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誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性

發(fā)布時(shí)間:2022-12-08 07:17
  目的:利用外周血單個(gè)核細(xì)胞獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)并進(jìn)一步誘導(dǎo)分化為間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC),觀察iPSC來源MSC的生物學(xué)特性,并與其他來源MSC的相關(guān)生物學(xué)特性進(jìn)行對(duì)比。方法:獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞并使用仙臺(tái)病毒載體對(duì)其進(jìn)行重編程因子的轉(zhuǎn)導(dǎo),鑒定其細(xì)胞形態(tài)和多能性因子的免疫熒光表達(dá)水平。對(duì)1株完成所有鑒定的iPSC進(jìn)行MSC的誘導(dǎo)分化,并利用免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)其細(xì)胞形態(tài)、免疫表型進(jìn)行鑒定。使用成脂、成骨培養(yǎng)液進(jìn)行成脂成骨的誘導(dǎo)分化,以鑒定其分化能力。利用PCR鑒定其轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),以系統(tǒng)闡明iPSC誘導(dǎo)分化所得的MSC的生物學(xué)特性。結(jié)果:外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過攜帶重編程因子的仙臺(tái)病毒轉(zhuǎn)染后,命運(yùn)發(fā)生轉(zhuǎn)歸。通過啟動(dòng)干性基因表達(dá),成功地獲得iPSC克隆,經(jīng)擴(kuò)增、純化,最后獲得了可穩(wěn)定增殖的iPSC。免疫熒光定位證明,其多能性因子分別在胞膜和胞內(nèi)得到表達(dá)。經(jīng)鑒定,利用iPSC誘導(dǎo)獲得了間充質(zhì)干細(xì)胞,其形態(tài)與其它來源的MSC一致,免疫表型檢測(cè)也相符。iPSC-MSC的成脂成骨誘導(dǎo)分化與UC-MSC結(jié)果一致,表明iPSCMSC具有分化(成脂成骨)能力,也表明了其具備MSC的多項(xiàng)基本特... 

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本文編號(hào):3713805

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