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脂肪干細(xì)胞高效率向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-15 07:40

  本文關(guān)鍵詞:脂肪干細(xì)胞高效率向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:【目的】研究大鼠脂肪干細(xì)胞高效率的向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化;攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的慢病毒轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞的效率和轉(zhuǎn)染后的脂肪干細(xì)胞成骨,成脂誘導(dǎo)分化的能力。 【方法】大鼠脂肪干細(xì)胞在含20ng/ml EGF,20ng/ml FGF-2,2%B27的無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),分兩組:一組在不經(jīng)任何處理(不含任何促進(jìn)細(xì)胞貼壁的物質(zhì),如PLL等)的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),一組在經(jīng)處理(含促進(jìn)細(xì)胞貼壁的物質(zhì))的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。攜帶GFP的慢病毒轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染48小時(shí)后熒光顯微鏡下觀察病毒轉(zhuǎn)染后脂肪干細(xì)胞內(nèi)綠色熒光蛋白的表達(dá);油紅O染色及茜素紅染色鑒定病毒轉(zhuǎn)染后脂肪干細(xì)胞的成脂,成骨誘導(dǎo)分化的能力。 【結(jié)果】在不經(jīng)任何處理的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)時(shí),大鼠脂肪干細(xì)胞能高效率的向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化,誘導(dǎo)分化的神經(jīng)祖細(xì)胞呈神經(jīng)球樣的形態(tài),高水平表達(dá)nestin。但在經(jīng)處理的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),只有很少的神經(jīng)球出現(xiàn)。在沒(méi)有生長(zhǎng)因子(EGF,FGF-2)時(shí),脂肪干細(xì)胞源的神經(jīng)祖細(xì)胞能向神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化,表達(dá)NeuN, GFAP。而nestin的表達(dá)下調(diào)。攜帶GFP的慢病毒轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞48小時(shí),熒光表達(dá)率可達(dá)85%;攜帶GFP的慢病毒轉(zhuǎn)染的脂肪干細(xì)胞流式結(jié)果示:CD29表達(dá)99.8%,CD34表達(dá)0.3%,CD44表達(dá)0.3%,CD45表達(dá)48.7%;茜素紅染色呈紅色鈣結(jié)節(jié);油紅O染色顯示有大量脂滴。 【結(jié)論】在含20ng/ml EGF,20ng/ml FGF-2,2%B27的無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),,且不含任何促細(xì)胞貼壁的因素下,脂肪干細(xì)胞能高效率的向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化。脂肪干細(xì)胞源的神經(jīng)祖細(xì)胞為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的自體細(xì)胞移植治療帶來(lái)了希望。攜帶GFP的慢病毒能有效的轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后的脂肪干細(xì)胞仍具有多向分化的能力?蓴y帶目的基因進(jìn)行基因治療。
【關(guān)鍵詞】:脂肪干細(xì)胞 神經(jīng)祖細(xì)胞 不經(jīng)處理的培養(yǎng)瓶 分化的神經(jīng)細(xì)胞 攜帶GFP的慢病毒 轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染效率 多向分化
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 前言9-11
  • 第一部分 SD大鼠脂肪干細(xì)胞高效率向神經(jīng)祖細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究11-23
  • 材料和方法11-17
  • 結(jié)果17-21
  • 討論21-23
  • 結(jié)論23
  • 第二部分 攜帶GFP的慢病毒轉(zhuǎn)染的SD大鼠脂肪干細(xì)胞多向分化潛能的研究23-32
  • 材料和方法23-28
  • 結(jié)果28-31
  • 討論31-32
  • 結(jié)論32
  • 參考文獻(xiàn)32-37
  • 綜述37-51
  • 參考文獻(xiàn)43-51
  • 附錄51-52
  • 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 錢暉,黃淑幀;成體干細(xì)胞的可塑性:橫向分化還是細(xì)胞融合?[J];生命科學(xué);2005年01期

2 李躍萍;宋麗萍;邱曙東;;慢病毒載體在腫瘤基因治療中的應(yīng)用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2006年12期


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本文編號(hào):367149

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