近年來(lái)，癌癥已成為全球最大致死原因。嚴(yán)峻的形勢(shì)使得癌癥的防治刻不容緩。目前，隨著生物及醫(yī)學(xué)研究技術(shù)的發(fā)展，腫瘤免疫治療逐漸被廣泛用于癌癥的臨床治療。而腫瘤疫苗是腫瘤免疫療法的研究熱點(diǎn)之一，現(xiàn)在所研發(fā)的疫苗以治療型居多。其中多肽疫苗作為治療型腫瘤疫苗，具有高特異性、易于人工合成，使其在抗腫瘤研究中受到愈多的關(guān)注。多肽疫苗的設(shè)計(jì)核心是T細(xì)胞表位，其鑒定和改造是多肽疫苗發(fā)展及應(yīng)用的基礎(chǔ)。 目的 本課題的研究目的是預(yù)測(cè)、篩選及鑒定來(lái)源于癌/睪丸抗原CTNNA2的HLA-A2限制性的CD8+CTL表位。同時(shí)對(duì)4位是絲氨酸的表位，嘗試磷酸化修飾，即在此位引入磷酸化的絲氨酸，并探討對(duì)表位免疫原性的影響。 方法 首先，我們通過(guò)使用免費(fèi)在線預(yù)測(cè)工具BIMAS、NetCTL1.2及SYFPEITHI進(jìn)行預(yù)測(cè)，得到CTNNA2來(lái)源的HLA-A2限制性CTL表位，同時(shí)嘗試磷酸化的引入。然后，將預(yù)測(cè)得到的9肽序列，經(jīng)固相Fmoc法合成，RP-HPLC色譜法純化，質(zhì)譜儀分析得到候選肽的分子量。其次，使用T2細(xì)胞，通過(guò)親和力測(cè)定及復(fù)合物穩(wěn)定性分析，對(duì)所有的CTNNA2候選表位進(jìn)行篩選。RT-PCR分析腫瘤細(xì)胞中CT...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1P129質(zhì)譜圖

圖3.2P138質(zhì)譜圖

圖3.3P148質(zhì)譜圖

圖3.4P279質(zhì)譜圖

本文編號(hào)：3933857