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人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討

發(fā)布時間:2017-05-15 22:07

  本文關(guān)鍵詞:人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景:關(guān)于人類髓核細胞的分離培養(yǎng)方法不一,如何提高人類髓核細胞獲得效率的問題尚未解決。 目的:優(yōu)選人類髓核細胞制備的消化酶組分。 方法:無菌條件下取急性外傷后人類椎間盤髓核組織,按不同混合酶組分劃分為2組,Ⅰ組成分為0.2%Ⅱ型膠原酶;Ⅱ組成分為先用0.25%胰酶消化30min,再用0.2%Ⅱ型膠原酶。每組再按消化時間分為2h,,4h,過夜3個亞組。最后重懸細胞終體積均定位2mL并計數(shù),采用含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液體外培養(yǎng)細胞。 結(jié)果與結(jié)論:采用2種不同酶組分進行消化,發(fā)現(xiàn)消化時間2h及4h時Ⅱ組消化細胞更多,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在孵育過夜組中,Ⅰ和Ⅱ組的細胞活性細胞率明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0.05)。在作用4h時,組織塊消失,計數(shù)細胞數(shù)量最多,提示0.2%Ⅱ型膠原酶、消化人類髓核組織4h為獲取人類髓核細胞的最佳條件。
【關(guān)鍵詞】:人類 髓核細胞 Ⅱ型膠原酶 胰酶 消化 MTT
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R329
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • 英文縮略詞表5-7
  • 0 引言7-9
  • 1 對象和方法9-13
  • 設(shè)計9
  • 時間及地點9
  • 材料9
  • 納入標準9-10
  • 主要試劑及儀器10
  • 方法10-11
  • 酶處理及分組11-12
  • 細胞計數(shù)12
  • 細胞培養(yǎng)及傳代12
  • 細胞增殖能力檢測12-13
  • 主要觀察指標13
  • 統(tǒng)計學(xué)分析13
  • 2 結(jié)果13-16
  • 2.1 不同組分酶分離細胞的數(shù)量13-14
  • 2.2 不同組分酶對細胞存活率的影響14-15
  • 2.3 不同組分酶液對細胞增殖能力的影響15-16
  • 3 討論16-18
  • 參考文獻18-21
  • 綜述21-28
  • 參考文獻24-28
  • 致謝28

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 賽佳明;胡有谷;王德春;;椎間盤髓核細胞組織塊法原代培養(yǎng)[J];脊柱外科雜志;2006年05期

2 張榮峰;阮狄克;張超;孫海燕;易紅蕾;王愛蘭;;不同代次成人正常髓核細胞的形態(tài)及生長動力學(xué)比較[J];脊柱外科雜志;2008年03期

3 葉冬平;梁偉國;戴麗冰;沈雁;;人正常椎間盤髓核細胞體外不同培養(yǎng)代次的生物學(xué)性狀分析:適應(yīng)于組織工程椎間盤種子細胞的選擇[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年24期

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5 李鋒生;梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;體外培養(yǎng)人退變髓核細胞的生物學(xué)性狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年28期


  本文關(guān)鍵詞:人類髓核細胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:369001

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