本文關(guān)鍵詞：M-CSF與L929細(xì)胞培養(yǎng)上清誘導(dǎo)分化骨髓巨噬細(xì)胞的差異分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]通過比較常用的M-CSF與L929細(xì)胞培養(yǎng)上清兩種誘導(dǎo)方式獲得骨髓巨噬細(xì)胞(BMDM)的形態(tài)及基本生物學(xué)功能,為選擇制備BMDM的方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]用兩種方式誘導(dǎo)小鼠骨髓獲取BMDM,然后分別利用Zeiss熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀比較BMDM的細(xì)胞形態(tài)及純度;通過吞噬實(shí)驗(yàn)、殺菌實(shí)驗(yàn)以及液相芯片技術(shù)(liquid chip)比較兩組BMDM的生物學(xué)功能;同時(shí)將上述結(jié)果與體內(nèi)分化成熟的腹腔巨噬細(xì)胞相比較。[結(jié)果]兩組誘導(dǎo)分化成熟的BMDM均呈現(xiàn)不規(guī)則形或梭形;BMDM的純度分別為M-CSF組98.6%,L929上清組99.6%;腹腔細(xì)胞貼壁后巨噬細(xì)胞的純度是98.8%;吞噬實(shí)驗(yàn)、殺菌實(shí)驗(yàn)兩組之間及其與腹腔巨噬細(xì)胞相比無顯著差異;炎癥因子釋放水平檢測(cè)中3組細(xì)胞存在IL-6或TNF-α某些時(shí)間點(diǎn)釋放水平差異。[結(jié)論]M-CS與L929上清誘導(dǎo)方式所獲得BMDM的形態(tài)相似,純度相近(98.6%比99.6%),吞噬細(xì)菌能力無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(21.31±5.83比26.10±6.11,t=-0.745,P0.05),殺菌能力無顯著差異(殺菌30min:36.41%±4.21%比39.53%±6.75%;60min:44.35%±6.75%比45.27%±1.96%,兩者均P0.05),但是炎癥因子釋放的某些時(shí)間點(diǎn)有差異(TNF-α的釋放在LPS刺激后24 h M-CSF組高于L929組:549.92±412比271.47±432,t=-0.34,P0.05),應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇獲取BMDM的誘導(dǎo)方式。
【作者單位】： 廣東省蛋白質(zhì)組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室南方醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： M-CSF L細(xì)胞上清 骨髓巨噬細(xì)胞 腹腔巨噬細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(“組蛋白修飾對(duì)內(nèi)毒素血癥炎癥介質(zhì)釋放的調(diào)控”,No.81072425;“NF-κB p65活化在調(diào)控細(xì)菌脂蛋白耐受巨噬細(xì)胞殺菌能力中的作用及其相關(guān)分子機(jī)制”,No.81272149)資助~~
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 0引言巨噬細(xì)胞具有非常重要的生物學(xué)功能。當(dāng)病原體進(jìn)入機(jī)體時(shí),巨噬細(xì)胞能夠迅速清除病原微生物發(fā)揮非特異性免疫防御作用[1];其次,巨噬細(xì)胞還能通過釋放多種細(xì)胞因子廣泛參與炎癥、腫瘤免疫、止血、組織修復(fù)等過程,與此同時(shí)其自身的功能狀態(tài)也受到局部微環(huán)境的影響。巨噬細(xì)胞

【參考文獻(xiàn)】

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1 李雪;王義乾;羅海華;鐘s檒

本文編號(hào)：408751