Ⅰ型登革病毒包膜蛋白Ⅲ區(qū)中和抗體的制備與鑒定
本文關鍵詞:Ⅰ型登革病毒包膜蛋白Ⅲ區(qū)中和抗體的制備與鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的研制Ⅰ型登革病毒包膜蛋白Ⅲ區(qū)(dengue virus 1 envelope protein domainⅢ,DENV-1 EDⅢ)單克隆抗體,并鑒定其血清型特異性、相對表位和中和活性。方法采用DENV-1 EDⅢ重組蛋白為免疫原,免疫Balb/c小鼠,制備抗DENV-1 EDⅢ單抗,鑒定單抗的免疫學特性和交叉反應性,噬斑減少中和實驗鑒定其中和活性,抗體與抗體間競爭抑制分析相對表位。結果共獲得抗DENV-1 EDⅢ單抗28株,其Ig亞類鑒定24株為Ig G1,2株為Ig G2a,2株為Ig G2b,包含13株DENV-1血清型特異性單抗,9株DENV病毒特異性單抗,其它6株交叉反應性單抗以不同的方式同各型DENV EDⅢ反應,至少識別5個不同位點,其中27株抗體對不同血清型登革病毒表現(xiàn)出不同的中和活性。結論成功獲得了針對DENV-1 EDⅢ的特異性單抗及交叉性中和單抗,將為進一步研究登革病毒EDⅢ蛋白的結構與功能、疫苗和治療性抗體的研發(fā)奠定基礎。
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院檢驗醫(yī)學部;廣州市疾病預防控制中心;
【關鍵詞】: 登革病毒 包膜蛋白Ⅲ區(qū) 中和抗體
【基金】:國家自然科學基金(81201296)
【分類號】:R392.12
【正文快照】: 由登革熱病毒(dengue virus,DENV)所致的登革熱是熱帶和亞熱帶國家和地區(qū)一主要的公共衛(wèi)生問題[1-3]。登革病毒包膜(envelope,E)蛋白是病毒顆粒表面主要的結構蛋白,E蛋白誘導的抗體與保護性體液免疫具有重要關系[4],研究發(fā)現(xiàn)E蛋白胞外區(qū)的三區(qū)(domainⅢ,EDⅢ)是E蛋白較獨立的
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