Ghrelin通過JNK信號通路抑制LPS誘導(dǎo)的肺泡巨噬細(xì)胞凋亡
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【摘要】:【目的】觀察體外條件下加入外源性ghrelin對內(nèi)毒素(LPS)誘導(dǎo)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NR8383凋亡以及吞噬能力的影響,并探討JNK(c-Jun N-terminal kinase)信號通路在其中所起的作用!痉椒ā坑肅CK-8(Cell Counting Kit-8)法檢測加入LPS或者ghrelin與LPS共孵育后NR8383的細(xì)胞毒性;流式細(xì)胞技術(shù)、原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測細(xì)胞凋亡率;Western blot檢測JNK、phospho-JNK信號通路蛋白以及cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2凋亡相關(guān)分子蛋白的表達(dá);激光共聚焦技術(shù)檢測巨噬細(xì)胞的吞噬能力;使用ghrelin受體拮抗劑[D-Lys-3]-GHRP-6、JNK特異性抑制劑SP600125分別抑制ghrelin受體及JNK激酶的激活!窘Y(jié)果】CCK-8檢測結(jié)果顯示LPS可顯著抑制NR8383增殖,而ghrelin可呈濃度依賴性地阻斷這種抑制作用;流式和TUNEL檢測進(jìn)一步證實ghrelin可顯著降低LPS所致NR8383凋亡作用(P0.05),而應(yīng)用ghrelin受體拮抗劑[D-Lys-3]-GHRP-6可以減弱ghrelin的抗凋亡效果(P0.05);LPS可以激活JNK激酶活性,并改變其下游凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),其中促凋亡蛋白Bax以及cleaved caspase-3表達(dá)上調(diào),抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)下調(diào),應(yīng)用ghrelin可以逆轉(zhuǎn)LPS對JNK激酶的激活,繼而下調(diào)Bax以及cleaved caspase-3的表達(dá),上調(diào)Bcl-2的表達(dá),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);ghrelin還可以維持LPS持續(xù)刺激下NR8383的吞噬能力(P0.05)!窘Y(jié)論】ghrelin通過下調(diào)JNK信號通路的激活抑制LPS誘導(dǎo)的NR8383的凋亡,并維持其吞噬能力。
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院MICU;
【關(guān)鍵詞】: ghrelin 凋亡 內(nèi)毒素 肺泡巨噬細(xì)胞 c-Jun N-terminal kinase(JNK)
【基金】:廣東省自然科學(xué)基金(S2013010015025) 廣州市科技計劃項目(2014Y2-00136)
【分類號】:R3416
【正文快照】: ghrelin是一種含有28個氨基酸殘基的生長激素釋放肽(growth hormone releasing peptide),是生長激素促泌素受體(growth hormone scretagoguereceptor,GHS-R)的內(nèi)源性配體,主要在胃組織內(nèi)合成,并釋放入血循環(huán)作用于全身[1]。ghrelin和它的受體GHS-R廣泛表達(dá)于多種組織,其中就包
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