本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成類神經(jīng)元的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:采用不同細(xì)胞因子定向誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化成類神經(jīng)元,為臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷提供理論依據(jù)。方法:采用Ⅱ型膠原酶消化法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,采用流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞。取第5代細(xì)胞隨機(jī)分成A、B、C、D 4組,在A組基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入b FGF,B組中加入b FGF和BDNF,C組中加入b FGF、BDNF和BHA誘導(dǎo)培養(yǎng),D組為對照組,使用含有10%胎牛血清的DMEM-F12培養(yǎng)基培養(yǎng)。誘導(dǎo)2周后采用實(shí)時熒光定量PCR檢測細(xì)胞的nestin、NEFH和GFAP mRNA表達(dá)情況,并通過原子力顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的的變化。結(jié)果:Ⅱ型膠原酶消化法能成功分離人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測第3代細(xì)胞發(fā)現(xiàn),細(xì)胞均強(qiáng)表達(dá)CD29、CD44和CD105,而CD34、CD45和HLA-DR均未見表達(dá)。經(jīng)定向誘導(dǎo)分化成類神經(jīng)元后,原子力顯微鏡觀察細(xì)胞表面突起增多,實(shí)時熒光定量PCR檢測顯示nestin在A、B、C組均呈陽性表達(dá),NEFH在A、B組呈陽性表達(dá),而GFAP在A、B、C、D 4組均不表達(dá)。A、B組n EFH和nestin表達(dá)具有顯著差異(P㩳0.05)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,所培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增迅速,生物學(xué)性狀穩(wěn)定;與b FGF單獨(dú)處理相比,b FGF聯(lián)合BDNF更能有效誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化成類神經(jīng)元。
【作者單位】： 暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 分化 神經(jīng)元樣細(xì)胞
【基金】：廣州市科技計劃(No.12C32071662) 廣東省中醫(yī)藥局項(xiàng)目(No.2013113) 暨南大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院科研培育專項(xiàng)基金(No.2012103);暨南大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院科研培育專項(xiàng)基金(No.2013208)
【分類號】：R329
【正文快照】： 脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)主要是車禍或墜落傷所致,因其呈高發(fā)生率、高致殘率、高耗費(fèi)、低死亡率的特點(diǎn)而成為全球性醫(yī)療和社會共同關(guān)注的問題。目前SCI尚無有效的臨床治療對策,仍然是醫(yī)學(xué)科學(xué)領(lǐng)域中一個極具挑戰(zhàn)性的課題[1]。干細(xì)胞移植治療SCI是近年來研究熱點(diǎn),主要

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  本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成類神經(jīng)元的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：418083