本文關鍵詞：M-CSF與L929細胞培養(yǎng)上清誘導分化骨髓巨噬細胞的差異分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]通過比較常用的M-CSF與L929細胞培養(yǎng)上清兩種誘導方式獲得骨髓巨噬細胞(BMDM)的形態(tài)及基本生物學功能,為選擇制備BMDM的方法提供實驗依據(jù)。[方法]用兩種方式誘導小鼠骨髓獲取BMDM,然后分別利用Zeiss熒光顯微鏡和流式細胞儀比較BMDM的細胞形態(tài)及純度;通過吞噬實驗、殺菌實驗以及液相芯片技術(liquid chip)比較兩組BMDM的生物學功能;同時將上述結果與體內分化成熟的腹腔巨噬細胞相比較。[結果]兩組誘導分化成熟的BMDM均呈現(xiàn)不規(guī)則形或梭形;BMDM的純度分別為M-CSF組98.6%,L929上清組99.6%;腹腔細胞貼壁后巨噬細胞的純度是98.8%;吞噬實驗、殺菌實驗兩組之間及其與腹腔巨噬細胞相比無顯著差異;炎癥因子釋放水平檢測中3組細胞存在IL-6或TNF-α某些時間點釋放水平差異。[結論]M-CS與L929上清誘導方式所獲得BMDM的形態(tài)相似,純度相近(98.6%比99.6%),吞噬細菌能力無顯著統(tǒng)計學差異(21.31±5.83比26.10±6.11,t=-0.745,P0.05),殺菌能力無顯著差異(殺菌30min:36.41%±4.21%比39.53%±6.75%;60min:44.35%±6.75%比45.27%±1.96%,兩者均P0.05),但是炎癥因子釋放的某些時間點有差異(TNF-α的釋放在LPS刺激后24 h M-CSF組高于L929組:549.92±412比271.47±432,t=-0.34,P0.05),應根據(jù)實驗目的選擇獲取BMDM的誘導方式。
【作者單位】： 廣東省蛋白質組學重點實驗室南方醫(yī)科大學病理生理學教研室;
【關鍵詞】： M-CSF L細胞上清 骨髓巨噬細胞 腹腔巨噬細胞
【基金】：國家自然科學基金項目(“組蛋白修飾對內毒素血癥炎癥介質釋放的調控”,No.81072425;“NF-κB p65活化在調控細菌脂蛋白耐受巨噬細胞殺菌能力中的作用及其相關分子機制”,No.81272149)資助~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 0引言巨噬細胞具有非常重要的生物學功能。當病原體進入機體時,巨噬細胞能夠迅速清除病原微生物發(fā)揮非特異性免疫防御作用[1];其次,巨噬細胞還能通過釋放多種細胞因子廣泛參與炎癥、腫瘤免疫、止血、組織修復等過程,與此同時其自身的功能狀態(tài)也受到局部微環(huán)境的影響。巨噬細胞

【參考文獻】

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1 李雪;王義乾;羅海華;鐘s檒

本文編號：408751