本文關(guān)鍵詞：模擬人體三維環(huán)境下微觀溝槽結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞取向性生長(zhǎng)的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 模擬生物體內(nèi)環(huán)境，在體外建立一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞反應(yīng)器，探討微米拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)以及三維環(huán)境對(duì)細(xì)胞取向性生長(zhǎng)的影響。 方法： 利用熱模壓印技術(shù)制備寬度分別為12.5μm、25μm、50μm、75μm具有拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的聚二甲基硅氧烷（Polydimethylsiloxane，PDMS）以及光滑的PDMS，分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組Ⅴ組（光滑），實(shí)驗(yàn)組又分為Ⅰ組（12.5μm）、Ⅱ組（25μm）、Ⅲ組（50μm）及Ⅳ組（75μm）共四個(gè)亞組。利用從大鼠尾部提取的纖維蛋白原制成水凝膠來(lái)模擬生物體內(nèi)環(huán)境，將成纖維細(xì)胞（human dermal fibroblasts，HDFs）和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(brain glioma cells，BGCs)分別按四種實(shí)驗(yàn)方式培養(yǎng)，觀察各組細(xì)胞1w內(nèi)的延伸、取向排列以及分布情況。選擇PDMS上、PDMS上方0～30μm范圍內(nèi)以及PDMS上方200～300μm纖維蛋白水凝膠中各5個(gè)視野，測(cè)量每個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)軸與水平線(xiàn)夾角α角度值，分為0～30°、31～60°以及61～90°三個(gè)等級(jí)，計(jì)數(shù)各等級(jí)的比例情況，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析計(jì)數(shù)結(jié)果。 結(jié)果： PDMS上，，4種方式中實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞絕大多數(shù)沿著溝槽方向取向性延伸、排列，大多數(shù)α角分布在0～30°的范圍，與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。亞組中，Ⅰ和Ⅱ組這一取向性較Ⅲ及Ⅳ組更明顯。PDMS上方0～30μm，只有實(shí)驗(yàn)2的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞呈現(xiàn)0～30°的傾向性生長(zhǎng), α角分布在0～30°的HDFs百分比值分別為Ⅰ組74.66±4.52、Ⅱ組81.32±5.54、Ⅲ組76.88±5.78、Ⅳ組68.91±4.79、Ⅴ組37.09±13.78，實(shí)驗(yàn)各組明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。亞組間這一差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。PDMS上方200～300μm，各組均無(wú)明顯生長(zhǎng)取向性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： ①模擬生物內(nèi)環(huán)境在體外可以成功建立穩(wěn)定的細(xì)胞反應(yīng)器。②在PDMS表面，三維環(huán)境與二維環(huán)境具有相同的調(diào)控能力，微米級(jí)溝槽結(jié)構(gòu)均可促進(jìn)細(xì)胞沿溝槽水平生長(zhǎng)排列。③在表面具有微米級(jí)溝槽結(jié)構(gòu)的PDMS上，細(xì)胞水平排列的效率與溝槽寬度之間存在密切聯(lián)系，溝槽越寬取向性排列效率越低。④三維環(huán)境中，細(xì)胞離開(kāi)微觀幾何圖案后，一定距離上仍受其影響，距離越遠(yuǎn)取向性影響越弱。
【關(guān)鍵詞】：拓?fù)?/strong> 溝槽 細(xì)胞行為 取向性 聚二甲基硅氧烷
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-17
• 1.1 材料12-14
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞12
• 1.1.2 具有表面溝槽結(jié)構(gòu)的金屬基底12
• 1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器12-13
• 1.1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑及常用試劑配制方法13-14
• 1.2 試驗(yàn)方法14-16
• 1.2.1 微納米溝槽結(jié)構(gòu) PDMS 的制備14
• 1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)14
• 1.2.3 體外細(xì)胞試驗(yàn)14-15
• 1.2.4 免疫染色15
• 1.2.5 顯微鏡觀察15-16
• 1.2.6 觀察指標(biāo)16
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析16-17
• 結(jié)果17-25
• 1 微納米拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的表征17
• 2 組織學(xué)觀察17-21
• 3 細(xì)胞長(zhǎng)軸與水平線(xiàn)夾角α角21-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 綜述33-51
• 參考文獻(xiàn)41-51
• 中英文對(duì)照縮略詞表51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文及科研成果52-53
• 致謝53-54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 宋巍;陳紅;;蛋白質(zhì)在納米拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)材料表面的吸附[J];科學(xué)通報(bào);2007年23期

2 周峰;袁琳;梅巖;陳紅;;“接觸引導(dǎo)”和重力場(chǎng)復(fù)合作用對(duì)L929細(xì)胞生長(zhǎng)取向的影響[J];科學(xué)通報(bào);2010年26期

3 彭榮;丁建東;;表面微納米結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞的影響[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年01期

  本文關(guān)鍵詞：模擬人體三維環(huán)境下微觀溝槽結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞取向性生長(zhǎng)的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：390307

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