本文關(guān)鍵詞：模擬人體三維環(huán)境下微觀溝槽結(jié)構(gòu)對細胞取向性生長的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 模擬生物體內(nèi)環(huán)境，在體外建立一個穩(wěn)定的細胞反應(yīng)器，探討微米拓撲結(jié)構(gòu)以及三維環(huán)境對細胞取向性生長的影響。 方法： 利用熱模壓印技術(shù)制備寬度分別為12.5μm、25μm、50μm、75μm具有拓撲結(jié)構(gòu)的聚二甲基硅氧烷（Polydimethylsiloxane，PDMS）以及光滑的PDMS，分為實驗組及對照組Ⅴ組（光滑），實驗組又分為Ⅰ組（12.5μm）、Ⅱ組（25μm）、Ⅲ組（50μm）及Ⅳ組（75μm）共四個亞組。利用從大鼠尾部提取的纖維蛋白原制成水凝膠來模擬生物體內(nèi)環(huán)境，將成纖維細胞（human dermal fibroblasts，HDFs）和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(brain glioma cells，BGCs)分別按四種實驗方式培養(yǎng)，觀察各組細胞1w內(nèi)的延伸、取向排列以及分布情況。選擇PDMS上、PDMS上方0～30μm范圍內(nèi)以及PDMS上方200～300μm纖維蛋白水凝膠中各5個視野，測量每個細胞長軸與水平線夾角α角度值，分為0～30°、31～60°以及61～90°三個等級，計數(shù)各等級的比例情況，統(tǒng)計學(xué)分析計數(shù)結(jié)果。 結(jié)果： PDMS上，，4種方式中實驗組細胞絕大多數(shù)沿著溝槽方向取向性延伸、排列，大多數(shù)α角分布在0～30°的范圍，與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。亞組中，Ⅰ和Ⅱ組這一取向性較Ⅲ及Ⅳ組更明顯。PDMS上方0～30μm，只有實驗2的實驗組細胞呈現(xiàn)0～30°的傾向性生長, α角分布在0～30°的HDFs百分比值分別為Ⅰ組74.66±4.52、Ⅱ組81.32±5.54、Ⅲ組76.88±5.78、Ⅳ組68.91±4.79、Ⅴ組37.09±13.78，實驗各組明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。亞組間這一差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。PDMS上方200～300μm，各組均無明顯生長取向性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： ①模擬生物內(nèi)環(huán)境在體外可以成功建立穩(wěn)定的細胞反應(yīng)器。②在PDMS表面，三維環(huán)境與二維環(huán)境具有相同的調(diào)控能力，微米級溝槽結(jié)構(gòu)均可促進細胞沿溝槽水平生長排列。③在表面具有微米級溝槽結(jié)構(gòu)的PDMS上，細胞水平排列的效率與溝槽寬度之間存在密切聯(lián)系，溝槽越寬取向性排列效率越低。④三維環(huán)境中，細胞離開微觀幾何圖案后，一定距離上仍受其影響，距離越遠取向性影響越弱。
【關(guān)鍵詞】：拓撲 溝槽 細胞行為 取向性 聚二甲基硅氧烷
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-17
• 1.1 材料12-14
• 1.1.1 實驗細胞12
• 1.1.2 具有表面溝槽結(jié)構(gòu)的金屬基底12
• 1.1.3 主要實驗儀器12-13
• 1.1.4 主要實驗試劑及常用試劑配制方法13-14
• 1.2 試驗方法14-16
• 1.2.1 微納米溝槽結(jié)構(gòu) PDMS 的制備14
• 1.2.2 細胞培養(yǎng)14
• 1.2.3 體外細胞試驗14-15
• 1.2.4 免疫染色15
• 1.2.5 顯微鏡觀察15-16
• 1.2.6 觀察指標16
• 1.3 統(tǒng)計學(xué)分析16-17
• 結(jié)果17-25
• 1 微納米拓撲結(jié)構(gòu)的表征17
• 2 組織學(xué)觀察17-21
• 3 細胞長軸與水平線夾角α角21-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻29-33
• 綜述33-51
• 參考文獻41-51
• 中英文對照縮略詞表51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文及科研成果52-53
• 致謝53-54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 周峰;袁琳;梅巖;陳紅;;“接觸引導(dǎo)”和重力場復(fù)合作用對L929細胞生長取向的影響[J];科學(xué)通報;2010年26期

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  本文關(guān)鍵詞：模擬人體三維環(huán)境下微觀溝槽結(jié)構(gòu)對細胞取向性生長的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：390307