本文關(guān)鍵詞：豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離、鑒定及聯(lián)合擴(kuò)張器建立乳房重建模型的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 1.從五指山小型豬項(xiàng)背部皮下脂肪組織中分離提取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,傳代、凍存,檢測(cè)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原標(biāo)記,誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化檢測(cè)其分化特性； 2.膚軟組織擴(kuò)張器置入五指山小型豬腹部皮下,調(diào)整模型形狀,塑造理想的乳房模型； 3.脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,分次注入擴(kuò)張器塑造的模型中,觀察模型外形變化,觀察局部細(xì)胞分化情況,,探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞用于乳房重建的可行性,為脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞由基礎(chǔ)到臨床轉(zhuǎn)化提供理論依據(jù)。 方法： 1.原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞：采用膠原酶消化法,從脂肪組織中分離提取原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,通過(guò)干細(xì)胞培養(yǎng)基體外培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,常規(guī)傳代、凍存,檢測(cè)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的穩(wěn)定性,流式細(xì)胞儀檢測(cè)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原標(biāo)記,成骨、成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化,油紅0染色鑒定成脂分化結(jié)果,茜素紅染色鑒定成骨誘導(dǎo)分化結(jié)果； 2.動(dòng)物模型：全麻五指山小型豬,將10ml定制小型圓形皮膚擴(kuò)張器置入腹部皮下,通過(guò)注射壺間斷注入生理鹽水,塑造理想的乳房模型； 3.脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞局部分化情況：每次從注射壺抽出部分?jǐn)U張器內(nèi)生理鹽水并在擴(kuò)張器表面的皮下脂肪組織內(nèi)注入篩選的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察模型外形變化情況,免疫組化法鏡下觀察局部細(xì)胞分化情況。 結(jié)果： 1.1%的Ⅰ型膠原酶消化法可以從脂肪組織中分離提取出原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原標(biāo)記CD34、CD45陰性表達(dá),CD44、CD105陽(yáng)性表達(dá),經(jīng)歷約2—3周誘導(dǎo)培養(yǎng)后,成脂誘導(dǎo)組鏡下可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)大量圓形脂滴形成,油紅O染色顯示脂滴著色呈橘紅色；成骨誘導(dǎo)組可見(jiàn)大量結(jié)節(jié)形成,茜素紅染色顯示細(xì)胞內(nèi)鈣化結(jié)節(jié)形成； 2.注射壺向擴(kuò)張器內(nèi)定期分次注入生理鹽水可以塑造出理想的乳房模型； 3.觀察通過(guò)擴(kuò)張器局部注入脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞后皮膚組織局部外形在短期內(nèi)未見(jiàn)明顯變化,免疫組化檢測(cè)局部細(xì)胞分化情況可見(jiàn)局部脂肪細(xì)胞數(shù)目增多。 結(jié)論： 1.肪間充質(zhì)干細(xì)胞可以成功從脂肪組織中分離提取并進(jìn)行體外培養(yǎng),流式細(xì)胞儀和分化結(jié)果顯示脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞特性； 2.實(shí)驗(yàn)部分證實(shí)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞可以根據(jù)局部微環(huán)境分化成為周圍細(xì)胞的特性； 3.間充質(zhì)干細(xì)胞有望成為乳房重建的種子細(xì)胞,但是脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分化的具體機(jī)制和安全性尚待進(jìn)一步證實(shí)。
【關(guān)鍵詞】：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 擴(kuò)張器 乳房重建
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R655.8;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 目錄7-9
• 引言9-11
• 第一章 文獻(xiàn)研究11-22
• 第一節(jié) 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞研究現(xiàn)狀11-16
• 一、細(xì)胞概況11-13
• 二、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀13-16
• 第二節(jié) 乳腺癌術(shù)后乳房重建的研究進(jìn)展16-19
• 一、乳腺癌的治療現(xiàn)狀16-17
• 二、乳房重建的方式與時(shí)機(jī)選擇17-18
• 三、現(xiàn)行乳房重建術(shù)的不足18-19
• 第三節(jié) 皮膚軟組織擴(kuò)張術(shù)的研究進(jìn)展19-22
• 一、皮膚軟組織擴(kuò)張術(shù)19-20
• 二、皮膚軟組織擴(kuò)張術(shù)的研究進(jìn)展20-21
• 三、皮膚軟組織擴(kuò)張術(shù)在乳房重建中的應(yīng)用21-22
• 第二章 實(shí)驗(yàn)研究22-35
• 第一節(jié) 豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定22-31
• 一、儀器與試藥23-25
• 二、實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-30
• 四、小結(jié)30-31
• 第二節(jié) 建立動(dòng)物模型31-33
• 一、儀器與試藥31-32
• 二、實(shí)驗(yàn)方法32
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果32
• 四、小結(jié)32-33
• 第三節(jié) 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞注入動(dòng)物模型33-35
• 一、儀器與試藥33
• 二、實(shí)驗(yàn)方法33
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-34
• 四、小結(jié)34-35
• 結(jié)語(yǔ)35-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況42-43
• 致謝43

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離、鑒定及聯(lián)合擴(kuò)張器建立乳房重建模型的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：370301