本文關(guān)鍵詞：蒼白球HCN通道的雙向效應(yīng)及其機(jī)制初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：蒼白球(globus pallidus, GP)是基底神經(jīng)節(jié)間接通路的重要中繼核團(tuán),對(duì)機(jī)體正常和病理狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)功能起重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明超極化激活環(huán)核苷酸門控(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide gated, HCN)陽(yáng)離子通道在蒼白球自發(fā)起搏電活動(dòng)中發(fā)揮重要作用。形態(tài)學(xué)研究證實(shí)蒼白球有HCN通道表達(dá)。離體腦片膜片鉗研究揭示HCN通道參與調(diào)節(jié)蒼白球神經(jīng)元自發(fā)放電活動(dòng)。 目的：通過(guò)研究HCN通道阻斷劑ZD7288、CsCl及HCN通道激動(dòng)劑8-Br-cAMP對(duì)正常大鼠蒼白球神經(jīng)元的電生理效應(yīng),ZD7288對(duì)損毀丘腦底核(subthalamic nucleus, STN)模型大鼠蒼白球神經(jīng)元的電生理效應(yīng),以及ZD7288和8-Br-cAMP對(duì)氟哌啶醇僵直大鼠整體姿勢(shì)行為的影響,探討蒼白球HCN通道的雙向效應(yīng)及其機(jī)制。 方法：本實(shí)驗(yàn)采用多管微電極在體細(xì)胞外電生理記錄、6-OHDA帕金森病大鼠模型的制備、損毀STN模型大鼠的制備、套管埋置術(shù)以及免疫組織化學(xué)染色和尼氏染色等實(shí)驗(yàn)方法。 結(jié)果：1.在體電生理實(shí)驗(yàn)中,共記錄到40個(gè)正常大鼠蒼白球神經(jīng)元,有16個(gè)(40.0%)神經(jīng)元在微壓力注射0.05mM ZD7288后自發(fā)放電頻率由15.6±3.0Hz降低至5.5±1.2Hz,平均降低61.2±4.3%,與微壓力注射生理鹽水的對(duì)照組神經(jīng)元放電頻率變化相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。另外有18個(gè)(45.0%)神經(jīng)元可以被0.05mM ZD7288興奮,自發(fā)放電頻率由7.3±1.1Hz升高到14.7±2.1Hz,平均升高137.1±27.6%(P0.001)。2.在證常大鼠記錄到的25個(gè)蒼白球神經(jīng)元中,微壓力注射0.1mM8-Br-cAMP可以興奮其中的15個(gè)(60.0%)蒼白球神經(jīng)元,使自發(fā)放電頻率由15.9±1.8Hz升高到24.9±2.4Hz,平均升高63.0±9.3%(P0.001)。另外有7個(gè)(28.0%)蒼白球神經(jīng)元可以被0.1mM8-Br-cAMP抑制,自發(fā)放電頻率由21.5±4.1Hz降低至11.6±2.9Hz,平均降低51.7±9.4%(P0.01)。3.正常大鼠在體細(xì)胞外電生理實(shí)驗(yàn)中,微壓力注射1mM CsCl后,記錄到的18個(gè)蒼白球神經(jīng)元中7個(gè)(38.9%)產(chǎn)生抑制效應(yīng),自發(fā)放電頻率由16.8±4.9Hz降低至9.2±3.5Hz,平均降低52.4±5.8%(P0.01)；有8個(gè)(44.4%)產(chǎn)生興奮效應(yīng),自發(fā)放電頻率由21.3±2.1Hz升高至30.3±2.7Hz,平均升高44.5±10.3%(P0.01)。4.在損毀丘腦底核模型大鼠的在體細(xì)胞外電生理實(shí)驗(yàn)中,損毀側(cè)共記錄到30個(gè)蒼白球神經(jīng)元,其中13個(gè)(43.3%)神經(jīng)元呈高頻連續(xù)放電,15個(gè)(50.0%)神經(jīng)元呈高頻有間歇放電,2個(gè)(6.7%)神經(jīng)元呈低頻簇狀放電。與正常大鼠(共44個(gè)蒼白球神經(jīng)元,29個(gè)高頻連續(xù)放電,12個(gè)高頻有間歇放電,3個(gè)簇狀放電)相比,損毀STN模型大鼠放電模式中高頻連續(xù)放電的神經(jīng)元百分比顯著減少,高頻有間歇放電神經(jīng)元百分比顯著增多(χ2=4.13,d.f.=1,P0.05)；而低頻簇狀放電神經(jīng)元百分比差異無(wú)顯著性(χ2=3.35,d.f.=2,P0.05)。5.單側(cè)損毀丘腦底核模型大鼠在體細(xì)胞外電生理實(shí)驗(yàn)中,微壓力注射0.05mM ZD7288后,損毀側(cè)記錄到的30個(gè)蒼白球神經(jīng)元中有15個(gè)(50.0%)產(chǎn)生抑制效應(yīng),自發(fā)放電頻率由11.7±2.3Hz降低至5.6±1.9Hz,平均降低60.5±5.7%(P0.001)；有12個(gè)(40.0%)蒼白球神經(jīng)元產(chǎn)生興奮效應(yīng),自發(fā)放電頻率由6.7±1.6Hz升高至15.7±3.7Hz,平均升高219.2±46.3%(P0.01)。另外,損毀對(duì)側(cè)記錄到的25個(gè)蒼白球神經(jīng)元中,微壓力注射0.05mM ZD7288后,有13個(gè)(52.0%)產(chǎn)生抑制效應(yīng),自發(fā)放電頻率由14.8±3.2Hz降低至9.1±2.0Hz,平均降低43.0±5.1%(P0.01)；還有11個(gè)(44.0%)蒼白球神經(jīng)元產(chǎn)生興奮效應(yīng),自發(fā)放電頻率由6.5±1.6Hz升高至12.8±2.7Hz,平均升高133.2±32.3%(P0.01)。ZD7288對(duì)損毀丘腦底核模型大鼠損毀側(cè)與損毀對(duì)側(cè)蒼白球神經(jīng)元放電頻率的抑制效應(yīng)相比,損毀側(cè)的抑制效應(yīng)更強(qiáng)(P0.01)。6.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中,大鼠進(jìn)行單側(cè)蒼白球微量注射ZD7288或8-Br-cAMP均可使帕金森病僵直模型大鼠出現(xiàn)同側(cè)或?qū)?cè)偏轉(zhuǎn)行為。在注射ZD7288的實(shí)驗(yàn)組,11只大鼠中有9只表現(xiàn)為對(duì)側(cè)偏轉(zhuǎn)行為,與注射生理鹽水的對(duì)照組相比有顯著差異(u=57.500,P0.001)；另外2只表現(xiàn)為同側(cè)偏轉(zhuǎn)行為。在注射8-Br-cAMP的實(shí)驗(yàn)組,7只大鼠中有4只表現(xiàn)為對(duì)側(cè)偏轉(zhuǎn)行為,3只表現(xiàn)為同側(cè)偏轉(zhuǎn)行為,與對(duì)照組比均有顯著差異(u=92.000、62.500,P0.001)。7.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示正常及帕金森病模型大鼠蒼白球神經(jīng)元均表達(dá)HCN3通道。 結(jié)論：在體細(xì)胞外電生理實(shí)驗(yàn)顯示HCN通道阻斷劑ZD7288、CsCl和HCN通道激動(dòng)劑8-Br-cAMP作用于大鼠蒼白球神經(jīng)元,可以產(chǎn)生放電頻率降低或升高的雙向效應(yīng)。損毀丘腦底核后,ZD7288依然可以產(chǎn)生放電頻率降低或升高的雙向效應(yīng)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示單側(cè)蒼白球微量注射ZD7288和8-Br-cAMP均能使氟哌啶醇帕金森病僵直大鼠出現(xiàn)同側(cè)或?qū)?cè)偏轉(zhuǎn)行為,與電生理實(shí)驗(yàn)的雙向效應(yīng)結(jié)果相一致。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步探討蒼白球HCN通道的生物學(xué)效應(yīng)提供了一定的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：蒼白球 HCN通道 帕金森病 細(xì)胞外電生理記錄
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R338
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-9
• 引言9-11
• 第一章 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 1.2 藥品及配制11-12
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器12-13
• 第二章 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目及方法13-17
• 2.1 電生理學(xué)方法13-14
• 2.2 組織學(xué)檢查14
• 2.3 模型大鼠制備14-15
• 2.4 形態(tài)學(xué)方法15
• 2.5 行為學(xué)方法15-16
• 2.6 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目16
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析16-17
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-24
• 3.1 ZD7288對(duì)正常大鼠蒼白球神經(jīng)元放電的影響17-18
• 3.2 8-Br-cAMP對(duì)正常大鼠蒼白球神經(jīng)元放電的影響18-19
• 3.3 CsCl對(duì)正常大鼠蒼白球神經(jīng)元放電的影響19-20
• 3.4 ZD7288對(duì)損毀丘腦底核模型大鼠蒼白球神經(jīng)元放電的影響20-23
• 3.5 蒼白球微量注射ZD7288和8-Br-cAMP對(duì)氟哌啶醇僵直大鼠偏轉(zhuǎn)行為的影響23
• 3.6 正常和6-OHDA帕金森病模型大鼠蒼白球HCN通道的表達(dá)23-24
• 第四章 討論24-27
• 4.1 HCN通道阻斷劑及激動(dòng)劑對(duì)蒼白球神經(jīng)元放電的雙向效應(yīng)24-25
• 4.2 ZD7288對(duì)損毀丘腦底核模型大鼠蒼白球神經(jīng)元放電的影響25
• 4.3 HCN通道在正常及6-OHDA帕金森病模型大鼠蒼白球神經(jīng)元的表達(dá)25
• 4.4 蒼白球內(nèi)微量注射ZD7288和8-Br-cAMP對(duì)大鼠姿勢(shì)行為的影響25-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 附圖30-54
• 綜述54-68
• 綜述參考文獻(xiàn)63-68
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果68-69
• 英文縮略詞表69-70
• 致謝70-71

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Judith A.Strong;;Recent evidence for activity-dependent initiation of sympathetic sprouting and neuropathic pain[J];生理學(xué)報(bào);2008年05期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 蔣偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為具有起搏功能的心肌樣細(xì)胞[D];鄭州大學(xué);2010年

2 徐蓉;大鼠蒼白球HCN通道的電生理學(xué)和行為學(xué)研究[D];青島大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：蒼白球HCN通道的雙向效應(yīng)及其機(jī)制初探，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：399763