目的：本研究旨在觀察聯(lián)合阻斷CD40-CD154和B7-CD28共刺激通路能否誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫無(wú)能細(xì)胞，以及無(wú)能細(xì)胞在體外實(shí)驗(yàn)中是否具有免疫調(diào)節(jié)作用；將其過(guò)繼輸注至心臟移植小鼠體內(nèi)能否延長(zhǎng)移植物存活時(shí)間；并初步探討相關(guān)的免疫學(xué)機(jī)制。 方法：1、抗-CD154和抗-CDSO單克隆抗體加入BALB／C（反應(yīng)細(xì)胞）和C3H（刺激細(xì)胞）的混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（MLR）體系中誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫無(wú)能細(xì)胞。將無(wú)能細(xì)胞或?qū)φ占?xì)胞分別加入新的MLR體系中觀察抑制效果以及抗原特異性。無(wú)能細(xì)胞中加入刺激抗原或重組小鼠IL-2（rmIL-2），觀察無(wú)能細(xì)胞的反應(yīng)情況。流式細(xì)胞儀檢測(cè)無(wú)能細(xì)胞的表型。2、將供體小鼠的心臟異位移植至受體小鼠腹腔內(nèi)，在Balb／c（H-2^d）、C3H（H-2^k）和C57BL／6（H-2^b）這三種常用的近交系小鼠品系中選擇理想的供、受體組合。3、在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，所有BALB／C受者小鼠術(shù)前均予以3.0—Gy γ射線照射以適應(yīng)輸注的無(wú)能細(xì)胞。γ射線照射的BALB／C小鼠在腹腔異位心臟移植術(shù)后即刻經(jīng)腎靜脈注入無(wú)能細(xì)胞，...

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.3.無(wú)能細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)情況

對(duì)照細(xì)胞尤能細(xì)胞圖1.3.無(wú)能細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)情況1.無(wú)能細(xì)胞或者對(duì)照細(xì)胞(無(wú)刺激組)2.無(wú)能細(xì)胞或?qū)φ占?xì)胞加入20一GyY射線照射的C3H脾細(xì)胞培養(yǎng)4天(C3H細(xì)胞刺激組)3.無(wú)能細(xì)胞或?qū)φ占?xì)胞加入IL一2培養(yǎng)2天(IL一2刺激組)4.無(wú)能細(xì)胞或?qū)φ占?xì)胞加入20一GyY射線照射的C3....

圖3.3優(yōu)化PCR反應(yīng)的循環(huán)數(shù)

由于無(wú)實(shí)時(shí)熒光定量民R裝置，故只育當(dāng)先擇半定量PCR，比較目的基因表達(dá)差異。首先，引訛咫R反應(yīng)的循環(huán)數(shù)，使反應(yīng)繳七升旨數(shù)增長(zhǎng)期，此日書立物濃度與目的基因表達(dá)水平高度相關(guān)(圖3.3)。圖3.3優(yōu)化PCR反應(yīng)的循環(huán)數(shù)注:p一actin擴(kuò)增24個(gè)循環(huán)后出現(xiàn)條帶，30個(gè)循環(huán)后不再增強(qiáng)，已....

本文編號(hào)：4033852