肝病是威脅我國人民健康的重大疾病之一,其患病率和致死率均很高。肝損傷動物模型在肝病致病機(jī)理研究及藥物研發(fā)中非常重要。肝病種類很多,但大多會引起肝臟炎癥,最終導(dǎo)致不同程度的肝損傷。四氯化碳是常見的制作肝損傷動物模型的化學(xué)藥物,由于于其成模率高、重復(fù)性好,四氯化碳急、慢性肝損傷模型在研究肝臟疾病中得以廣泛應(yīng)用。然而四氯化碳對人體危害大,因此探尋對人危害性小、安全性高的化合物來制作肝損傷動物模型非常迫切需要。研究發(fā)現(xiàn)D氨基半乳糖肝損傷大鼠模型具有成模率高、重復(fù)性好、對人體危害性低等優(yōu)點(diǎn)。但以D氨基半乳糖誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型尚未見報(bào)道。 本研究通過D氨基半乳糖和低濃度四氯化碳分別建立急、慢性肝損傷小鼠動物模型,利用組織學(xué)蘇木精—伊紅染色(HE)和Masson染色觀察小鼠肝組織結(jié)構(gòu)變化、細(xì)胞形態(tài)及纖維化程度,利用常規(guī)生化方法檢測血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的濃度確定肝組織損傷程度,對肝損傷小鼠模型進(jìn)行評價(jià)。研究結(jié)果表明,D氨基半乳糖以10μl/g的劑量,通過腹腔注射,1次/2天,連續(xù)注射8周的小鼠,能引起穩(wěn)定且明顯的肝組織損傷。該結(jié)果證明應(yīng)用D氨基半乳糖能成功誘導(dǎo)出小鼠肝損傷...

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述和引言
    1.1 肝損傷研究進(jìn)展
        1.1.1 肝損傷概述
        1.1.2 肝損傷及其分子機(jī)制
        1.1.3 肝損傷修復(fù)的分子機(jī)制
    1.2 肝損傷動物模型研究進(jìn)展
        1.2.1 CCl₄肝損傷模型
        1.2.2 D-氨基半乳糖肝損傷動物模型
        1.2.3 刀豆蛋白A(ConA)肝損傷動物模型
        1.2.4 細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖(LPS)肝損傷動物模型
        1.2.5 酒精性肝損傷動物模型
        1.2.6 缺血再灌注肝損傷動物模型
    1.3 束縛應(yīng)激研究進(jìn)展
        1.3.1 應(yīng)激與束縛應(yīng)激概念
        1.3.2 應(yīng)激與束縛應(yīng)激分子機(jī)制
第二章 建立小鼠肝損傷模型
    2.1. 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 溶液制備
        2.1.5 模型制備
        2.1.6 樣本處理
        2.1.7 血清AST、ALT測定
        2.1.8 肝組織固定、包埋、切片
        2.1.9 肝組織切片HE染色及觀察
        2.1.10 肝組織切片Masson染色及觀察
        2.1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 小鼠D+L慢性肝損傷組織病理學(xué)特征
        2.2.2 小鼠D氨基半乳糖慢性肝損傷血清ALT,AST數(shù)值及兩者比值
        2.2.3 小鼠四氯化碳慢性肝損傷組織病理學(xué)特征
        2.2.4 小鼠四氯化碳慢性肝損傷血清ALT,AST數(shù)值及兩者比值
        2.2.5 小鼠四氯化碳急性肝損傷組織病理學(xué)特征
        2.2.6 小鼠四氯化碳急性肝損傷血清ALT,AST數(shù)值及兩者比值
    2.3 討論
        2.3.1 D氨基半乳糖慢性肝損傷小鼠模型的特征
        2.3.2 四氯化碳肝損傷小鼠模型的特征
    2.4 小結(jié)
第三章 束縛應(yīng)激對肝損傷的作用
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 溶液制備
        3.1.5 模型制備
        3.1.6 束縛應(yīng)激
        3.1.7 樣本處理
        3.1.8 血清AST、ALT測定
        3.1.9 肝組織固定、包埋、切片
        3.1.10 肝組織切片HE染色及觀察
        3.1.11 肝組織切片Masson染色及觀察
        3.1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 束縛應(yīng)激減少肝細(xì)胞的損傷
        3.2.2 束縛應(yīng)激減少肝纖維化形成
        3.2.3 束縛應(yīng)激降低血清ALT,AST數(shù)值
    3.3 討論
        3.3.1 束縛應(yīng)激對肝損傷的緩解作用
    3.4 小結(jié)
第四章 初步探索束縛應(yīng)激對肝損傷緩解作用的機(jī)制
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.3 肝組織MDA、P450酶表達(dá)含量及SOD活性測定
        4.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 束縛應(yīng)激對慢性肝損傷小鼠P450酶,MDA和SOD濃度的影響
        4.2.2 四氯化碳肝損傷小鼠動物模型束縛應(yīng)激后肝組織5-HTR_2B免疫組化結(jié)果
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與創(chuàng)新
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：3841413