本文關(guān)鍵詞：鈣離子對(duì)小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞增殖和向肝細(xì)胞定向分化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：將骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)定向誘導(dǎo)分化成為肝細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞移植,以替代損傷的肝細(xì)胞,對(duì)肝病治療有非常重要的臨床價(jià)值。然而,干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的機(jī)理尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)研究小鼠BMSCs向肝細(xì)胞定向分化過程中Ca2+的變化。 方法：無菌分離小鼠BMSCs,貼壁法純化和擴(kuò)增BMSCs。應(yīng)用添加肝組織提取液(G)和鼠源β-神經(jīng)生長因子(β-NGF)方案誘導(dǎo)BMSCs向肝細(xì)胞分化,鏡下觀察分化細(xì)胞的形態(tài)特征；免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)肝細(xì)胞的特異性標(biāo)志物a-1-抗胰蛋白酶(AAT)和白蛋白(ALB)表達(dá)；吲哚靛青綠(ICG)攝取實(shí)驗(yàn)鑒定肝樣分化細(xì)胞的離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能。應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)比檢測(cè)BMSCs和β-NGF誘導(dǎo)分化細(xì)胞內(nèi)的游離[Ca2+]i；并觀察鈣離子拮抗劑尼莫地平對(duì)干細(xì)胞的增殖和定向分化能力的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(1)肝組織提取液和β-NGF誘導(dǎo)后,可見分化細(xì)胞逐漸趨短變圓呈圓形和卵圓形,圓形細(xì)胞可以攝取吲哚靛青綠(ICG),呈現(xiàn)綠色。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示分化細(xì)胞呈AAT和ALB陽性表達(dá)；誘導(dǎo)組分化細(xì)胞的AAT表達(dá)顯著性高于對(duì)照組(P0.05)；肝組織提取液和β-NGF組間的誘導(dǎo)作用無顯著性差異(P0.05)。(2) β-NGF誘導(dǎo)形成的肝樣分化細(xì)胞中[Ca2+]i較對(duì)照組細(xì)胞顯著性升高(P0.05)。(3)加入鈣離子拮抗劑尼莫地平可以阻斷BMSCs向肝細(xì)胞的誘導(dǎo)分化,并影響細(xì)胞的增殖活性。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：(1)肝組織提取液和β-NGF均可誘導(dǎo)BMSCs向肝樣細(xì)胞分化。(2)Ca2+在BMSCs的增殖和向肝細(xì)胞的分化過程中發(fā)揮重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：骨髓基質(zhì)干細(xì)胞 肝細(xì)胞 誘導(dǎo)分化 Ca~(2+) 小鼠
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第一章 實(shí)驗(yàn)材料7-9
• 1.1 主要試劑7-8
• 1.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)試劑一覽表7
• 1.1.2 溶液配制用化學(xué)試劑一覽表7-8
• 1.2 主要儀器8
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8-9
• 第二章 實(shí)驗(yàn)方法9-12
• 2.1 小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化和擴(kuò)增9
• 2.2 肝組織提取液制備9
• 2.3 尼莫地平對(duì)干細(xì)胞增殖活性的影響9-10
• 2.4 BMSCs向肝細(xì)胞的分化10
• 2.5 分化細(xì)胞鑒定10
• 2.6 細(xì)胞內(nèi)鈣離子測(cè)定([Ca~(2+)]i)10-11
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法11-12
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果12-16
• 3.1 尼莫地平對(duì)干細(xì)胞增殖活性的影響12-13
• 3.2 分化細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化13-14
• 3.3 分化細(xì)胞肝細(xì)胞標(biāo)志蛋白的表達(dá)14-15
• 3.4 誘導(dǎo)組與對(duì)照組[Ca~(2+)]i15-16
• 第四章 實(shí)驗(yàn)分析與討論16-18
• 結(jié)論18-19
• 參考文獻(xiàn)19-21
• 文獻(xiàn)綜述21-33
• 綜述的參考文獻(xiàn)28-33
• 致謝33-34
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果34-35

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：鈣離子對(duì)小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞增殖和向肝細(xì)胞定向分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：381631