目的利用低氧/厭氧工作站,結(jié)合不同的缺氧條件,探討建立H9c2細(xì)胞缺氧復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型的最佳方法。方法缺氧時(shí)將H9c2細(xì)胞置于低氧/厭氧工作站中,分別以完全培養(yǎng)基,無糖培養(yǎng)基和酸性缺氧液培養(yǎng)1、2、4、6、8 h,缺氧后換用完全培養(yǎng)基于培養(yǎng)箱中按常規(guī)條件培養(yǎng)1 h。流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,噻唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測細(xì)胞生存率,倒置顯微鏡下觀察H9c2細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果與對照組比較,缺氧時(shí)以完全培養(yǎng)基和無糖培養(yǎng)基處理的H9c2細(xì)胞H/R后,細(xì)胞內(nèi)ROS含量和細(xì)胞存活率隨缺氧時(shí)間延長無明顯改變,且倒置顯微鏡下未觀察到明顯的形態(tài)變化。缺氧時(shí)以酸性缺氧液處理的H9c2細(xì)胞,隨H/R時(shí)程的延長,細(xì)胞內(nèi)ROS含量不斷增加(P<0.01),且細(xì)胞存活率逐漸降低(P<0.01),倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞H∶1 h/R∶1 h后開始出現(xiàn)部分細(xì)胞皺縮,少量壞死細(xì)胞漂浮,隨時(shí)間延長損傷加重;缺氧8 h后,細(xì)胞皺縮成圓形,大量壞死細(xì)胞漂...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論



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