本文關鍵詞：兩種方法分離免疫細胞用于高通量測序TCR組庫分析的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討兩種方法分離免疫細胞進行高通量T細胞表面的T細胞變體(TCR),組庫分析的區(qū)別及可行性。方法分別采用免疫磁珠分選純化CD3陽性T細胞和Ficoll-Paque梯度離心法分離外周血淋巴細胞的方法制備TCR測序所需樣品各1例,提取DNA后多重聚合酶鏈式反應(PCR)擴增CDR3區(qū)域,將擴增得到的PCR產(chǎn)物純化后構建免疫組庫,進行高通量測序及生物信息學分析。結果兩種方法獲得的免疫細胞提取DNA后均能夠滿足TCR免疫組庫建庫需要,高通量測序結果顯示互補決定簇3(CDR3)區(qū)域長度呈高斯分布,來自健康志愿者的TCR具有豐富多樣性,腫瘤患者TCR多樣性呈寡克隆分布。結論純化的T細胞或者直接分離得到的淋巴細胞均可用于免疫組庫構建及后續(xù)TCR CDR3受體庫高通量測序分析,TCR CDR3多樣性可能直接反應機體免疫狀態(tài)。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學附屬北京世紀壇醫(yī)院腫瘤內科;
【關鍵詞】： T細胞受體 高通量測序 互補決定簇
【基金】：國家自然科學基金面上項目(C81172534)
【分類號】：R392
【正文快照】： T細胞表面的T細胞受體(T cell receptor,TCR)是識別抗原的關鍵分子,具有龐大的多樣性,以適應對于不同抗原的識別。TCR最大量多樣性的產(chǎn)生主要來自于連接時,在V(D)J連接區(qū)核苷酸的插入和刪除,體現(xiàn)為互補決定區(qū)簇3(complementarydetermining region 3,CDR3)序列多樣性,因此,TCR

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;Analysis of the CDR3 Length Repertoire and the Diversity of TCRα Chain in Human Peripheral Blood T Lymphocytes[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年03期

2 王鵬;賀曉燕;王小妹;姚新生;;T細胞TCR CDR3受體庫的高通量測序分析概況[J];現(xiàn)代免疫學;2011年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 周建偉;高素平;孔翠;史碩;;TCRβ鏈CDR3譜系與病毒感染相關研究進展[J];濟寧醫(yī)學院學報;2011年06期

2 張蒙;王倚天;謝良富;蔡志明;吳松;;腫瘤免疫組庫研究促進癌癥疫苗研究[J];生命科學;2015年02期

3 李志峰;宋方洲;周全華;馮連貴;凌華;張敏;;“熒光定量PCR溶解曲線法”監(jiān)測HIV感染者TCR α鏈CDR3譜系漂移的研究[J];中國病原生物學雜志;2010年07期

4 孫永蘋;湯賢英;朱紅倩;楊雪峰;姚新生;;一例彌漫性大B淋巴細胞瘤組織樣本T細胞TCR α/β CDR3譜序的初步分析[J];遵義醫(yī)學院學報;2012年02期

5 張?zhí)?孫素紅;;高通量測序技術檢測T&B細胞CDR3受體庫在臨床中的應用[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2014年09期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 溫博;基于流式細胞術的類風濕關節(jié)炎實驗研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 賀曉燕;CE&HTS技術初步分析母子間外周血T細胞TRBV F&P基因家族CDR3組成和特征[D];遵義醫(yī)學院;2011年

2 伍紹強;CHB患者外周血及肝組織中T淋巴細胞受體β鏈互補決定區(qū)3譜系分析[D];遵義醫(yī)學院;2010年

3 姚文娟;豬瘟病毒C株感染前后豬αβTCR變化動態(tài)與分子結構組成特征研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2014年

4 王騰;GeXP多基因遺傳表達系統(tǒng)檢測人TCRVα和TCRVβ鏈CDR3譜型及長度的方法建立以及初步應用[D];廣東藥學院;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 姚新生;周明乾;馬驪;羅微;馮曉勤;溫茜;王小寧;;外周造血干細胞移植后及出現(xiàn)GVHD時T細胞β鏈CDR3譜型分析[J];南方醫(yī)科大學學報;2008年04期

2 姚新生,王小寧;外周T細胞TCR基因的重排(編輯/修正)與選擇[J];現(xiàn)代免疫學;2005年03期

3 ;Expression of recombination-activating genes and T cell receptor gene recombination in the human T cell leukemia cell line[J];Chinese Medical Journal;2007年05期

4 馬大龍;免疫組學:21世紀免疫學家的新挑戰(zhàn)[J];中華微生物學和免疫學雜志;2005年09期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊燕軍;;調控免疫細胞的新方法[J];國外醫(yī)學情報;2001年02期

2 周建,劉磊,蔣春雷,陳宜張;甾體激素對免疫細胞快速作用的非基因組機制[J];生理科學進展;2004年02期

3 周淑君;致病性自由生活阿米巴:免疫細胞學論證和蟲種鑒定[J];國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊);1985年06期

4 李康生,楊貴貞;免疫細胞促腎上腺皮質激素受體分布特性[J];中國應用生理學雜志;1992年01期

5 朱曉萍,吳振裘,李秀忠,許德風;血管性原免疫細胞淋巴腺病一例并文獻復習[J];寧夏醫(yī)學院學報;1998年01期

6 聶鳳珍;;HIV產(chǎn)生一種有助于它增殖的蛋白[J];國外醫(yī)學情報;1998年03期

7 艾新;;背療可激活免疫細胞[J];家庭科技;2006年05期

8 ;免疫細胞：癌癥福音?[J];新世紀周刊;2007年25期

9 婁雪林,何立銘,龔非力,于曉,徐濤,周專;免疫細胞分泌研究進展[J];生理學報;2002年03期

10 魏雪飛,許賢豪,張華,國紅,喬立艷,殷劍,矯毓娟,侯世芳,劉江紅;免疫細胞的冷凍保存[J];中國神經(jīng)免疫學和神經(jīng)病學雜志;2003年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周娟;陳龍;曹萌;蔣英子;高偉;;鎘負荷大鼠血漿某些免疫介質水平及脾臟免疫細胞活性變化[A];中國生理學會第六屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2003年

2 白軼;賈俊;孫志軍;趙怡芳;;淋巴管畸形中免疫細胞團塊的研究[A];2007'全國口腔頜面部脈管性疾病學術研討會論文集[C];2007年

3 呂占軍;王秀芳;侯潔;;不同發(fā)育階段免疫細胞高表達基因大小的比較[A];中國免疫學會第四屆學術大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

4 黃文州;陳梅生;;免疫細胞系列治療儀的發(fā)明回顧[A];中國儀器儀表學會醫(yī)療儀器分會2010兩岸四地生物醫(yī)學工程學術年會論文集[C];2010年

5 王小寧;;Intosis，，免疫細胞死亡的新機制?[A];第六屆全國免疫學學術大會論文集[C];2008年

6 關雪;關秀茹;;動脈粥樣硬化的免疫細胞和自身抗原研究進展[A];2012全國臨床微生物與感染免疫學術研討會論文集[C];2012年

7 姜玉玲;蔣麗鑫;;動脈粥樣硬化的免疫細胞和自身抗原的研究進展[A];中華醫(yī)學會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2012年

8 劉曉萍;于業(yè)軍;王躍軍;;扇貝多肽對免疫細胞活性及其功能的影響[A];加入WTO和中國科技與可持續(xù)發(fā)展——挑戰(zhàn)與機遇、責任和對策（下冊）[C];2002年

9 石炳毅;;調節(jié)性免疫細胞在移植領域的臨床轉化研究[A];2013中國器官移植大會論文匯編[C];2013年

10 吳紅英;王月英;李德冠;張恒;路璐;王小春;王彥;褚麗萍;張俊玲;孟愛民;;IRM-2小鼠免疫細胞功能測定[A];中國環(huán)境誘變劑學會第14屆學術交流會議論文集[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 常麗君;用藥物調節(jié)特殊免疫細胞可控制腫瘤生長[N];科技日報;2013年

2 實習生 鄭瑩瑩 記者 馬飛;免疫細胞儲存：先行者大膽布局[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2014年

3 本報記者 王志靈;開能環(huán)保12億元豪賭免疫細胞：從實驗室到市場勝算多少？[N];21世紀經(jīng)濟報道;2014年

4 華凌;飲食或藥物可使免疫細胞“煥發(fā)青春”[N];科技日報;2014年

5 本報實習記者 曹學平;跨界免疫細胞 開能環(huán)保講故事？[N];中國經(jīng)營報;2014年

6 記者 耿挺;鈣離子“點燃”免疫細胞“烽火臺”[N];上�？萍紙�;2012年

7 北京朝陽醫(yī)院肝病科主任 姚鵬;抗癌免疫細胞進化史[N];健康報;2013年

8 許琦敏;“長壽”免疫細胞帶來健康隱患[N];文匯報;2007年

9 錢錚;科學家在小腸上,發(fā)現(xiàn)了免疫細胞[N];新華每日電訊;2008年

10 華凌;激活大腦免疫細胞可修復受損腦組織[N];科技日報;2012年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 王珊;免疫細胞細胞胞內死亡特征及機制研究[D];華南理工大學;2012年

2 宋春輝;模擬HCV HVR1免疫7肽對人不同免疫細胞分泌細胞因子影響的初步研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2008年

3 胡亮杉;植物多酚提高CD34~+早期急性髓系白血病細胞被活化免疫細胞殺傷的敏感性[D];南方醫(yī)科大學;2011年

4 徐鵬輝;腸黏膜上皮細胞與免疫細胞相互作用的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

5 劉映霞;重型乙型肝炎免疫細胞差異表達基因研究[D];中南大學;2003年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 梁傳宇;免疫細胞輻射誘導免疫反應的研究[D];長春工業(yè)大學;2011年

2 閉書文;重癥手足口病中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫細胞的分布、數(shù)量及意義[D];廣西醫(yī)科大學;2013年

3 張穎;雜色曲霉素對小鼠免疫細胞的細胞因子影響的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2008年

4 王玉葉;重組hIFN-α-2b-BCG對人外周血免疫細胞鐘樣蛋白受體表達調節(jié)及其抗腫瘤作用的研究[D];天津醫(yī)科大學;2006年

5 王永祥;TIPE2在鼠動脈硬化斑塊和人多種組織細胞中的表達及其意義[D];山東大學;2009年

6 吳正中;Pristane誘導小鼠狼瘡模型的建立及其免疫細胞功能變化的研究[D];蚌埠醫(yī)學院;2013年

  本文關鍵詞：兩種方法分離免疫細胞用于高通量測序TCR組庫分析的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：412454