第一部分股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管生長(zhǎng)及血管VE-cadherin表達(dá)和通透性變化 目的：研究細(xì)胞粘附連接中的重要分子—血管內(nèi)皮鈣粘蛋白(vascular endothelial-cadherin, VE-cadherin)表達(dá)和血管通透性在大鼠股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管生長(zhǎng)過(guò)程中的改變情況,探討VE-cadherin表達(dá)、通透性變化對(duì)側(cè)支血管生長(zhǎng)的影響,豐富側(cè)支血管生長(zhǎng)機(jī)制中的炎癥形成理論。 方法：成年Sprague-Dawley (SD)大鼠45只,分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組和股動(dòng)脈結(jié)扎組。股動(dòng)脈結(jié)扎組大鼠行股動(dòng)脈結(jié)扎以誘導(dǎo)側(cè)支血管生長(zhǎng)。存活1周和4周,采用明膠-四氧化三鉛血管造影、蘇木素-伊紅(Hematoxylin-eosin staining, H.E.)染色和共聚焦免疫熒光組織化學(xué)等方法,觀察大鼠股動(dòng)脈結(jié)扎后的側(cè)支血管生長(zhǎng)的情況和VE-cadherin表達(dá)變化,并用伊文思藍(lán)(Evance blue, EB)通透性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血管通透性變化。 結(jié)果：股動(dòng)脈結(jié)扎組動(dòng)物存活1周后,可見(jiàn)側(cè)支血管呈網(wǎng)狀分布,與假手術(shù)組比較,側(cè)支血管數(shù)目和管腔面積均增加；Ki67(細(xì)胞增殖標(biāo)志物)表達(dá)增加,血管...

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
1 緒論
2 股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管生長(zhǎng)、VE-cadherin表達(dá)和通透性變化
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試劑及設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及動(dòng)物模型
        2.1.3 取材、保存與切片
        2.1.4 血管造影
        2.1.5 H.E.染色
        2.1.6 VE-cadherin、Ki67的免疫熒光組織化學(xué)染色
        2.1.7 血管通透性實(shí)驗(yàn)
        2.1.8 結(jié)果觀察
        2.1.9 數(shù)據(jù)分析
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 血管造影結(jié)果
        2.2.2 H.E.染色結(jié)果
        2.2.3 股動(dòng)脈結(jié)扎后誘導(dǎo)的側(cè)支血管的增殖情況
        2.2.4 股動(dòng)脈結(jié)扎后誘導(dǎo)的側(cè)支血管VE-cadherin表達(dá)的變化
        2.2.5 股動(dòng)脈結(jié)扎后誘導(dǎo)的側(cè)支血管通透性的變化
    2.3 討論
        2.3.1 股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管生長(zhǎng)
        2.3.2 股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管生長(zhǎng)過(guò)程中VE-cadherin表達(dá)和通透性變化
3 NO/NOS對(duì)側(cè)支血管生長(zhǎng)過(guò)程中VE-cadherin表達(dá)和通透性的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試劑及設(shè)備
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及動(dòng)物模型
        3.1.3 血管通透性實(shí)驗(yàn)
        3.1.4 取材與切片
        3.1.5 VE-cadherin、eNOS、iNOS、Ki67、CD11b、CD31的免疫熒光組織化學(xué)染色
        3.1.6 結(jié)果觀察
        3.1.7 數(shù)據(jù)分析
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 NO供體和NOS抑制劑對(duì)側(cè)支血管增殖的影響
        3.2.2 NO供體和NOS抑制劑對(duì)側(cè)支血管炎癥的影響
        3.2.3 NOS抑制劑對(duì)側(cè)支血管eNOS、iNOS的影響
        3.2.4 NO供體和NOS抑制劑對(duì)側(cè)支血管VE-cadherin的影響
        3.2.5 NO供體和NOS抑制劑對(duì)血管通透性的影響
        附圖
    3.3 討論
        3.3.1 NOS在股動(dòng)脈結(jié)扎誘導(dǎo)的側(cè)支血管中的表達(dá)
        3.3.2 NO/NOS對(duì)側(cè)支血管VE-cadherin表達(dá)、通透性的影響
        3.3.3 NO/NOS—VE-cadherin—通透性通路在側(cè)支血管生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)的影響
4 NO/NOS對(duì)體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞VE-cadherin的表達(dá)、細(xì)胞增殖和通透性的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑、材料和設(shè)備
        4.1.2 細(xì)胞傳代培養(yǎng)及鑒定
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)分組及處理
        4.1.4 NO產(chǎn)物濃度的測(cè)定
        4.1.5 體外HUVEC細(xì)胞通透性實(shí)驗(yàn)
        4.1.6 MTT比色法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響
        4.1.7 HUVEC細(xì)胞CD31、VE-cadherin、eNOS、和Ki67的免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色
        4.1.8 Western Blot檢測(cè)HUVEC細(xì)胞VE-cadherin、eNOS的表達(dá)
        4.1.9 數(shù)據(jù)收集
        4.1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 傳代的HUVEC細(xì)胞形態(tài)和鑒定結(jié)果
        4.2.2 NO產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果
        4.2.3 DETA NONOate和L-NAME對(duì)HUVEC細(xì)胞通透性的影響
        4.2.4 MTT比色法檢測(cè)HUVEC細(xì)胞的活性結(jié)果
        4.2.5 DETA NONOate和L-NAME對(duì)HUVEC細(xì)胞Ki67表達(dá)的影響
        4.2.6 L-NAME抑制HUVEC細(xì)胞eNOS表達(dá)
        4.2.7 DETA NONOate、L-NAME對(duì)HUVEC細(xì)胞VE-cadherin表達(dá)的影響
        附圖
    4.3 討論
        4.3.1 NO/NOS對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞VE-cadherin表達(dá)的影響
        4.3.2 NO/NOS對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間主要的研究成果目錄
致謝



本文編號(hào)：3978989