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HIV-1 C/B’亞型重組MVA疫苗特異性指標質(zhì)控方法的初步研究

發(fā)布時間:2025-01-17 15:47
  本課題組前期研究中與美國洛克菲勒大學附屬艾倫-戴蒙德艾滋病研究中心(ADARC)及國際艾滋病疫苗行動組織(IAVI)合作已經(jīng)成功構(gòu)建了針對中國HIV-1C/B'亞型的DNA疫苗和重組MVA疫苗。其中重組MVA疫苗基因組中攜帶有HIV-1 C/B'CRF株三個結(jié)構(gòu)基因gag-pol、env和兩個調(diào)節(jié)基因nef-tat共5個外源基因,得到的重組MVA疫苗,命名為ADMVA疫苗。 本論文在以上的基礎上,參照2005年中華人民共和國藥典和其他疫苗類生物制品的檢測方法以及“預防用以病毒為載體的活疫苗制劑的技術(shù)指導原則”,結(jié)合重組MVA病毒自身的特性,從以下幾個方面對ADMVA疫苗質(zhì)控方法進行了初步研究,擬定了相關(guān)的質(zhì)量標準。 應用免疫酶技術(shù)對ADMVA疫苗感染性滴度進行檢測,并對此方法的敏感性及重復穩(wěn)定性進行驗證。取5組重組MVA病毒樣品,同時應用免疫酶技術(shù)和傳統(tǒng)的CPE兩種方法進行檢測,同一組病毒樣品免疫酶技術(shù)測得的病毒感染性滴度略高于CPE法,直線回歸分析顯示兩種方法測得的結(jié)果之間存在直線關(guān)系(b=1.046,t=45.244,P<0.001),線性相關(guān)分析顯示兩種方法測得的結(jié)果呈...

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一部分:病毒滴度檢測方法的建立
    一.實驗材料和實驗方法
        (一).實驗材料
        (二).實驗方法
    二.結(jié)果與分析
第二部分:體外效力檢測方法的建立
    一.實驗材料和實驗方法
        (一).實驗材料
        (二).實驗方法
    二.結(jié)果與分析
第三部分:生物效價檢測方法的建立
    第一章:免疫小鼠
        一.實驗材料
        二.實驗方法
    第二章:體液免疫檢測方法的建立
        一.實驗材料和實驗方法
            (一).實驗材料
            (二).實驗方法
        二.結(jié)果與分析
            (一).BCA法測定Gag蛋白濃度
            (二).酶聯(lián)免疫吸附試驗測定免疫小鼠血清抗體滴度
    第三章:細胞免疫檢測方法的建立
        一.實驗材料和實驗方法
            (一).實驗材料
            (二).實驗方法
        二.結(jié)果與分析
討論
    一.免疫酶技術(shù)在ADMVA疫苗病毒感染性滴度檢測中的應用及其相關(guān)的影響因素
    二.ADMVA疫苗體外效力檢測的相關(guān)探討
    三.ADMVA疫苗免疫原性評價的初步研究
    四.問題與展望
總結(jié)
參考文獻
論文綜述
    參考文獻
致謝
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本文編號:4028268

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