人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討
發(fā)布時間:2017-05-15 22:07
本文關(guān)鍵詞:人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:背景:關(guān)于人類髓核細胞的分離培養(yǎng)方法不一,如何提高人類髓核細胞獲得效率的問題尚未解決。 目的:優(yōu)選人類髓核細胞制備的消化酶組分。 方法:無菌條件下取急性外傷后人類椎間盤髓核組織,按不同混合酶組分劃分為2組,Ⅰ組成分為0.2%Ⅱ型膠原酶;Ⅱ組成分為先用0.25%胰酶消化30min,再用0.2%Ⅱ型膠原酶。每組再按消化時間分為2h,,4h,過夜3個亞組。最后重懸細胞終體積均定位2mL并計數(shù),采用含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液體外培養(yǎng)細胞。 結(jié)果與結(jié)論:采用2種不同酶組分進行消化,發(fā)現(xiàn)消化時間2h及4h時Ⅱ組消化細胞更多,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在孵育過夜組中,Ⅰ和Ⅱ組的細胞活性細胞率明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.05)。在作用4h時,組織塊消失,計數(shù)細胞數(shù)量最多,提示0.2%Ⅱ型膠原酶、消化人類髓核組織4h為獲取人類髓核細胞的最佳條件。
【關(guān)鍵詞】:人類 髓核細胞 Ⅱ型膠原酶 胰酶 消化 MTT
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R329
【目錄】:
- 摘要4-5
- 英文縮略詞表5-7
- 0 引言7-9
- 1 對象和方法9-13
- 設(shè)計9
- 時間及地點9
- 材料9
- 納入標準9-10
- 主要試劑及儀器10
- 方法10-11
- 酶處理及分組11-12
- 細胞計數(shù)12
- 細胞培養(yǎng)及傳代12
- 細胞增殖能力檢測12-13
- 主要觀察指標13
- 統(tǒng)計學(xué)分析13
- 2 結(jié)果13-16
- 2.1 不同組分酶分離細胞的數(shù)量13-14
- 2.2 不同組分酶對細胞存活率的影響14-15
- 2.3 不同組分酶液對細胞增殖能力的影響15-16
- 3 討論16-18
- 參考文獻18-21
- 綜述21-28
- 參考文獻24-28
- 致謝28
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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本文關(guān)鍵詞:人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:369001
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