本文關(guān)鍵詞：豚鼠離焦性近視眼模型及RPE細胞跨上皮電阻的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 研究建立凹透球鏡片誘導的離焦性豚鼠(guinea pig)近視眼模型,觀察體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium RPE)細胞的跨上皮電阻(transepithelial electrical resistance TER),探討建立RPE細胞單層屏障模型TER值穩(wěn)定表達的時間區(qū)間。 方法： 將30只相同批次2周齡三色豚鼠隨機分配成兩組,即正常組(10只)和單眼離焦模型組(20只)(簡稱離焦組),離焦組采用-10.00D凹透球鏡片縫于左眼(離焦眼)前2周：二組均于2周齡和4周齡雙眼擴瞳后視網(wǎng)膜檢影驗光測量屈光度及A超測量儀測定眼軸長度；然后將離焦組豚鼠處死,取左眼RPE細胞進行原代培養(yǎng),以細胞角蛋白(Cytokeratin)及S-100蛋白為標志物,采用免疫細胞化學染色法鑒定為陽性,傳至第2代,接種于Millcell-PET插入式培養(yǎng)池內(nèi)的微孔濾膜表面,待細胞融合為單層,在含1%血清濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)條件下,采用電阻測量儀連續(xù)檢測并記錄上皮細胞單層的TER值。 結(jié)果： 1.離焦眼的屈光度及眼軸長度的變化 離焦眼的近視屈光度增加,離焦組(-3.29士0.72D)與正常組(+3.18±0.50D)及自身對照眼(+1.42±0.60D)比較,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；離焦眼的眼軸長度延長,離焦組(8.14±0.09mm)與正常組(7.54±0.07mm)及自身對照眼(7.89±0.07mm)比較,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)； 2.離焦眼RPE細胞的體外培養(yǎng)及鑒定 體外培養(yǎng)的離焦眼RPE細胞生長良好,順利貼壁,‘均表達細胞角蛋白及S-100蛋白,陽性率均達100%,其細胞純度高,能較好地保持視網(wǎng)膜色素上皮細胞固有的特征；RPE細胞傳代能力良好,呈鋪路石樣整齊排列。 3.離焦眼RPE細胞的TER值檢測 離焦眼RPE細胞的TER值隨培養(yǎng)時間的延長逐漸增大,約在第12天基本穩(wěn)定,且達57.18Q/cm2以上,并可保持其穩(wěn)定性達8天。 結(jié)論： 1.凹透球鏡片誘導可以成功建立豚鼠離焦性近視眼模型； 2.體外培養(yǎng)的豚鼠離焦性近視眼RPE細胞生長和傳代能力良好； 3.體外培養(yǎng)的豚鼠離焦眼性近視眼RPE細胞能形成具有穩(wěn)定TER值的上皮細胞單層結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定的TER值至少能維持8天,為下一步的干預研究實驗奠定了模型基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：凹透鏡 豚鼠 RPE 跨上皮電阻
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R778.11;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 中英文對照10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 材料與方法13-19
• 2.1 實驗材料13-14
• 2.2 實驗方法14-18
• 2.3 統(tǒng)計學方法18-19
• 第三章 實驗結(jié)果19-23
• 3.1 屈光度與眼軸長度19
• 3.2 離焦性近視眼RPE細胞培養(yǎng)鑒定及傳代19-21
• 3.3 離焦眼RPE細胞的TER值檢測21-23
• 第四章 討論23-27
• 一 離焦性近視眼動物模型的建立23-24
• 二 離焦性近視眼RPE細胞體外培養(yǎng)及鑒定24-25
• 三 體外培養(yǎng)RPE細胞TER檢測意義25-27
• 第五章 結(jié)論27-28
• 參考文獻28-31
• 綜述 視網(wǎng)膜色素上皮細胞在近視中的研究進展31-46
• 參考文獻42-46
• 致謝46

【參考文獻】

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本文編號：377949