發(fā)布時間：2024-03-05 20:43

　　第一部分Dnmt3a通過影響IRF3磷酸化促進(jìn)TLR和RIG-Ⅰ誘導(dǎo)的Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生巨噬細(xì)胞作為天然免疫的重要組成部分發(fā)揮著重要的免疫防御功能。在巨噬細(xì)胞發(fā)育、分化的不同階段,轉(zhuǎn)錄因子和靶基因表達(dá)譜和表達(dá)水平均發(fā)生著改變。那么在此過程中,表觀調(diào)控機制究竟起到了什么樣的作用呢?Dnmt3a作為DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶,它可以對基因組中的CpG島中的C進(jìn)行從頭甲基化。在胚胎發(fā)育的不同階段、細(xì)胞的不同分化階段及不同組織的腫瘤細(xì)胞中,Dnmt3a則可以選擇性的引起不同靶基因甲基化狀態(tài)的改變,從而發(fā)揮對靶基因的表觀調(diào)控。為了探討Dnmt3a在腹腔巨噬細(xì)胞中的作用,我們首先在腹腔巨噬細(xì)胞中利用RNA干擾技術(shù)下調(diào)內(nèi)源性Dnmt3a的表達(dá),通過RT-qPCR和ELISA的方法檢測腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的mRNA和蛋白水平,發(fā)現(xiàn)在腹腔巨噬細(xì)胞中干擾Dnmt3a可以選擇性地抑制TLR和RIG-Ⅰ誘導(dǎo)的Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生。我們獲得了巨噬細(xì)胞Dnmt3a條件性敲除小鼠,通過細(xì)胞計數(shù)和FACS的方法對Dnmt3a條件性敲除小鼠來源的腹腔巨噬細(xì)胞進(jìn)行了表型分析,發(fā)現(xiàn)Dnmt3a條件性敲除小鼠來源的腹腔巨噬細(xì)胞數(shù)目及表...

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
序言
中文摘要
Abstract
縮略詞表
第一部分 Dnmt3a通過影響IRF3磷酸化促進(jìn)TLR和RIG-Ⅰ誘導(dǎo)的Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 Dnmt3a的組織、細(xì)胞表達(dá)水平檢測分析
        3.2 干擾Dnmt3a的表達(dá)能夠抑制Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生
        3.3 巨噬細(xì)胞中條件性敲除Dnmt3a小鼠的鑒定
        3.4 巨噬細(xì)胞中條件性敲除Dnmt3a能夠下調(diào)Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生
        3.5 沉默Dnmt3a的表達(dá)抑制巨噬細(xì)胞IRF3磷酸化
        3.6 Dnmt3a條件性敲除小鼠抗病毒感染能力減弱
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 Dnmt3a通過HDAC9介導(dǎo)的TBK1去乙�；源龠M(jìn)Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 干擾Dnmt3a的表達(dá)能夠抑制巨噬細(xì)胞HDAC9的表達(dá)
        3.2 HDAC9主要定位于細(xì)胞胞漿
        3.3 干擾HDAC9的表達(dá)能夠抑制Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生和IRF3磷酸化
        3.4 HDAC9可以與TBK1相互作用
        3.5 TBK1存在乙�；揎�
        3.6 HDAC9可以調(diào)控TBK1的激酶活性
        3.7 TBK1乙�；稽c的確認(rèn)
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 Dnmt3a通過影響HDAC9遠(yuǎn)端啟動子區(qū)H3K27me3水平以調(diào)控HDAC9的表達(dá)
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 巨噬細(xì)胞中條件性敲除Dnmt3a抑制HDAC9遠(yuǎn)端啟動子區(qū)DNA甲基化水平
        3.2 Dnmt3a能夠抑制HDAC9遠(yuǎn)端啟動子區(qū)H3K27me3水平
    4 討論
    5 結(jié)論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶及其功能的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷



本文編號：3920016