本文關(guān)鍵詞：抗噬菌體甲型副傷寒沙門(mén)菌突變菌的構(gòu)建及其生物學(xué)特性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:采用同源重組基因敲除方法構(gòu)建3株甲型副傷寒沙門(mén)菌(副甲)抗噬菌體突變菌,并研究其生物學(xué)特性。方法:通過(guò)PCR和融合PCR方法獲得了2、3、5號(hào)同源臂片段,經(jīng)酶切后與pYG4載體連接,構(gòu)建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重組質(zhì)粒。經(jīng)PCR測(cè)序鑒定正確后,與野生型副甲菌進(jìn)行同源重組,獲得2、3、5號(hào)3株抗噬菌體突變菌。將3株突變菌和野生型副甲菌經(jīng)不同種類(lèi)和濃度的抗生素、不同pH值和溫度及不同濃度的鹽離子處理后,測(cè)量菌株的A595值,分析3株突變菌對(duì)抗生素、溫度、pH值和鹽離子的敏感性以及生長(zhǎng)曲線(xiàn)。結(jié)果:PCR和融合PCR擴(kuò)增出3個(gè)同源臂,構(gòu)建的pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重組質(zhì)粒經(jīng)PCR測(cè)序表明構(gòu)建成功;同源重組和抗噬菌體驗(yàn)證表明成功獲得3株抗噬菌體突變菌。3株突變菌產(chǎn)生了卡那霉素抗性,且對(duì)鏈霉素表現(xiàn)出敏感性;2號(hào)菌表現(xiàn)出氨芐青霉素抗性,5號(hào)菌表現(xiàn)高溫度耐受性;與野性型副甲菌比較,3株突變菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)明顯平緩,尤以2號(hào)突變菌最為突出。結(jié)論:成功構(gòu)建抗噬菌體突變菌,并獲得一些特殊的生物學(xué)特性。
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室;昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)教研室;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;湖北省孝感市中心醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： 甲型副傷寒沙門(mén)菌 突變菌 同源重組 生物學(xué)特性 噬菌體抗性
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助課題(31160193) 云南省教育廳科研項(xiàng)目資助課題(2010Y398) 云南省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究面上項(xiàng)目資助課題(2010ZC055;2012FB135)
【分類(lèi)號(hào)】：R378
【正文快照】： 甲型副傷寒沙門(mén)菌(副甲菌)以糞口途徑傳播,是甲型副傷寒的病原菌。人群對(duì)副甲菌普遍易感,尤以?xún)和颓鄩涯臧l(fā)病率最高。每年全球傷寒患者約2 200萬(wàn)例,其中由副甲菌引起的約500萬(wàn)例[1]。噬菌體是生物圈中最多的微生物,其數(shù)量約是細(xì)菌的10倍[2],作為細(xì)菌的殺手,噬菌體對(duì)微生物生

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本文編號(hào)：418004