發(fā)布時間：2017-05-18 20:04

  本文關(guān)鍵詞：中國恒河猴在SIVmac239小劑量多次直腸黏膜暴露中的保護(hù)機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：艾滋病不典型疾病進(jìn)程中的免疫保護(hù)機(jī)制一直都是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。細(xì)胞免疫、中和抗體等在建立機(jī)體感染的患者中發(fā)揮的抗病毒作用都十分有限。本研究將重點(diǎn)放在B細(xì)胞及其介導(dǎo)的早期體液免疫反應(yīng)及固有免疫的重要組份B1細(xì)胞上,研究其分泌的特異性和非特異性IgM抗體在SIVmac239直腸感染猴不同疾病進(jìn)程中的變化規(guī)律,以期發(fā)現(xiàn)其中的免疫保護(hù)機(jī)制,為艾滋病感染機(jī)體機(jī)制、疫苗的研發(fā)提供有益的借鑒。 本研究使用8只正常中國恒河猴,應(yīng)用SIVmac239中國恒河猴細(xì)胞適應(yīng)株通過直腸途徑感染實驗猴。為了更好地模擬HIV在人群中自然傳播方式,使用小劑量多次的感染方式,平均一周感染兩次。分別在SIVmac239感染后不同時間點(diǎn)收集血清、EDTA抗凝血、十二指腸粘膜組織以及直腸沖洗液等樣品,進(jìn)行T、B淋巴細(xì)胞亞群及抗體水平的檢測。病毒載量等實驗結(jié)果顯示,在SIVmac239病毒感染后出現(xiàn)了三種感染情況——典型疾病進(jìn)展型、延遲進(jìn)展型以及隱匿型。典型疾病進(jìn)展組和部分延遲進(jìn)展感染猴中,在感染早期就出現(xiàn)了明顯的B細(xì)胞數(shù)量下降,提示這種變化與疾病進(jìn)程之間的關(guān)系是值得關(guān)注的。 所有8只實驗猴外周血中記憶性B細(xì)胞在SIVmac239感染過程中均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢,但在腸粘膜固有層中則相反。這種變化在不同個體之間變化幅度無明顯差異,與疾病進(jìn)程之間無相關(guān)性。同樣發(fā)現(xiàn),與疾病進(jìn)程無相關(guān)性的是IgM+記憶性B淋巴細(xì)胞,暴露后它在外周血和腸粘膜中比例都有所增加,且這種變化與IgM抗體產(chǎn)生的時間點(diǎn)一致,表明在SIV感染的早期,IgM+記憶性B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激活化,且這種激活與后續(xù)的感染進(jìn)程無關(guān),是單純的免疫激活過程。 在感染早期腸粘膜和外周血中B1細(xì)胞,主要為Bla細(xì)胞比例顯著升高,腸粘膜中B1細(xì)胞增加的幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于外周血。黏膜中Bla細(xì)胞的比例在三組不同的感染模式中表現(xiàn)出顯著性差異,提示B1a細(xì)胞比例的變化與疾病進(jìn)程之間存在密切的關(guān)系。同期在粘膜局部檢測到非特異性IgM抗體水平與疾病進(jìn)程呈負(fù)相關(guān),進(jìn)一步證明在粘膜局部能早期誘導(dǎo)較強(qiáng)的B1,主要是B1a細(xì)胞增殖,分泌非特異性IgM抗體,推測可以在早期抑制病毒的入侵。 SIV感染能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗SIV特異性IgM和IgG抗體。通常IgG抗體產(chǎn)生的時間晚于病毒載量高峰出現(xiàn)的時間,表明抗SIV特異性IgG抗體不能在感染早期及時有效地控制病毒的復(fù)制。本研究發(fā)現(xiàn),特異性IgM抗體能在早期產(chǎn)生。雖然外周血中水平相對較低,但抗體水平和疾病進(jìn)程之間也顯示負(fù)相關(guān)性,表明特異性IgM抗體可能在早期抗感染過程中起到一定作用。 綜上所述,在SIV感染早期,B細(xì)胞活化分泌抗SIV特異性IgM抗體參與機(jī)體的抗感染免疫。固有免疫中的B1細(xì)胞,主要是B1a細(xì)胞接受抗原刺激后分泌非特異性IgM抗體,在早期粘膜局部抗SIV感染過程中發(fā)揮重要作用,能在很大程度上影響疾病的進(jìn)程。 最后,本研究還用抗人B淋巴細(xì)胞單克隆抗體(利妥昔單抗注射液,Rituximab)通過靜脈滴注的方法敲除中國恒河猴體內(nèi)B淋巴細(xì)胞,定期采集外周血、腹股溝淋巴結(jié)和十二指腸黏膜組織,制備淋巴細(xì)胞懸液,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)的方法系統(tǒng)性測定B淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群的變化及轉(zhuǎn)歸情況。結(jié)果表明,利妥昔單抗注射液能有效去除中國恒河猴體內(nèi)B淋巴細(xì)胞。這一結(jié)果為深入探討B(tài)淋巴細(xì)胞在SIV/HIV感染中的作用及其與病毒的復(fù)制和疾病進(jìn)程的關(guān)系,提供了基礎(chǔ)實驗數(shù)據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：恒河猴 SIVmac239 直腸途徑 小劑量多次 體液免疫 IgM抗體 B1淋巴細(xì)胞 B1a淋巴細(xì)胞 抗人B淋巴細(xì)胞單克隆抗體 B細(xì)胞敲除
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R512.91;R-332
【目錄】：

• 主要英文縮寫詞4-5
• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-12
• 第一部分 中國恒河猴在SIVmac239小劑量多次直腸黏膜暴露中保護(hù)機(jī)制研究12-54
• 引言12-13
• 一、實驗材料13-17
• 二、實驗方法17-29
• 三、實驗結(jié)果29-50
• 四、討論50-53
• 五、結(jié)論53-54
• 第二部分 抗人B淋巴細(xì)胞單克隆抗體清除中國恒河猴體內(nèi)B淋巴細(xì)胞效果觀察54-66
• 引言54-55
• 一、實驗材料55-58
• 二、實驗方法58-59
• 三、實驗結(jié)果59-63
• 四、討論63-65
• 五、結(jié)論65-66
• 參考文獻(xiàn)66-69
• 致謝69-70

【參考文獻(xiàn)】

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1 熊競;劉克劍;吳芳新;叢U

本文編號：377000