本文關(guān)鍵詞：利用TALEN技術(shù)高效制備TXNIP基因敲除小鼠模型，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的利用顯微注射技術(shù)注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA獲得TXNIP敲除小鼠。方法在線設(shè)計(jì)Txnip敲除位點(diǎn),構(gòu)建TALEN載體并在細(xì)胞水平驗(yàn)證剪切活性,體外轉(zhuǎn)錄TALENs成mRNA并通過顯微注射技術(shù)注射到C57BL/6J小鼠受精卵,對(duì)F0代小鼠進(jìn)行DNA水平鑒定獲得TXNIP敲除小鼠。結(jié)果在Txnip第一外顯子上設(shè)計(jì)了TALEN識(shí)別剪切位點(diǎn),并在細(xì)胞水平驗(yàn)證具有剪切活性,注射mRNA到受精卵獲得了4只敲除小鼠,其中2只Txnip發(fā)生移碼突變,成功制備了TXNIP敲除小鼠。結(jié)論通過注射TALENs mRNA可以高效制備TXNIP敲除小鼠。
【作者單位】： 浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;深圳華大基因研究院;
【關(guān)鍵詞】： TALEN 顯微注射 TXNIP 基因敲除 模型 小鼠
【基金】：浙江省衛(wèi)生高層次創(chuàng)新人才項(xiàng)目 浙江省科技廳院所專項(xiàng)(2014F10033)
【分類號(hào)】：R-332
【正文快照】： �；蚯贸∈竽Ｐ褪茄芯炕蚬δ艿闹匾ぞ咧�,最早科學(xué)家利用同源重組技術(shù)制備基因敲除小鼠ES細(xì)胞系,然后通過囊胚注射制備基因敲除小鼠[1,2],近年來興起的基因組編輯工具,例如鋅指核酸酶ZFN[3],轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶TALEN[4],規(guī)律成簇間隔短回文重復(fù)序列CRISPR以

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本文編號(hào)：407372