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脾臟巨噬細(xì)胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-16 09:02

  本文關(guān)鍵詞:脾臟巨噬細(xì)胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的 通過(guò)學(xué)習(xí)、借鑒國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)熱射病動(dòng)物模型的研究,結(jié)合本課題所能提供的實(shí)驗(yàn)條件及技術(shù)水平構(gòu)建符合本實(shí)驗(yàn)要求的大鼠熱射病模型。在熱射病的病生機(jī)制研究中,內(nèi)環(huán)境的炎性細(xì)胞因子的擴(kuò)大反應(yīng)占有較大的地位,巨噬細(xì)胞作為機(jī)體內(nèi)免疫細(xì)胞的一種,介導(dǎo)著體內(nèi)的炎性反應(yīng)過(guò)程,通過(guò)分離、培養(yǎng)巨噬細(xì)胞,研究與其極化有關(guān)的iNOS、ArgⅠ兩種因子在熱應(yīng)激處理后不同時(shí)間點(diǎn)的變化,進(jìn)一步揭示巨噬細(xì)胞極化與熱射病大鼠兩者之間的關(guān)系,為臨床治療熱射病提供新的靶點(diǎn)。 方法 經(jīng)改良處理的可控式恒溫箱控制熱暴露環(huán)境的溫度、濕度、暴露的時(shí)間,借鑒國(guó)內(nèi)外學(xué)者熱射病動(dòng)物模型的研究進(jìn)展,采用溫度為40℃,濕度為60%的熱暴露處理,達(dá)到熱射病動(dòng)物模型的診斷標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)采用實(shí)時(shí)定量PCR、Western Blot兩種實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)熱處理即刻、1天、2天、3天、7天和對(duì)照組共6個(gè)點(diǎn)的大鼠脾臟巨噬細(xì)胞細(xì)胞表面標(biāo)志物(iNOS、ArgⅠ)表達(dá)量的變化,來(lái)判定熱應(yīng)激發(fā)生后不同時(shí)間點(diǎn)巨噬細(xì)胞的極化方向。 結(jié)果 將大鼠放置于溫度為40℃、濕度60%的熱應(yīng)激環(huán)境中處理后,構(gòu)建成功的符合本課題要求的大鼠熱射病模型。無(wú)菌操作取大鼠脾臟組織,經(jīng)分離、純化等無(wú)菌操作后獲得數(shù)量較多的合格的大鼠脾臟巨噬細(xì)胞。實(shí)時(shí)定量PCR、Western Blot兩種實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)熱處理后各時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)與對(duì)照組相比,iNOS除7天組無(wú)意義(P0.05),余各組與對(duì)照組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但測(cè)得結(jié)果均小于對(duì)照組,,表示實(shí)驗(yàn)組未出現(xiàn)M1型巨噬細(xì)胞極化。ArgⅠ在各點(diǎn)的數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在1天組ArgⅠ的含量逐漸升高,且高于同組iNOS表達(dá)量,提示在1天組后細(xì)胞向M2型方向轉(zhuǎn)變,起到保護(hù)機(jī)體的作用。 結(jié)論 在熱射病的病理生理學(xué)變化的研究中,體溫調(diào)節(jié)中樞-下丘腦的功能紊亂、機(jī)體外熱環(huán)境對(duì)細(xì)胞的直接熱損傷作用、脂質(zhì)氧化應(yīng)激反應(yīng)、內(nèi)環(huán)境炎性細(xì)胞因子擴(kuò)大級(jí)聯(lián)反應(yīng)等都參與其中。其中炎性反應(yīng)在熱射病的病理機(jī)制中發(fā)揮重大的作用,巨噬細(xì)胞作為機(jī)體的重要的免疫細(xì)胞和抗原提呈細(xì)胞在機(jī)體的免疫反應(yīng)中發(fā)揮重大作用,在遭受到外界環(huán)境的應(yīng)激性刺激后能夠迅速的做出反應(yīng),以降低機(jī)體內(nèi)環(huán)境的紊亂。既往研究表明,機(jī)體內(nèi)巨噬細(xì)胞的極化發(fā)生與炎性相關(guān)疾病有極大的相關(guān)性。通過(guò)檢測(cè)熱應(yīng)激處理后大鼠脾臟巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)的發(fā)展變化及方向?yàn)闊嵘洳〉牟±戆l(fā)病機(jī)制提供新的研究方向,進(jìn)而為熱射病的臨床診斷、預(yù)防治療提供新的治療措施。
【關(guān)鍵詞】:熱射病模型 脾臟 巨噬細(xì)胞的極化 iNOS ArgⅠ
【學(xué)位授予單位】:泰山醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R-332;R594.1
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 符號(hào)說(shuō)明9-10
  • 前言10-13
  • 第一部分13-18
  • 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料14-15
  • 結(jié)果15-16
  • 討論16-17
  • 結(jié)論17-18
  • 第二部分18-29
  • 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料19-25
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-27
  • 討論27-28
  • 結(jié)論28-29
  • 第三部分29-50
  • 實(shí)驗(yàn)材料及步驟30-43
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43-46
  • 討論及結(jié)果分析46-49
  • 結(jié)論49-50
  • 小結(jié)50-51
  • 參考文獻(xiàn)51-54
  • 綜述54-61
  • 參考文獻(xiàn)59-61
  • 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 林曉靜;過(guò)熱復(fù)合脂多糖致熱射病大鼠動(dòng)物模型多器官急性損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

2 黃長(zhǎng)文;輕度熱應(yīng)激大鼠脾臟巨噬細(xì)胞免疫功能的研究[D];南昌大學(xué);2009年

3 吳士文;熱射病中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年


  本文關(guān)鍵詞:脾臟巨噬細(xì)胞的極化在大鼠熱射病模型中的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):370379

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