發(fā)布時(shí)間：2023-05-30 22:23

　　研究背景 miRNA(microRNA)是一類短小的非編碼單鏈小分子RNA,通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)對(duì)基因表達(dá)發(fā)揮著重要調(diào)控作用。多項(xiàng)研究表明,miRNA在細(xì)胞增殖、分化、凋亡、分泌、遷移、惡性轉(zhuǎn)化等細(xì)胞功能方面存在重要調(diào)控功能,在生物體的生長發(fā)育、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、組織器官分化、疾病的發(fā)生發(fā)展等復(fù)雜的生物學(xué)過程中亦扮演著重要角色。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞,可以分化為多種中胚層細(xì)胞及數(shù)種非中胚層細(xì)胞。已經(jīng)有很多研究證明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化異常在諸如股骨頭壞死、骨質(zhì)疏松等疾病當(dāng)中扮演著重要角色。miRNA通過對(duì)大量基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分化方向產(chǎn)生重要的調(diào)控作用。本研究擬在本課題組前期研究的基礎(chǔ)上對(duì)此前篩選出的miRNAs進(jìn)行功能驗(yàn)證,明確其對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化方向的影響。 研究目的 1.復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代BMSC,用生物信息學(xué)方法對(duì)此前研究所得miRNA進(jìn)行篩選； 2.定(?)(?)agomir及antagomir,通過轉(zhuǎn)染改變骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)miRNA的水平,通過染色研究轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化方向,從而篩選出對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化方向存...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)一 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代及糖皮質(zhì)激素調(diào)控的MIRNA的篩選
    第一部分 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
        1.1.3 結(jié)果
        1.1.4 討論
    第二部分 利用生物信息學(xué)方法對(duì)BMSC成脂分化相關(guān)MIRNAS的篩選
        1.2.1 生物信息學(xué)預(yù)測所釆用的軟件、數(shù)據(jù)庫
        1.2.2 基于通路的miRNA預(yù)測
        1.2.3 結(jié)果與討論
實(shí)驗(yàn)二 BMSC的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及油紅O、茜素紅、Ⅱ型膠原染色
    2.1 BMSC的轉(zhuǎn)染
    2.2 油紅O染色評(píng)價(jià)MIRNA對(duì)BMSC成脂分化的影響
    2.3 茜素紅染色評(píng)價(jià)MIRNA對(duì)BMSC成骨分化的影響
    2.4 Ⅱ型膠原染色評(píng)價(jià)MIRNA對(duì)BMSC成脂分化的影響
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.6 討論
實(shí)驗(yàn)三 HAS-MIR-1303的功能研究——全基因組芯片對(duì)MIR-1303靶基因及作用通路的識(shí)別
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果
    3.4 討論
附圖
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)回顧
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3825147