本文關(guān)鍵詞：生物反應(yīng)器微載體規(guī)�；囵B(yǎng)輪狀病毒重配株LH9，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的利用Vero細(xì)胞生物反應(yīng)器微載體培養(yǎng)技術(shù)規(guī)�；囵B(yǎng)輪狀病毒重配株LH9(G4型)。方法用3 L生物反應(yīng)器,以4 g/L載體濃度培養(yǎng)Vero細(xì)胞,待細(xì)胞濃度達(dá)1.8×106個(gè)/ml時(shí),分別用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培養(yǎng)液,35℃連續(xù)培養(yǎng)21 d,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。分別按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接種輪狀病毒重配株LH9(G4),培養(yǎng)過(guò)程中每日取樣,檢測(cè)病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量。根據(jù)培養(yǎng)過(guò)程中葡萄糖、乳酸含量的變化,確定病毒培養(yǎng)過(guò)程中的收獲時(shí)間,優(yōu)化培養(yǎng)工藝。結(jié)果在反應(yīng)器中用含不同濃度胰酶的DMEM培養(yǎng)Vero細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)良好,與不含胰酶的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)的細(xì)胞無(wú)明顯差異;按0.05 MOI接種后的病毒收獲液滴度較高,可達(dá)7.0 lg CCID50/ml,且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng);通過(guò)對(duì)病毒培養(yǎng)液中葡萄糖、乳酸含量的監(jiān)測(cè),調(diào)整了培養(yǎng)過(guò)程中的收獲時(shí)間,收獲次數(shù)增加至4次,可收獲病毒液4個(gè)工作體積,病毒高峰滴度可達(dá)8.5 lg CCID50/ml。結(jié)論采用生物反應(yīng)器微載體系統(tǒng)培養(yǎng)輪狀病毒重配株LH9(G4),可顯著提高病毒滴度,通過(guò)對(duì)培養(yǎng)過(guò)程的優(yōu)化,增加了病毒收獲量,為進(jìn)一步規(guī)�；a(chǎn)輪狀病毒疫苗奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司第六研究室;
【關(guān)鍵詞】： 生物反應(yīng)器 微載體 輪狀病毒
【基金】：2014年甘肅省戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新支撐項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】：R373
【正文快照】： 人輪狀病毒(human rotavirus,HRV)是世界上引起5歲以下兒童重癥腹瀉的首位病原體[1-2],可引起持續(xù)多日的腹瀉和嘔吐,嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡,大部分患病兒童需要醫(yī)療干預(yù)或入院治療,但目前尚無(wú)特效的治療方法,且該病病程較長(zhǎng),給醫(yī)生和患者均造成了很大負(fù)擔(dān)。因此,開(kāi)發(fā)安全有效的疫苗

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本文編號(hào)：401467