本文關(guān)鍵詞：二氮嗪介導(dǎo)的深低溫低流量小鼠模型腦保護(hù)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分不同濃度二氮嗪對深低溫低流量小鼠模型的腦保護(hù)作用 目的觀察不同濃度二氮嗪對深低溫低流量腦缺血再灌注小鼠模型的腦保護(hù)作用及初步分析二氮嗪發(fā)揮腦保護(hù)作用的機(jī)制。 方法將240只3周齡的C57BL/6健康小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham)、模型組(modell)、二氮嗪組(diazoxide)(2、5、10mg/kg)組、二氮嗪+渥曼青霉素組(diazoxide+wortmannin)(diazoxide,2、5、10mg/kg)共八組,每組30只。每組再平均分為再灌注2h、24h、72h3個(gè)亞組,每個(gè)亞組再平分為蛋白質(zhì)組和腦組織大體標(biāo)本組,最小組以5只為單位。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求建立深低溫低流量動物模型,于再灌注不同時(shí)間點(diǎn)取小鼠腦組織。應(yīng)用western blot技術(shù)分別檢測各組腦組織中總akt、p-aktl的表達(dá)變化及對各組腦組織進(jìn)行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,觀察腦組織損傷程度。 結(jié)果再灌注24h和72h二氮嗪組p-aktl與其他組比較表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；再灌注24h和72h二氮嗪2mg/kg組與其他二氮嗪組比較表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。TTC染色結(jié)果顯示再灌注24h和72h二氮嗪組與model組、sham組比較腦損傷減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；再灌注24h和72h二氮嗪2mg/kg組與其他二氮嗪組比較腦損傷減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(p0.05)。 結(jié)論二氮嗪對深低溫低流量小鼠模型有腦保護(hù)作用,其發(fā)揮作用的機(jī)制可能是通過激活PI3K/Akt信號通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)Akt下游效應(yīng)分子而實(shí)現(xiàn)的。二氮嗪的三個(gè)濃度,即2、5、10mg/kg,其中2mg/kg組對深低溫低流量小鼠模型的腦保護(hù)作用更加明顯。 第二部分二氮嗪介導(dǎo)的深低溫低流量小鼠模型的腦保護(hù)作用及機(jī)制 目的探討二氮嗪對深低溫低流量小鼠模型的腦保護(hù)作用及分析其發(fā)揮作用的機(jī)制。 方法將270只3周齡C57BL/6健康小鼠根據(jù)基因型分為野生型(wt)、akt1基因敲除型、akt2基因敲除型三組,每組再分為假手術(shù)組(sham)、模型組(model)和二氮嗪組(diazoxide, dz),共9小組,每小組各30只。model組和dz組根據(jù)要求建立深低溫低流量動物模型,而sham組除了不阻斷雙側(cè)頸總動脈之外,其余操作同model組。各組均于再灌注2h、24h、72h取小鼠腦組織。應(yīng)用western blot技術(shù)分別檢測各組腦組織中總akt、akt1、akt3、p-akt1、p-gsk-3β蛋白的表達(dá)變化；應(yīng)用Real Time PCR方法檢測Akt1mRNA、Akt2mRNA和Akt3mRNA的變化及對各組腦組織進(jìn)行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,觀察腦組織損傷的情況。 結(jié)果在sham組、model組、dz組中,再灌注24h和72h akt1基因敲除組p-akt1、 p-gsk-3β蛋白表達(dá)低于wt組和akt2基因敲除組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),而akt2基因敲除組與wt組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),各基因型中dz組高于model組,model組高于sham組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。在sham組、model組、dz組中,再灌注24h和72h aktl基因敲除組與akt2基因敲除組、wt組相比腦損傷加重,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),akt2基因敲除和wt組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),各基因型中model組重于dz組,dz組重于sham組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。再灌注后的三個(gè)時(shí)間段各基因型中Akt1mRNA的表達(dá)model組高于sham組,dz組高于model組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；Akt2mRNA的表達(dá)各基因型中sham、model、dz組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.05)。Akt3mRNA的表達(dá)各基因型中model組高于sham組,dz組高于model組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),而三種基因型中,sham組之間、model組之間、dz組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 結(jié)論二氮嗪對深低溫低流量小鼠模型有腦保護(hù)作用,其發(fā)揮作用的機(jī)制可能是通過激活P13K/Akt信號通路,活化aktl蛋白,進(jìn)而調(diào)節(jié)Akt下游蛋白糖原合成激酶-3β的磷酸化水平而實(shí)現(xiàn)的。二氮嗪可能使得Aktl mRNA和Akt3mRNA表達(dá)增高,進(jìn)一步調(diào)節(jié)p-aktl和p-gsk-3β蛋白表達(dá)增高的。在深低溫低流量的過程中,Akt2mRNA的變化不明顯,可能Akt2mRNA沒有參與二氮嗪的腦保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：二氮嗪 深低溫低流量 腦缺血/再灌注損傷 PI3K/Akt信號通路 二氮嗪 深低溫低流量 腦缺血/再灌注損傷 糖原合成激酶-3β PI3K/Akt信號通路
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R965;R-332
【目錄】：

• 目錄4-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-15
• 第一部分 不同濃度二氮嗪對深低溫低流量小鼠模型的腦保護(hù)作用15-32
• 前言15
• 材料與方法15-22
• 結(jié)果22-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 第二部分 二氮嗪介導(dǎo)的深低溫低流量小鼠模型腦保護(hù)作用及機(jī)制32-57
• 前言32
• 材料與方法32-42
• 結(jié)果42-49
• 討論49-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-57
• 綜述57-70
• 參考文獻(xiàn)65-70
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況70-71
• 致謝71-72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 CukSeong KIM,Jin Bong PARK,Kwang-Jin KIM,Seok Jong CHANG,Sung-Woo RYOO,Byeong Hwa JEON;Effect of Korea red ginseng on cerebral blood flow and superoxide production[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年12期

  本文關(guān)鍵詞：二氮嗪介導(dǎo)的深低溫低流量小鼠模型腦保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：393987