鷹嘴豆芽素A對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌外排系統(tǒng)的抑制作用
發(fā)布時(shí)間:2017-05-20 12:26
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【摘要】:【目的】MRSA外排系統(tǒng)是其對(duì)多種藥物耐藥性的主要原因,為此研究鷹嘴豆芽素A對(duì)MRSA外排系統(tǒng)的抑制作用!痉椒ā恳訫RSA41577為供試菌株,通過(guò)二倍稀釋法、雙平板法和熒光分光光度法測(cè)定鷹嘴豆芽素A對(duì)MRSA41577的抑制作用及其對(duì)外排系統(tǒng)的影響;通過(guò)RT-PCR檢測(cè)加藥前后MRSA41577外排蛋白norA的表達(dá)量;SDS-PAGE檢測(cè)加藥前后與MRSA41577外排相關(guān)蛋白的變化,并用液相色譜質(zhì)譜儀進(jìn)行鑒定確認(rèn)!窘Y(jié)果】鷹嘴豆芽素A本身無(wú)抑菌活性,但鷹嘴豆芽素A和環(huán)丙沙星聯(lián)合作用后,MRSA41577對(duì)環(huán)丙沙星的敏感性顯著提高,其中40μg/mL的鷹嘴豆芽素A能使環(huán)丙沙星對(duì)MRSA41577的MIC從64μg/mL降低到8μg/mL,且作用強(qiáng)度與藥物濃度呈正相關(guān)。經(jīng)鷹嘴豆芽素A處理MRSA41577后,菌體內(nèi)環(huán)丙沙星的蓄積量隨著藥物處理時(shí)間的增加而增加,在處理15min時(shí)與對(duì)照組相比,菌體內(nèi)環(huán)丙沙星蓄積量增加了83%(P㩳0.01),與陽(yáng)性對(duì)照利血平的作用效果相當(dāng)。鷹嘴豆芽素A能降低MRSA41577的norA表達(dá)量,與對(duì)照組相比,鷹嘴豆芽素A和環(huán)丙沙星作用MRSA41577 16h后,norA的相對(duì)表達(dá)量降低了65%,其抑制效果優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照利血平的48%。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示,鷹嘴豆芽素A作用MRSA4157716h后,與對(duì)照組相比菌體的蛋白譜帶發(fā)生了明顯的變化,其中與外排系統(tǒng)相關(guān)的蛋白除norA蛋白明顯減少外,ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體ATP結(jié)合蛋白也明顯減少!窘Y(jié)論】鷹嘴豆芽素A是MRSA41577的外排泵抑制劑,其作用機(jī)制是通過(guò)降低MRSA41577菌體內(nèi)norA基因的表達(dá)量,進(jìn)而減少norA蛋白的表達(dá)量,來(lái)抑制MRSA41577對(duì)環(huán)丙沙星等藥物的排出而恢復(fù)其對(duì)藥物的敏感性。
【作者單位】: 遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 遼寧省生物技術(shù)與分子藥物研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 鷹嘴豆芽素A 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 norA基因 外排蛋白
【基金】:遼寧省教育廳科學(xué)研究一般項(xiàng)目(L2013412) 大連市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013E13SF108)~~
【分類號(hào)】:Q935
【正文快照】: 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是引起醫(yī)院和社區(qū)感染的重要致病菌[1-2],它除對(duì)甲氧西林耐藥外,對(duì)β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、喹諾酮類等抗生素也均有不同程度的耐藥 性[3]。目前研究結(jié)果表明,主動(dòng)外排系
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本文編號(hào):381646
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