本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌感應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白CrdR的原核表達(dá)及其在酸適應(yīng)調(diào)控中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 原核表達(dá)幽門螺桿菌26695標(biāo)準(zhǔn)株的感應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白CrdR，并初步探討其在酸適應(yīng)調(diào)控中的作用，為從細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境的生理角度探索抗感染的新途徑提供實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 以提取的幽門螺桿菌26695標(biāo)準(zhǔn)株基因組DNA為模板，PCR擴(kuò)增hp1365基因；將其克隆至載體pGEX-6P-1中，構(gòu)建pGEX-hp1365載體，通過(guò)雙酶切和DNA測(cè)序鑒定后，轉(zhuǎn)化E.coli JM109，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)；表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE分析、Western blot鑒定；目的蛋白大量表達(dá)后經(jīng)親和層析法純化，免疫家兔制備抗重組CrdR蛋白的兔免疫血清，通過(guò)Western blot分析CrdR蛋白在不同pH條件下的表達(dá)量，探討CrdR調(diào)節(jié)蛋白在幽門螺桿菌酸適應(yīng)調(diào)控中的作用。 結(jié)果 經(jīng)PCR擴(kuò)增的hp1365基因全長(zhǎng)642bp，與hp1365基因大小一致；重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-hp1365經(jīng)雙酶切和DNA測(cè)序鑒定，插入的片段與hp1365基因序列完全一致；SDS-PAGE分析表達(dá)的重組蛋白相對(duì)分子質(zhì)量約為25KDa，蛋白含量為60%，以包涵體形式表達(dá)；Western blot鑒定為CrdR蛋白；制備了抗重組CrdR蛋白的兔免疫血清；Western blot分析顯示，，在不同pH培養(yǎng)條件下，幽門螺桿菌CrdR蛋白在pH5的培養(yǎng)基條件下表達(dá)量最高，并隨著pH增高其表達(dá)量呈遞減趨勢(shì)。 結(jié)論 成功原核表達(dá)了幽門螺桿菌26695標(biāo)準(zhǔn)株CrdR蛋白，該蛋白在幽門螺桿菌酸適應(yīng)中起到調(diào)控作用，為進(jìn)一步探討CrdR的作用機(jī)制和通過(guò)阻斷CrdR抗幽門螺桿菌感染的措施提供了實(shí)驗(yàn)材料。
【關(guān)鍵詞】：幽門螺桿菌 CrdR 蛋白 原核表達(dá) 酸適應(yīng) 調(diào)控
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R378.2
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 第一部分 幽門螺桿菌感應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白 CrdR 的原核表達(dá)13-29
• 1 材料與方法13-25
• 2 結(jié)果25-27
• 3 討論27-29
• 第二部分 幽門螺桿菌感應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白 CrdR 在酸適應(yīng)調(diào)控中作用的初步探討29-40
• 1 材料與方法29-35
• 2 結(jié)果35-38
• 3 討論38-40
• 全文總結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 文獻(xiàn)綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的文章及參加的學(xué)術(shù)會(huì)議52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 成虹;胡伏蓮;謝勇;胡品津;王吉耀;呂農(nóng)華;張建中;張桂英;周曾芬;吳克利;張玲霞;彭孝偉;戴寧;唐國(guó)都;姜葵;李巖;侯曉華;白文元;王明春;葉紅軍;劉玉蘭;許樂(lè);;中國(guó)幽門螺桿菌耐藥狀況以及耐藥對(duì)治療的影響—全國(guó)多中心臨床研究[J];胃腸病學(xué);2007年09期

  本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌感應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白CrdR的原核表達(dá)及其在酸適應(yīng)調(diào)控中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：408163