發(fā)布時間：2017-05-15 07:06

  本文關(guān)鍵詞：TGF-β3對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：顳下頜關(guān)節(jié)盤軟骨缺損修復(fù)在口腔臨床上仍然是較大的挑戰(zhàn)。組織工程技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)為臨床實現(xiàn)顳下頜關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)與重建帶來了新的希望。然而成纖維軟骨種子細(xì)胞的來源依然是亟待解決的問題。具有多向分化潛能的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)已顯示了其作為種子細(xì)胞的優(yōu)勢,為成纖維軟骨類組織修復(fù)帶來了希望。本研究考察了轉(zhuǎn)錄生長因子TGF-β3對ADSCs生長形貌及向成纖維軟骨細(xì)胞分化的影響。方法：采用10μg/ml TGF-β3誘導(dǎo)SD大鼠ADSCs,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)變化,組織學(xué)和免疫熒光染色等方法檢測ADSCs產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)I型膠原、II型膠原(Collagen Ⅰ/Ⅱ)和蛋白多糖的情況,RT-PCR檢測軟骨特異蛋白的表達(dá),初步評價ADSCs作為纖維軟骨組織工程種子細(xì)胞的可行性。同時,在不同時間點(誘導(dǎo)2周、誘導(dǎo)3周),觀察誘導(dǎo)時間對ADSCs分化的影響。結(jié)果：阿利新藍(lán)染色結(jié)果表明,經(jīng)TGF-β3誘導(dǎo),ADSCs顯示明顯的深藍(lán)色,表明ADSCs合成了大量的糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)。免疫染色結(jié)果表明在TGF-β3誘導(dǎo)下,ADSCs合成Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原細(xì)胞外基質(zhì)。大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)TGF-β3誘導(dǎo)2周后向纖維軟骨細(xì)胞分化,誘導(dǎo)組部分脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞呈星形或多角形,免疫組化染色顯示有特異性蛋白Collagen Ⅰ/Ⅱ表達(dá),RT-PCR檢測也表明有CollagenI／II表達(dá)；而3周誘導(dǎo)組則表現(xiàn)向透明軟骨分化的傾向,對照組表達(dá)不明顯。結(jié)論：這些結(jié)果表明TGF-β3誘導(dǎo)了ADSCs向成纖維軟骨樣細(xì)胞分化,也意味著ADSCs具有作為工程化纖維軟骨種子細(xì)胞的潛能。誘導(dǎo)時間的選擇有促進大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向不同軟骨細(xì)胞分化的作用。
【關(guān)鍵詞】：TGF-β3 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 纖維軟骨 組織工程
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-5
• 縮略詞表5-9
• 文獻回顧9-16
• 1. 引言9
• 2. 脂肪干細(xì)胞的分離9
• 3. 脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)9-10
• 4. 脂肪干細(xì)胞的鑒定10
• 5. 脂肪干細(xì)胞的多向分化潛能10-12
• 5.1 向軟骨細(xì)胞分化10-11
• 5.2 向脂肪細(xì)胞分化11
• 5.3 向成骨細(xì)胞分化11-12
• 5.4 向其他細(xì)胞分化12
• 6. 存在問題與展望12-14
• 參考文獻14-16
• 第一部分 TGF-β3對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響16-25
• 1. 材料與方法17-18
• 1.1 材料與儀器17
• 1.2 SD大鼠ADSCs的培養(yǎng)17
• 1.3 TGF-β3誘導(dǎo)ADSCs成纖維軟骨細(xì)胞分化的細(xì)胞形貌觀察17-18
• 1.4 阿利新藍(lán)染色18
• 1.5 免疫組織化學(xué)染色18
• 2. 結(jié)果18-21
• 2.1 誘導(dǎo)分化前后的細(xì)胞形態(tài)變化18-19
• 2.2 阿利新藍(lán)染色19-20
• 2.3 Ⅰ型膠原和Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色20-21
• 3. 討論21-23
• 參考文獻23-25
• 第二部分 誘導(dǎo)時間對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響25-38
• 1. 材料26-29
• 1.1 實驗儀器和試劑26-27
• 1.1.1 實驗儀器26
• 1.1.2 實驗試劑配制26-27
• 1.2 細(xì)胞培養(yǎng)27-29
• 1.2.1 SD ADSCs細(xì)胞復(fù)蘇27-28
• 1.2.2 SD ADSCs細(xì)胞凍存28
• 1.2.3 SD ADSCs細(xì)胞培養(yǎng)與傳代28
• 1.2.4 SD ADSCs細(xì)胞計數(shù)28-29
• 2. 方法29-30
• 2.1 SD大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)及觀察29
• 2.2 阿利新藍(lán)染色29
• 2.3 免疫組織化學(xué)染色29-30
• 2.4 實時定量PCR(real-time quantitative PCR)/QPCR30
• 3. 結(jié)果30-34
• 3.1 ADSCs形態(tài)學(xué)觀察30-31
• 3.2 誘導(dǎo)組分化后的形態(tài)變化31
• 3.3 阿利新藍(lán)染色31-32
• 3.4 Ⅰ型膠原和Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色32-33
• 3.4.1 Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色32
• 3.4.2 Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色32-33
• 3.5 實時定量PCR(real-time quantitative PCR)/QPCR檢測33-34
• 4. 討論34-36
• 參考文獻36-38
• 綜述38-46
• 摘要38
• Abstract38-39
• 1. 種植體支抗形態(tài)對穩(wěn)定性影響的組織學(xué)研究39
• 2. 種植體支抗表面處理對穩(wěn)定性影響的組織學(xué)研究39-40
• 3. 種植體支抗植入方式對穩(wěn)定性影響的組織學(xué)研究40
• 4. 種植體支抗種植后的愈合對種植釘支抗穩(wěn)定性的組織學(xué)研究40-41
• 5. 力學(xué)加載因素對種植體支抗穩(wěn)定性影響的組織學(xué)研究41-43
• 5.1 正畸力加載對愈合的影響41
• 5.2 加力時機對種植體支抗穩(wěn)定性的組織學(xué)研究41-42
• 5.3 加力大小對種植釘支抗穩(wěn)定性的組織學(xué)研究42-43
• 參考文獻43-46
• 攻讀碩士學(xué)位期間研究成果46-47
• 致謝47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 吳晶,白玉興,王邦康,高曉輝;微型支抗種植釘愈合期骨結(jié)合狀態(tài)的組織學(xué)觀察[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2005年04期

2 郭彪;翟穎超;鄒敬才;;正畸種植體支抗穩(wěn)定性的研究進展[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2010年05期

3 嚴(yán)擁慶;高益鳴;錢玉芬;;支抗種植體的組織學(xué)研究進展[J];上海口腔醫(yī)學(xué);2006年06期

  本文關(guān)鍵詞：TGF-β3對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：367071