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脂肪來(lái)源干細(xì)胞旁分泌效應(yīng)對(duì)平滑肌細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-15 19:01

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【摘要】:目的:分離培養(yǎng)脂肪來(lái)源干細(xì)胞(Adipose-derived Stem Cells, ADSCs),觀察其培養(yǎng)上清液對(duì)平滑肌細(xì)胞凋亡的影響,探討其對(duì)Bax/Bcl-2基因表達(dá)的影響。 方法:取同源SD大鼠腹腔脂肪組織,經(jīng)分離培育三代擴(kuò)增數(shù)量。取第三代ADSCs(細(xì)胞密度1×106)收集其培養(yǎng)上清液(Adipose-derived Stem Cells conditioned medium, ADSC-CM)。取第三代平滑肌細(xì)胞(細(xì)胞密度5×105),實(shí)驗(yàn)分三組:(1)對(duì)照組:用10%FSB正常培養(yǎng)細(xì)胞,(2)模型組:用不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞24h,制造凋亡模型后,用1%FBS培養(yǎng)24h,(3)上清液組:用不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞24h,制造凋亡模型后,用3ml ADSC-CM加3ml1%FBS培養(yǎng)24h,顯微鏡下觀察平滑肌細(xì)胞形態(tài)。利用流式細(xì)胞儀技術(shù)分析凋亡率,采用RT-PCR法檢測(cè)Bcl-2、Bax mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果:1、顯微鏡下觀察平滑肌細(xì)胞形態(tài):模型組平滑肌細(xì)胞皺縮、體積減小、細(xì)胞漂浮的數(shù)量明顯大于實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組。 2、流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率為11.50±0.60%,比模型組(17.48±0.70%)明顯減少(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上清液組的晚期凋亡率及死亡率分別為10.23±2.75%,5.80±0.41%,與模型組相比(17.06±1.72%,13.19±1.91%)明顯減少(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、RT-PCR結(jié)果顯示:上清液組Bax/Bcl-2的比值為0.49±0.10,比模型組(0.69±0.07)明顯減少(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上清液組Bcl-2表達(dá)(1.26±0.02)明顯比模型組(1.13±0.04)升高(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Bax的表達(dá)實(shí)驗(yàn)組(0.76±0.12)與模型組(0.65±0.10)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:脂肪來(lái)源干細(xì)胞可通過(guò)下調(diào)Bax/Bcl-2基因表達(dá)比值抵抗平滑肌細(xì)胞凋亡,具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。
【關(guān)鍵詞】:脂肪來(lái)源干細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【目錄】:
  • 1、論文:脂肪來(lái)源干細(xì)胞旁分泌效應(yīng)對(duì)平滑肌細(xì)胞凋亡的影響1-21
  • 英漢縮略詞對(duì)照表4-5
  • 中文摘要5-6
  • 英文摘要6-7
  • 前言7-8
  • 材料與方法8-12
  • 結(jié)果12-17
  • 討論17-18
  • 結(jié)論18-19
  • 參考文獻(xiàn)19-21
  • 2、綜述:干細(xì)胞與動(dòng)脈粥樣硬化21-29
  • 參考文獻(xiàn)25-29
  • 3、致謝29-30
  • 4、作者簡(jiǎn)介30

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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3 李賓公;曾秋棠;王紅祥;毛曉波;;Effect of Cytokines Secreted by Human Adipose Stromal Cells on Endothelial Cells[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)英德文版);2006年04期

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5 陳劍飛;黃嵐;武曉靜;晉軍;趙曉暉;趙謹(jǐn)紅;劉蘭;周健;于世勇;;移植不同年齡大鼠骨髓EPCs對(duì)損傷內(nèi)膜增殖的影響[J];中國(guó)病理生理雜志;2007年11期

6 方順淼;張清華;蔣知新;;骨髓干細(xì)胞動(dòng)員對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化破裂斑塊的穩(wěn)定與修復(fù)作用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2009年03期

7 余俊;阮秋蓉;;利用Psm22α-EGFP-1質(zhì)粒重組體從小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞中分選平滑肌祖細(xì)胞[J];中華病理學(xué)雜志;2007年12期


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本文編號(hào):368562

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