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小鼠脂肪來源干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-05-19 08:26

  本文關(guān)鍵詞:小鼠脂肪來源干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:脂肪來源干細(xì)胞(Adipose-DerivedStemCells,ADSCs)作為組織工程的種子細(xì)胞正受到越來越多的關(guān)注。 本實(shí)驗(yàn)采用一次消化多次收集與差速貼壁法分離小鼠腹股溝及附睪脂肪組織中的ADSC。通過倒置顯微鏡觀察ADSC的一般形態(tài);透射電子顯微鏡觀察ADSC的超微結(jié)構(gòu);流式細(xì)胞術(shù)及激光共聚焦顯微鏡檢測ADSC表面標(biāo)志;利用特定的誘導(dǎo)液誘導(dǎo)ADSC分化及利用掃描電子顯微鏡觀察ADSC與膠原支架的相容性。 結(jié)果顯示ADSC呈長梭形或成纖維細(xì)胞樣,旋渦狀或束狀交叉生長。ADSC細(xì)胞體積大,胞質(zhì)內(nèi)含有線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器。ADSC的生長符合干細(xì)胞的生長規(guī)律,并可在體外穩(wěn)定傳至第9代。ADSC表達(dá)CD44及CD29,不表達(dá)CD34。成骨誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后,細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶表達(dá)量增加,,細(xì)胞基質(zhì)發(fā)生鈣化。成脂肪誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見較多小脂滴。說明ADSC具有分化為成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞的潛能。ADSC能夠在膠原支架上鋪展生長,說明其與膠原支架具有良好的相容性。 本實(shí)驗(yàn)建立了分離、培養(yǎng)小鼠ADSC的技術(shù)方法,為將來利用小鼠ADSC進(jìn)行皮膚、肌腱、血管及神經(jīng)組織修復(fù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究提供了前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和技術(shù)支持。
【關(guān)鍵詞】:小鼠 脂肪組織 干細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R329.2
【目錄】:
  • 內(nèi)容提要4-6
  • 英文縮略詞表6-7
  • 第1章 綜述7-13
  • 1、ADSC的統(tǒng)一命名8-9
  • 2、ADSC的來源9
  • 3、ADSC的分離、培養(yǎng)9-10
  • 4、ADSC的表面標(biāo)志10
  • 5、ADSC的分化潛能10-11
  • 6. 展望11-13
  • 第2章 材料與方法13-23
  • 2.1 主要試劑及儀器13-14
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14-15
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)方法15-23
  • 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-30
  • 3.1 ADSC的形態(tài)學(xué)觀察23-24
  • 3.2 ADSC的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)24-25
  • 3.3 ADSC的生長動(dòng)力學(xué)25
  • 3.4 ADSC的生物學(xué)標(biāo)志檢測25-27
  • 3.5 ADSC的成脂肪分化27-28
  • 3.6 ADSC的成骨分化28-29
  • 3.7 ADSC與膠原支架材料的相容性29-30
  • 第4章 討論30-33
  • 第5章 結(jié)論33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-41
  • 中文摘要41-43
  • Abstract43-46
  • 作者簡介及科研成果46-47
  • 致謝47

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:378217

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