本文關(guān)鍵詞：化學(xué)誘導(dǎo)小鼠肝癌模型中CD133和β-catenin的動態(tài)變化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：檢測CD133和β-catenin在化學(xué)誘導(dǎo)C57BL/6J小鼠肝癌形成過程中各階段的動態(tài)變化。 方法：通過化學(xué)物(DEN/CCl4/Ethanol)誘導(dǎo)50只C57BL/6J雄性小鼠肝癌形成,對照組是45只正常的C57BL/6J雄性小鼠。觀察小鼠誘癌過程中的背毛變化情況及生長狀態(tài),第4周起每2周定期處死小鼠獲取肝組織或肝癌組織標本進行病理學(xué)切片觀察,并采用熒光實時定量PCR、免疫組織化學(xué)法、蛋白質(zhì)印跡法和FCM法分別檢測CD133mRNA、蛋白及細胞表面抗原的表達情況。同時采用熒光實時定量PCR、免疫組織化學(xué)法和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測p-catenin mRNA和蛋白的表達情況。 結(jié)果：化學(xué)誘導(dǎo)20周時,成功誘導(dǎo)出小鼠肝癌。熒光實時定量PCR和FCM檢測結(jié)果顯示,第8周后誘癌組小鼠肝組織或肝癌組織中CD133的表達均高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.001)；隨著誘癌時間的增加,CD133的表達量呈上升趨勢,第16周時誘癌組CD133的表達明顯高于前期誘癌組(P0.001)。蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果顯示,誘癌組CD133蛋白從第4周起出現(xiàn)弱表達,隨著誘癌時間的遞增,CD133蛋白表達量逐漸增多。免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果顯示,誘癌組第8周CD133呈弱陽性表達,第16周呈中等陽性,第20周呈強陽性；而正常對照組未見表達。熒光實時定量PCR第4周起誘癌小鼠肝組織或肝癌組織中β-catenin的表達均高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；隨著誘癌時間的增加,β-catenin的表達量呈上升趨勢,第18和20周時誘癌組β-catenin的表達明顯高于前一誘癌組(P0.05或P0.001)。免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示對照組小鼠肝組織β-catenin細胞膜及細胞漿上有表達.未見細胞核有表達。誘癌組第8周小鼠肝組織β-catenin的細胞核有表達,細胞膜表達較對照組減弱、細胞漿表達同對照組。誘癌組第16周小鼠肝組織可見β-catenin在細胞核和細胞漿的大量表達,未見明顯的細胞膜表達。誘癌組第20周小鼠肝癌組織出現(xiàn)明顯的β-catenin細胞核表達,較第16周表達增多,細胞漿也可見表達,但較第16周表達減少；未見明顯的細胞膜表達。通過蛋白印記法發(fā)現(xiàn)誘癌組第4周起至第14周細胞核內(nèi)β-catenin有明顯表達,細胞質(zhì)內(nèi)的表達也較正常對照組多,這期間誘癌組間細胞核和細胞漿內(nèi)β-catenin表達無明顯差異。誘癌組中第16周可發(fā)現(xiàn)細胞漿內(nèi)的β-catenin蛋白表達較之前誘癌組降低,第20周降至最低；而第18周和第20周細胞核的β-catenin蛋白表達明顯多于前面時間段,第20周最多。 結(jié)論：肝癌干細胞標志CD133參與了肝癌的發(fā)生、發(fā)展全過程,隨著誘癌進展其表達量逐漸增加。隨著肝癌演變,細胞漿內(nèi)的β-catenin蛋白有可能向細胞核內(nèi)移位,致使細胞核內(nèi)β-catenin蛋白更進一步累積。β-catenin蛋白在細胞膜、細胞漿和細胞核中于正常肝臟組織、肝硬化、肝癌分布均不相同,表明β-catenin與肝癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 小鼠肝癌模型 肝癌干細胞標志 CD133 β-catenin
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R735.7;R-332
【目錄】：

• 目錄3-4
• 中英文縮略表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-11
• 第一部分11-15
• 材料和方法11-13
• 結(jié)果13-15
• 第二部分15-40
• 材料15-17
• 實驗方法及步驟17-25
• 統(tǒng)計學(xué)方法25-26
• 結(jié)果26-35
• 討論35-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-44
• 文獻綜述44-56
• 參考文獻50-56
• 致謝56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊洋;周善璧;;轉(zhuǎn)化生長因子β_1在角膜移植術(shù)后的免疫抑制作用[J];國際眼科雜志;2006年04期

2 匡志鵬;謝裕安;楊帆;梁安民;羅小玲;吳繼寧;;C57BL/6J小鼠肝癌動物模型的建立[J];中國普通外科雜志;2007年07期

3 石程劍;秦仁義;石秀春;田銳;王敏;宮偉強;;人膽囊癌CD133~+細胞亞群致瘤性的實驗研究[J];腫瘤;2010年09期

  本文關(guān)鍵詞：化學(xué)誘導(dǎo)小鼠肝癌模型中CD133和β-catenin的動態(tài)變化，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：369640