本文關(guān)鍵詞：豬脂肪間充質(zhì)干細胞分離、鑒定及聯(lián)合擴張器建立乳房重建模型的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 1.從五指山小型豬項背部皮下脂肪組織中分離提取脂肪間充質(zhì)干細胞,進行體外培養(yǎng)原代脂肪間充質(zhì)干細胞,傳代、凍存,檢測脂肪間充質(zhì)干細胞表面抗原標記,誘導培養(yǎng)基誘導分化檢測其分化特性； 2.膚軟組織擴張器置入五指山小型豬腹部皮下,調(diào)整模型形狀,塑造理想的乳房模型； 3.脂肪間充質(zhì)干細胞,分次注入擴張器塑造的模型中,觀察模型外形變化,觀察局部細胞分化情況,,探討脂肪間充質(zhì)干細胞用于乳房重建的可行性,為脂肪間充質(zhì)干細胞由基礎(chǔ)到臨床轉(zhuǎn)化提供理論依據(jù)。 方法： 1.原代脂肪間充質(zhì)干細胞：采用膠原酶消化法,從脂肪組織中分離提取原代脂肪間充質(zhì)干細胞,通過干細胞培養(yǎng)基體外培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細胞,常規(guī)傳代、凍存,檢測脂肪間充質(zhì)干細胞的穩(wěn)定性,流式細胞儀檢測脂肪間充質(zhì)干細胞表面抗原標記,成骨、成脂誘導培養(yǎng)基誘導分化,油紅0染色鑒定成脂分化結(jié)果,茜素紅染色鑒定成骨誘導分化結(jié)果； 2.動物模型：全麻五指山小型豬,將10ml定制小型圓形皮膚擴張器置入腹部皮下,通過注射壺間斷注入生理鹽水,塑造理想的乳房模型； 3.脂肪間充質(zhì)干細胞局部分化情況：每次從注射壺抽出部分擴張器內(nèi)生理鹽水并在擴張器表面的皮下脂肪組織內(nèi)注入篩選的脂肪間充質(zhì)干細胞,觀察模型外形變化情況,免疫組化法鏡下觀察局部細胞分化情況。 結(jié)果： 1.1%的Ⅰ型膠原酶消化法可以從脂肪組織中分離提取出原代脂肪間充質(zhì)干細胞,流式細胞儀檢測細胞表面抗原標記CD34、CD45陰性表達,CD44、CD105陽性表達,經(jīng)歷約2—3周誘導培養(yǎng)后,成脂誘導組鏡下可見細胞內(nèi)大量圓形脂滴形成,油紅O染色顯示脂滴著色呈橘紅色；成骨誘導組可見大量結(jié)節(jié)形成,茜素紅染色顯示細胞內(nèi)鈣化結(jié)節(jié)形成； 2.注射壺向擴張器內(nèi)定期分次注入生理鹽水可以塑造出理想的乳房模型； 3.觀察通過擴張器局部注入脂肪間充質(zhì)干細胞后皮膚組織局部外形在短期內(nèi)未見明顯變化,免疫組化檢測局部細胞分化情況可見局部脂肪細胞數(shù)目增多。 結(jié)論： 1.肪間充質(zhì)干細胞可以成功從脂肪組織中分離提取并進行體外培養(yǎng),流式細胞儀和分化結(jié)果顯示脂肪間充質(zhì)干細胞表達干細胞特性； 2.實驗部分證實脂肪間充質(zhì)干細胞可以根據(jù)局部微環(huán)境分化成為周圍細胞的特性； 3.間充質(zhì)干細胞有望成為乳房重建的種子細胞,但是脂肪間充質(zhì)干細胞的分化的具體機制和安全性尚待進一步證實。
【關(guān)鍵詞】：脂肪間充質(zhì)干細胞 擴張器 乳房重建
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R655.8;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 目錄7-9
• 引言9-11
• 第一章 文獻研究11-22
• 第一節(jié) 脂肪間充質(zhì)干細胞研究現(xiàn)狀11-16
• 一、細胞概況11-13
• 二、脂肪間充質(zhì)干細胞的研究現(xiàn)狀13-16
• 第二節(jié) 乳腺癌術(shù)后乳房重建的研究進展16-19
• 一、乳腺癌的治療現(xiàn)狀16-17
• 二、乳房重建的方式與時機選擇17-18
• 三、現(xiàn)行乳房重建術(shù)的不足18-19
• 第三節(jié) 皮膚軟組織擴張術(shù)的研究進展19-22
• 一、皮膚軟組織擴張術(shù)19-20
• 二、皮膚軟組織擴張術(shù)的研究進展20-21
• 三、皮膚軟組織擴張術(shù)在乳房重建中的應用21-22
• 第二章 實驗研究22-35
• 第一節(jié) 豬脂肪間充質(zhì)干細胞的分離、鑒定22-31
• 一、儀器與試藥23-25
• 二、實驗方法25-28
• 三、實驗結(jié)果28-30
• 四、小結(jié)30-31
• 第二節(jié) 建立動物模型31-33
• 一、儀器與試藥31-32
• 二、實驗方法32
• 三、實驗結(jié)果32
• 四、小結(jié)32-33
• 第三節(jié) 脂肪間充質(zhì)干細胞注入動物模型33-35
• 一、儀器與試藥33
• 二、實驗方法33
• 三、實驗結(jié)果33-34
• 四、小結(jié)34-35
• 結(jié)語35-39
• 參考文獻39-42
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況42-43
• 致謝43

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王君;付小兵;李存保;;骨髓間充質(zhì)干細胞的免疫逃逸機制[J];創(chuàng)傷外科雜志;2006年05期

2 王蓓,汪維偉;間充質(zhì)干細胞的研究進展[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;2005年06期

3 湯琦;黃云超;;假體乳房重建術(shù)(隆乳術(shù))后包膜攣縮及其與感染相關(guān)性研究進展[J];中國醫(yī)藥科學;2013年17期

4 羅肖;李惠俠;楊公社;;豬脂肪組織發(fā)育過程中Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)基因及脂肪轉(zhuǎn)錄因子的時序表達[J];生物工程學報;2008年05期

5 屈長青;朱茂英;劉生杰;聶傳朋;;脂肪間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)、多向分化及其應用前景[J];中國生物化學與分子生物學報;2007年10期

6 房林;宋維銘;;脂肪間充質(zhì)干細胞多向分化潛能的特征[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年29期

7 顧廣祥;施曉雷;杭化蓮;丁義濤;;BrdU作為脂肪干細胞標記示蹤法的可行性[J];世界華人消化雜志;2010年01期

8 孔維霞;江小霞;毛寧;;間充質(zhì)干細胞的免疫調(diào)節(jié)功能及間充質(zhì)干細胞在治療自身免疫疾病中的應用[J];中國實驗血液學雜志;2009年06期

9 鮑菁;劉偉;;脂肪干細胞促新血管生成的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2010年18期

10 卓睿;凌文津;石雪楓;董潔;林森;丘平;;乳腺癌術(shù)后即時擴展型背闊肌肌皮瓣乳房重建27例分析[J];中華乳腺病雜志(電子版);2009年03期

  本文關(guān)鍵詞：豬脂肪間充質(zhì)干細胞分離、鑒定及聯(lián)合擴張器建立乳房重建模型的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：370301