VEGF183為VEGF-A基因一個(gè)拼接異構(gòu)體,因其蛋白序列與VEGF189高度同源,導(dǎo)致其功能研究被忽視,所以目前VEGF183功能仍需進(jìn)一步研究。本研究通過畢赤酵母表達(dá)并用瓊脂糖肝素親和層析方法獲得重組人VEGF183蛋白,MTT法研究VEGF183蛋白在體外對HUVEC增殖刺激能力,并分別與VEGF165、VEGF189的相應(yīng)活性作對比。Transwell與劃痕實(shí)驗(yàn)分別研究其對HUVEC的遷移能力,Miles assay研究其對大鼠血管通透能力,并與VEGF189的相應(yīng)活性作對比。結(jié)果發(fā)現(xiàn),VEGF183仍保留對HUVEC增殖和遷移的刺激能力,但弱于VEGF165,強(qiáng)于VEGF189。此外,VEGF183擁有強(qiáng)于VEGF189的刺激血管通透能力。本研究結(jié)果提示VEGF183可能為實(shí)現(xiàn)血管生成過程中精確調(diào)控的一個(gè)異構(gòu)體。

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【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 純化蛋白VEGF183的SDS-PAGE和Western blotting鑒定
    1.2 VEGF183蛋白可增加血管的通透性
    1.3 VEGF183純化蛋白及VEGF165、VEGF189促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用
    1.4 Transwell實(shí)驗(yàn)
2 討論
3 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 pPIC9K-VEGF183重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    3.3 pPIC9K-VEGF183高拷貝酵母表達(dá)克隆的篩選
    3.4 VEGF183蛋白的表達(dá)與純化
    3.5 血管通透性實(shí)驗(yàn)
    3.6 MTT實(shí)驗(yàn)
    3.7 Transwell實(shí)驗(yàn)



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