發(fā)布時間：2017-05-28 00:06

  本文關鍵詞：生物反應器微載體規(guī)�；囵B(yǎng)輪狀病毒重配株LH9，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的利用Vero細胞生物反應器微載體培養(yǎng)技術規(guī)�；囵B(yǎng)輪狀病毒重配株LH9(G4型)。方法用3 L生物反應器,以4 g/L載體濃度培養(yǎng)Vero細胞,待細胞濃度達1.8×106個/ml時,分別用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培養(yǎng)液,35℃連續(xù)培養(yǎng)21 d,觀察細胞生長狀態(tài)。分別按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接種輪狀病毒重配株LH9(G4),培養(yǎng)過程中每日取樣,檢測病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量。根據(jù)培養(yǎng)過程中葡萄糖、乳酸含量的變化,確定病毒培養(yǎng)過程中的收獲時間,優(yōu)化培養(yǎng)工藝。結果在反應器中用含不同濃度胰酶的DMEM培養(yǎng)Vero細胞,細胞形態(tài)良好,與不含胰酶的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)的細胞無明顯差異;按0.05 MOI接種后的病毒收獲液滴度較高,可達7.0 lg CCID50/ml,且持續(xù)時間較長;通過對病毒培養(yǎng)液中葡萄糖、乳酸含量的監(jiān)測,調(diào)整了培養(yǎng)過程中的收獲時間,收獲次數(shù)增加至4次,可收獲病毒液4個工作體積,病毒高峰滴度可達8.5 lg CCID50/ml。結論采用生物反應器微載體系統(tǒng)培養(yǎng)輪狀病毒重配株LH9(G4),可顯著提高病毒滴度,通過對培養(yǎng)過程的優(yōu)化,增加了病毒收獲量,為進一步規(guī)�；a(chǎn)輪狀病毒疫苗奠定了基礎。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責任公司第六研究室;
【關鍵詞】： 生物反應器 微載體 輪狀病毒
【基金】：2014年甘肅省戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新支撐項目
【分類號】：R373
【正文快照】： 人輪狀病毒(human rotavirus,HRV)是世界上引起5歲以下兒童重癥腹瀉的首位病原體[1-2],可引起持續(xù)多日的腹瀉和嘔吐,嚴重者可導致死亡,大部分患病兒童需要醫(yī)療干預或入院治療,但目前尚無特效的治療方法,且該病病程較長,給醫(yī)生和患者均造成了很大負擔。因此,開發(fā)安全有效的疫苗

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本文編號：401467