目的探討硫酸脫氫表雄酮(DHEA-S)對3T3-L1前脂肪細(xì)胞株分化的影響及可能的分子機制。方法以3T3-L1細(xì)胞株為研究對象,先觀察不同時間點不同劑量的DHEA-S對3T3-L1細(xì)胞活力的影響,確定合適的干預(yù)濃度。3T3-L1細(xì)胞分為DMSO組(對照組)和DHEA-S組,觀察DHEA-S對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響。通過測定甘油醛3-磷酸脫氫酶(G3PDH)活性和用油紅O染色計算的脂肪細(xì)胞分化率,評估脂肪細(xì)胞分化的變化;用real time-PCR法觀察誘導(dǎo)前(第0天)和誘導(dǎo)后不同時間點(第1,2,4,6,10,14天)目的基因過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPARγ)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP1-c)、CCAAT增強子結(jié)合蛋白家族(C/EBPs)、11β-羥類固醇脫氫酶1(11HSDB1)、激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂蛋白酯酶(LPL) mRNA表達的變化。結(jié)果 MTT實驗結(jié)果顯示DHEA-S在50μmol/L時對細(xì)胞活力影響<30%,對后續(xù)的干預(yù)影響較小。分化后第4天對照組和DHEA-S組的G3PDH活性分別為(380. 83±28. 43) nmo...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化
    1.3 real time-PCR檢測3T3-L1細(xì)胞mRNA的表達
    1.4 前脂肪細(xì)胞分化和分化率的測定
    1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 獲取DHEA-S的最佳干預(yù)濃度
    2.2 油紅O染色觀察誘導(dǎo)后不同時間點3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)脂滴沉積的變化
    2.3 脂肪細(xì)胞分化率的比較
    2.4 細(xì)胞的G3PDH活性檢測
    2.5 目的基因在不同分化時間點的水平變化
3 討論



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