哺乳動(dòng)物精子膜離子通道對(duì)精子的成熟、獲能和頂體反應(yīng)(acrosome reaction, AR)有重要作用，已有的資料表明，當(dāng)精子所在環(huán)境中缺乏Cl-或Cl-通道阻斷劑存在時(shí)，AR受到抑制。但由于精子太小以及它特殊的立體結(jié)構(gòu)和高度分化特點(diǎn)，目前還難以用膜片箝技術(shù)直接記錄人精子膜離子通道電流，從而獲得有關(guān)人精子膜Cl-道類別及電生理特性的基本資料。本文報(bào)告，將抽提的人精子膜蛋白重組于脂質(zhì)體脂雙層膜，并進(jìn)而通過(guò)脫水-復(fù)水法使之融合成可用于膜片箝研究的巨脂質(zhì)體(直徑>10 (m)，在NMDG-Cl溶液中記錄到三種不同單位電導(dǎo)的通道活動(dòng)。它們都可被Cl-通道阻斷劑SITS濃度依賴地抑制。研究還表明，它們的開(kāi)放有一定的電壓依賴性；對(duì)其開(kāi)放、關(guān)閉時(shí)間分布進(jìn)行擬合，可得到兩個(gè)開(kāi)放和兩個(gè)關(guān)閉時(shí)間常數(shù)；還觀察到電導(dǎo)亞態(tài)和簇狀發(fā)放的存在。 近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，某些中藥成份具雄性抗生育作用。其中以棉酚(gossypol)和雷公藤(Tripterygium wilfordii)為代表，已受到人們的廣泛關(guān)注，目前已從雷公藤中分離出多種具雄性抗生育作用的單體成份。但關(guān)于這些藥物對(duì)通道影響方面的研...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中英文摘要
第一部分 重組于巨脂質(zhì)體的人精子膜Cl^-通道的膜片箝研究
    1. 引言
    2. 材料與方法
        2.1 人精子膜蛋白樣本
        2.2 通道蛋白重裝于巨脂質(zhì)體
        2.3 隔離巨脂質(zhì)體膜片，記錄單通道電流活動(dòng)
        2.4 結(jié)果分析
        2.5 溶液和試劑
    3. 結(jié)果
        3.1 單位電導(dǎo)
        3.2 通道活動(dòng)被Cl^-通道阻斷劑抑制
        3.3 通道的電壓依賴性
        3.4 通道開(kāi)放、關(guān)閉時(shí)間常數(shù)
        3.5 通道的電導(dǎo)亞態(tài)和簇狀活動(dòng)
    4. 討論
    5. 參考文獻(xiàn)
第二部分 雄性抗生育中藥對(duì)小鼠生精細(xì)胞Ca²⁺通道的抑制
    1. 引言
    2. 材料與方法
        2.1 生精細(xì)胞的分離
        2.2 精子的分離與收集
        2.3 通道電流的記錄
        2.4 精子AR的評(píng)價(jià)
        2.5 結(jié)果分析
        2.6 溶液與藥品
    3. 結(jié)果
        3.1 棉酚對(duì)小鼠生精細(xì)胞離子通道的作用
            3.1.1 時(shí)間依賴性、濃度依賴性和不可逆地抑制Ca2+流
            3.1.2 濃度依賴地增大通道的失活時(shí)間常數(shù)
            3.1.3 棉酚對(duì)T型Ca2+電流的抑制與G蛋白、酪氨酸激酶無(wú)關(guān)
            3.1.4 對(duì)Cl-通道電流無(wú)明顯作用
        3.2 雷公藤總甙及其中的三種單體，TZ、L-表兒茶酸、南蛇藤素對(duì)小鼠生精細(xì)胞T型Ca2+通道的抑制，以及TZ對(duì)精子AR的抑制
            3.2.1 GTW濃度依賴、部分可逆地抑制Ca²⁺流
            3.2.2 TZ在相近濃度濃度依賴、部分可逆地抑制Ca2+流
            3.2.3 L-表兒茶酸在較高濃度濃度依賴、部分可逆地抑制Ca2+流
            3.2.4 南蛇藤素濃度依賴、時(shí)間依賴地抑制Ca²⁺流
            3.2.5 TZ濃度依賴地抑制精子AR
    4. 討論
        4.1 棉酚抑制生精細(xì)胞T型Ca²⁺通道
        4.2 GTW及其單體抑制生精細(xì)胞T型Ca²⁺通道，以及TZ抑制精子AR
    5. 參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
附錄:綜述
    在讀期間發(fā)表論文、綜述和摘要
致謝



本文編號(hào)：4042198