本文關鍵詞：抗噬菌體甲型副傷寒沙門菌突變菌的構(gòu)建及其生物學特性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:采用同源重組基因敲除方法構(gòu)建3株甲型副傷寒沙門菌(副甲)抗噬菌體突變菌,并研究其生物學特性。方法:通過PCR和融合PCR方法獲得了2、3、5號同源臂片段,經(jīng)酶切后與pYG4載體連接,構(gòu)建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重組質(zhì)粒。經(jīng)PCR測序鑒定正確后,與野生型副甲菌進行同源重組,獲得2、3、5號3株抗噬菌體突變菌。將3株突變菌和野生型副甲菌經(jīng)不同種類和濃度的抗生素、不同pH值和溫度及不同濃度的鹽離子處理后,測量菌株的A595值,分析3株突變菌對抗生素、溫度、pH值和鹽離子的敏感性以及生長曲線。結(jié)果:PCR和融合PCR擴增出3個同源臂,構(gòu)建的pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重組質(zhì)粒經(jīng)PCR測序表明構(gòu)建成功;同源重組和抗噬菌體驗證表明成功獲得3株抗噬菌體突變菌。3株突變菌產(chǎn)生了卡那霉素抗性,且對鏈霉素表現(xiàn)出敏感性;2號菌表現(xiàn)出氨芐青霉素抗性,5號菌表現(xiàn)高溫度耐受性;與野性型副甲菌比較,3株突變菌的生長曲線明顯平緩,尤以2號突變菌最為突出。結(jié)論:成功構(gòu)建抗噬菌體突變菌,并獲得一些特殊的生物學特性。
【作者單位】： 昆明理工大學醫(yī)學院病原微生物學實驗室;昆明學院醫(yī)學院臨床檢驗教研室;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院核醫(yī)學科;湖北省孝感市中心醫(yī)院泌尿外科;
【關鍵詞】： 甲型副傷寒沙門菌 突變菌 同源重組 生物學特性 噬菌體抗性
【基金】：國家自然科學基金資助課題(31160193) 云南省教育廳科研項目資助課題(2010Y398) 云南省科技廳應用基礎研究面上項目資助課題(2010ZC055;2012FB135)
【分類號】：R378
【正文快照】： 甲型副傷寒沙門菌(副甲菌)以糞口途徑傳播,是甲型副傷寒的病原菌。人群對副甲菌普遍易感,尤以兒童和青壯年發(fā)病率最高。每年全球傷寒患者約2 200萬例,其中由副甲菌引起的約500萬例[1]。噬菌體是生物圈中最多的微生物,其數(shù)量約是細菌的10倍[2],作為細菌的殺手,噬菌體對微生物生

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  本文關鍵詞：抗噬菌體甲型副傷寒沙門菌突變菌的構(gòu)建及其生物學特性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：418004