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脾臟巨噬細胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究

發(fā)布時間:2017-05-16 09:02

  本文關鍵詞:脾臟巨噬細胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的 通過學習、借鑒國內(nèi)外學者對熱射病動物模型的研究,結合本課題所能提供的實驗條件及技術水平構建符合本實驗要求的大鼠熱射病模型。在熱射病的病生機制研究中,內(nèi)環(huán)境的炎性細胞因子的擴大反應占有較大的地位,巨噬細胞作為機體內(nèi)免疫細胞的一種,介導著體內(nèi)的炎性反應過程,通過分離、培養(yǎng)巨噬細胞,研究與其極化有關的iNOS、ArgⅠ兩種因子在熱應激處理后不同時間點的變化,進一步揭示巨噬細胞極化與熱射病大鼠兩者之間的關系,為臨床治療熱射病提供新的靶點。 方法 經(jīng)改良處理的可控式恒溫箱控制熱暴露環(huán)境的溫度、濕度、暴露的時間,借鑒國內(nèi)外學者熱射病動物模型的研究進展,采用溫度為40℃,濕度為60%的熱暴露處理,達到熱射病動物模型的診斷標準。通過采用實時定量PCR、Western Blot兩種實驗方法檢測熱處理即刻、1天、2天、3天、7天和對照組共6個點的大鼠脾臟巨噬細胞細胞表面標志物(iNOS、ArgⅠ)表達量的變化,來判定熱應激發(fā)生后不同時間點巨噬細胞的極化方向。 結果 將大鼠放置于溫度為40℃、濕度60%的熱應激環(huán)境中處理后,構建成功的符合本課題要求的大鼠熱射病模型。無菌操作取大鼠脾臟組織,經(jīng)分離、純化等無菌操作后獲得數(shù)量較多的合格的大鼠脾臟巨噬細胞。實時定量PCR、Western Blot兩種實驗方法檢測熱處理后各時間點的實驗指標與對照組相比,iNOS除7天組無意義(P0.05),余各組與對照組比有統(tǒng)計學意義(P0.05),但測得結果均小于對照組,,表示實驗組未出現(xiàn)M1型巨噬細胞極化。ArgⅠ在各點的數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學意義(P0.05),在1天組ArgⅠ的含量逐漸升高,且高于同組iNOS表達量,提示在1天組后細胞向M2型方向轉變,起到保護機體的作用。 結論 在熱射病的病理生理學變化的研究中,體溫調(diào)節(jié)中樞-下丘腦的功能紊亂、機體外熱環(huán)境對細胞的直接熱損傷作用、脂質(zhì)氧化應激反應、內(nèi)環(huán)境炎性細胞因子擴大級聯(lián)反應等都參與其中。其中炎性反應在熱射病的病理機制中發(fā)揮重大的作用,巨噬細胞作為機體的重要的免疫細胞和抗原提呈細胞在機體的免疫反應中發(fā)揮重大作用,在遭受到外界環(huán)境的應激性刺激后能夠迅速的做出反應,以降低機體內(nèi)環(huán)境的紊亂。既往研究表明,機體內(nèi)巨噬細胞的極化發(fā)生與炎性相關疾病有極大的相關性。通過檢測熱應激處理后大鼠脾臟巨噬細胞的極化狀態(tài)的發(fā)展變化及方向為熱射病的病理發(fā)病機制提供新的研究方向,進而為熱射病的臨床診斷、預防治療提供新的治療措施。
【關鍵詞】:熱射病模型 脾臟 巨噬細胞的極化 iNOS ArgⅠ
【學位授予單位】:泰山醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R-332;R594.1
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 符號說明9-10
  • 前言10-13
  • 第一部分13-18
  • 實驗動物及材料14-15
  • 結果15-16
  • 討論16-17
  • 結論17-18
  • 第二部分18-29
  • 實驗動物及材料19-25
  • 實驗結果25-27
  • 討論27-28
  • 結論28-29
  • 第三部分29-50
  • 實驗材料及步驟30-43
  • 實驗結果43-46
  • 討論及結果分析46-49
  • 結論49-50
  • 小結50-51
  • 參考文獻51-54
  • 綜述54-61
  • 參考文獻59-61
  • 致謝61

【參考文獻】

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 林曉靜;過熱復合脂多糖致熱射病大鼠動物模型多器官急性損傷的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2009年

2 黃長文;輕度熱應激大鼠脾臟巨噬細胞免疫功能的研究[D];南昌大學;2009年

3 吳士文;熱射病中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2010年


  本文關鍵詞:脾臟巨噬細胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:370379

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