低氧條件下鐵調(diào)節(jié)蛋白1在維持SH-SY5Y細(xì)胞鐵穩(wěn)態(tài)中的作用
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【摘要】:目的:研究低氧條件下鐵調(diào)節(jié)蛋白1(iron regulatory protein 1,IRP1)對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞鐵穩(wěn)態(tài)的影響。方法:1%O2處理SH-SY5Y細(xì)胞0,1,2,4,6 h,蛋白質(zhì)印跡法檢測鐵蛋白輕鏈(ferritin light chain,Ft-L)以及膜鐵輸出蛋白(ferroportin,Fpn)的表達(dá);Calcein-AM法檢測SH-SY5Y細(xì)胞對Fe2+的吸收以及細(xì)胞可變鐵池(labile iron pool,LIP);采用硫氰酸鹽分光光度法測定細(xì)胞總含鐵量;特異性siRNA下調(diào)IRP1后檢測SH-SY5Y細(xì)胞低氧2 h鐵穩(wěn)態(tài)的變化。結(jié)果:低氧0~6 h,SH-SY5Y細(xì)胞Ft-L和Fpn表達(dá)增加,Fe2+攝入和LIP增加,但細(xì)胞總鐵水平不變。siRNA下調(diào)IRP1表達(dá)后再低氧2 h,Ft-L蛋白表達(dá)和LIP明顯增加,Fpn表達(dá)和Fe2+攝入沒有明顯變化,細(xì)胞總鐵水平增加。結(jié)論:低氧條件下,IRP1是SH-SY5Y細(xì)胞鐵穩(wěn)態(tài)的重要調(diào)節(jié)者。
【作者單位】: 南通大學(xué)附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心;南通大學(xué)航海醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 低氧 鐵調(diào)節(jié)蛋白 鐵穩(wěn)態(tài) SH-SYY細(xì)胞 細(xì)胞可變鐵池
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(30971197,31171143,31471141)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 鐵為生命活動所必需,其缺乏會引起細(xì)胞生長停止和死亡,超載可誘發(fā)大量自由基的產(chǎn)生,引起神經(jīng)退行性病變和多種與老年相關(guān)的疾病。游離鐵通過Haber-Weiss或Fenton反應(yīng)與過氧化氫或脂質(zhì)過氧化物反應(yīng)促進(jìn)活性氧簇的產(chǎn)生,導(dǎo)致脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA的損傷[1]。細(xì)胞通過鐵調(diào)節(jié)蛋白(iron
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3 王W,
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