原核表達(dá)抗伏馬菌素單鏈抗體的條件優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2017-06-06 04:03
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【摘要】:單鏈抗體可溶性大量表達(dá)是其生產(chǎn)應(yīng)用的前提條件,本研究通過基因工程操作構(gòu)建含有抗伏馬菌素單鏈抗體基因H3的重組載體p HENHi-H3,轉(zhuǎn)化大腸桿菌XL1-Blue,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測不同的誘導(dǎo)溫度、IPTG濃度和誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)H3抗體的表達(dá)影響。優(yōu)化后的單鏈抗體H3的原核表達(dá)條件為:菌液培養(yǎng)至OD600達(dá)到0.5時(shí)加入終濃度為0.1 mmol/L IPTG,30℃誘導(dǎo)表達(dá)8 h。本研究通過對(duì)蛋白原核表達(dá)的主要影響因素進(jìn)行優(yōu)化,能夠顯著提高H3抗體的原核可溶性表達(dá)效率。
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學(xué)生物與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 單鏈抗體 原核表達(dá) 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn) 條件優(yōu)化
【基金】:貴州省科技項(xiàng)目(黔科合J字[2013]2058號(hào)和黔科合LH字[2014]7092號(hào)) 貴州省高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新人才支持計(jì)劃(黔教合KY字[2014]244) 貴陽市科技計(jì)劃項(xiàng)目(筑科合同[20141001]37號(hào))共同資助
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: Optimization of the Prokaryotic Expression Conditions for a Fumonisin-specific sc Fv AntibodyWang Yun Xia Xue Huang Jiangtao Huang Shunli Wu Yi Hu Zuquan*College of Biology and Engineering,Guizhou Medical University,Guiyang,550004*Corresponding author,hu
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本文編號(hào):425310
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