本文關(guān)鍵詞：豚鼠離焦性近視眼模型及RPE細(xì)胞跨上皮電阻的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 研究建立凹透球鏡片誘導(dǎo)的離焦性豚鼠(guinea pig)近視眼模型,觀察體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium RPE)細(xì)胞的跨上皮電阻(transepithelial electrical resistance TER),探討建立RPE細(xì)胞單層屏障模型TER值穩(wěn)定表達(dá)的時(shí)間區(qū)間。 方法： 將30只相同批次2周齡三色豚鼠隨機(jī)分配成兩組,即正常組(10只)和單眼離焦模型組(20只)(簡(jiǎn)稱離焦組),離焦組采用-10.00D凹透球鏡片縫于左眼(離焦眼)前2周：二組均于2周齡和4周齡雙眼擴(kuò)瞳后視網(wǎng)膜檢影驗(yàn)光測(cè)量屈光度及A超測(cè)量?jī)x測(cè)定眼軸長(zhǎng)度；然后將離焦組豚鼠處死,取左眼RPE細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),以細(xì)胞角蛋白(Cytokeratin)及S-100蛋白為標(biāo)志物,采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法鑒定為陽(yáng)性,傳至第2代,接種于Millcell-PET插入式培養(yǎng)池內(nèi)的微孔濾膜表面,待細(xì)胞融合為單層,在含1%血清濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)條件下,采用電阻測(cè)量?jī)x連續(xù)檢測(cè)并記錄上皮細(xì)胞單層的TER值。 結(jié)果： 1.離焦眼的屈光度及眼軸長(zhǎng)度的變化 離焦眼的近視屈光度增加,離焦組(-3.29士0.72D)與正常組(+3.18±0.50D)及自身對(duì)照眼(+1.42±0.60D)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；離焦眼的眼軸長(zhǎng)度延長(zhǎng),離焦組(8.14±0.09mm)與正常組(7.54±0.07mm)及自身對(duì)照眼(7.89±0.07mm)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)； 2.離焦眼RPE細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定 體外培養(yǎng)的離焦眼RPE細(xì)胞生長(zhǎng)良好,順利貼壁,‘均表達(dá)細(xì)胞角蛋白及S-100蛋白,陽(yáng)性率均達(dá)100%,其細(xì)胞純度高,能較好地保持視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞固有的特征；RPE細(xì)胞傳代能力良好,呈鋪路石樣整齊排列。 3.離焦眼RPE細(xì)胞的TER值檢測(cè) 離焦眼RPE細(xì)胞的TER值隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增大,約在第12天基本穩(wěn)定,且達(dá)57.18Q/cm2以上,并可保持其穩(wěn)定性達(dá)8天。 結(jié)論： 1.凹透球鏡片誘導(dǎo)可以成功建立豚鼠離焦性近視眼模型； 2.體外培養(yǎng)的豚鼠離焦性近視眼RPE細(xì)胞生長(zhǎng)和傳代能力良好； 3.體外培養(yǎng)的豚鼠離焦眼性近視眼RPE細(xì)胞能形成具有穩(wěn)定TER值的上皮細(xì)胞單層結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定的TER值至少能維持8天,為下一步的干預(yù)研究實(shí)驗(yàn)奠定了模型基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：凹透鏡 豚鼠 RPE 跨上皮電阻
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R778.11;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 中英文對(duì)照10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 材料與方法13-19
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14-18
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法18-19
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-23
• 3.1 屈光度與眼軸長(zhǎng)度19
• 3.2 離焦性近視眼RPE細(xì)胞培養(yǎng)鑒定及傳代19-21
• 3.3 離焦眼RPE細(xì)胞的TER值檢測(cè)21-23
• 第四章 討論23-27
• 一 離焦性近視眼動(dòng)物模型的建立23-24
• 二 離焦性近視眼RPE細(xì)胞體外培養(yǎng)及鑒定24-25
• 三 體外培養(yǎng)RPE細(xì)胞TER檢測(cè)意義25-27
• 第五章 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞在近視中的研究進(jìn)展31-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 致謝46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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  本文關(guān)鍵詞：豚鼠離焦性近視眼模型及RPE細(xì)胞跨上皮電阻的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：377949