個肺臟組
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條
1 高元妹;徐軍;;小鼠氣管上皮細胞的氣液相界面培養(yǎng)[J];廣東醫(yī)學(xué);2008年02期
2 劉煒;劉麗星;史曉偉;張曉萌;施怡;朱陵群;;三七總皂苷對局灶性腦缺血大鼠不同恢復(fù)時點神經(jīng)重塑和突觸重建的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2015年05期
3 張少丹;李武平;;呼吸道上皮細胞模型的研究進展[J];病毒學(xué)報;2015年03期
4 郭永清,趙小冬,楊占泉;氣液界面培養(yǎng)的鼻黏膜上皮細胞的纖毛分化[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2004年02期
5 黃寧,吳琦,李勝富,唐彬,王伯瑤;利用氣液界面無血清培養(yǎng)原代兔氣管上皮細胞的研究[J];細胞生物學(xué)雜志;1999年01期
6 劉煒;劉麗星;史曉偉;張曉萌;施怡;朱陵群;;三七總皂苷對局灶性腦梗死大鼠海馬CA1區(qū)NogoA/NgR_1/RhoA信號通路蛋白表達的影響[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2014年11期
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條
1 張龍芳;小腸黏膜下層在氣管前壁缺損修復(fù)中的應(yīng)用及氣管纖毛上皮細胞培養(yǎng)的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年
2 索利敏;臍血間充質(zhì)干細胞體外分化為鼻黏膜纖毛上皮細胞的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年
3 譚樂恬;上呼吸道上皮細胞的原代培養(yǎng)及其與11型人乳頭狀瘤病毒結(jié)合的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年
4 馬春燕;miRNA-124在肺泡上皮細胞和巨噬細胞抗結(jié)核分枝桿菌感染中的免疫調(diào)控機制研究[D];寧夏大學(xué);2014年
5 彭文標;毛囊干細胞構(gòu)建組織工程尿道的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年
6 鄧雪鋒;人類博卡病毒感染性克隆的構(gòu)建及體外感染模型的研究[D];華中師范大學(xué);2013年
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條
1 崔鳳梅,蘇世標,聶繼華,李冰燕,童建;大鼠氣管-支氣管上皮細胞的提取方法[J];毒理學(xué)雜志;2005年S1期
2 李為民,陳文彬,Steven K Juhn;細胞因子在支氣管上皮細胞一氧化氮產(chǎn)生中作用的研究[J];四川醫(yī)學(xué);2001年05期
3 田丹;王曦;陳文書;吳人亮;;GSK3在人、鼠、豬的肺組織及培養(yǎng)的豬支氣管上皮細胞中的表達[J];中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志;2005年06期
4 茹莉莉;張開泰;吳德昌;;利用cDNA微陣列-CGH篩選支氣管上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化中的擴增基因[J];生物技術(shù)通訊;2006年04期
5 張蕾,劉鴻瑞,劉彤華,程書均;EB病毒基因LMP1和EBNA2對支氣管上皮細胞的轉(zhuǎn)化[J];中華病理學(xué)雜志;1999年04期
6 張堅松;王笑梅;李翔;邢秀梅;麻小浩;;降鈣素基因相關(guān)肽和內(nèi)皮素-1對支氣管上皮細胞與嗜酸性粒細胞黏附功能的影響[J];湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報;2007年04期
7 ;[J];;年期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 賓曉農(nóng);譚敏;呂嘉春;蔣義國;陳家X;;基因芯片篩選二羥環(huán)氧苯并芘轉(zhuǎn)化支氣管上皮細胞相關(guān)基因的研究[A];中國毒理學(xué)會第四屆全國學(xué)術(shù)會議論文(摘要)集[C];2005年
2 歐維琳;;白介素-4對支氣管上皮細胞表達嗜酸性粒細胞趨化因子-3的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年
3 賓曉農(nóng);譚敏;呂嘉春;蔣義國;陳家X;;基因芯片篩選二羥環(huán)氧苯并芘轉(zhuǎn)化支氣管上皮細胞相關(guān)基因的研究[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會抗誘變劑和抗癌劑專業(yè)委員會第三次全國學(xué)術(shù)會議、中國毒理學(xué)會生化與分子毒理專業(yè)委員會第五屆學(xué)術(shù)交流會、貴州省環(huán)境誘變劑學(xué)會成立大會暨首屆學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2004年
4 T3芝Z,
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